AFLP技术发展及其在水产生物学研究中的应用

扩增片段长度多态性(AFLP)是一种有效的分子生物学分析方法,既有RFLP技术的可靠性又具有RAPD技术的高效性.该方法高效、灵敏、模板需要量少、多态性强,且实验结果稳定性、重复性好.本文简要介绍了该技术的发生及发展,并主要阐述了该技术在水产生物学的遗传多样性分析、高密度遗传图谱的构建、遗传育种操作效应监测、种质鉴定、基因的定位及分离、系统分类和进化等方面的应用.同时预测了AFLP在水产生物甲基化研究中潜在的应用前景.     

日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳的样品制备方法的改进

采用一种能同时提取RNA、DNA和Protein的试剂(RDP试剂)进行日本囊对虾性腺总蛋白质的制备,并通过双向电泳(2 - DE)技术与传统的裂解液法比较提取效果.RDP法所得2- DE图谱清晰,条纹少,蛋白质点数多,而裂解液法存在横向和纵向拖尾,其碱性端蛋白质点大量缺失,说明RDP法能有效去除蛋白质样品中盐离子、脂...     

水产生物技术概述

者重阐述丁生物技术在水产生物优良品种选育,水生生物种质资源鉴定、保存与利用,水产养殖生物病害防治与快速诊断及新型饲料造白源与促生长饲料添加剂的研制与开发等方面所发挥的巨大作用。     

多重PCR技术分析日本对虾Marsupenaeus japonicus精巢和卵巢差异表达基因

通过多重PCR方法,对采用SSH(抑制消减杂交)技术制备日本对虾卵巢特异探针并筛选卵巢cDNA全长文库所获得的8个阳性克隆进行分析,研究这些新克隆的基因在精巢和卵巢的差异表达情况。这8个基因可分为二类,一类为卵巢特异表达的基因,一类为卵巢的表达量高于精巢的差异表达基因。     

红螯光壳螯虾Hsp70基因的特征及其在热应激下的表达

从NCBI数据库中获得红螯光壳螯虾CqHsp70的cDNA全长2231 bp,可编码643个氨基酸,其中4—598aa为HSP70结构域。实时定量PCR结果表明,CqHsp70基因在红螯光壳螯虾的鳃、肝胰腺、血液中均有表达。在高温（34 ℃）应激过程中,红螯光壳螯虾CqHsp70基因在三个组织中的表达量呈先升高后降低的模式,在12 h时表达量最高,与对照组存在显著性差异。这一结果说明高温应激后的12 h是红螯光壳螯虾调控热应激的关键点,在夏天高温季节的养殖过程中应特别加以注意。     

真鲷视顶盖的细胞构筑

次甲基蓝染色及快Golgi法显示,真(?)(Chrysophrys major)视顶盖结构组成由表及里依次为边缘层、视觉层、表面灰管及纤维层、中央灰质层、中央白质层、(?)脑室层,除边缘层外,每一层各含有不同类型的神经元。     

真鲷耗氧率的初步研究

应用测定流水中溶氧量的方法 ,对真鲷耗氧率进行研究 .结果表明 :真鲷耗氧率随水温的升高而升高 ,鱼平均体重 1 2 0 .6～ 1 3 2 .4g,水温 1 9℃时 ,按鱼体重计 (下同 ) ,耗氧率为 2 .677μg/(g·min) ;2 9℃时 ,耗氧率达 5 .841 μg/(g·min) .真鲷的耗氧量随个体的增大而增大 ,耗氧率则随个体的增大而降低 .在水源 pH7.4、盐度 2 1、水温 1 9℃条件下 ,鱼平均体重 1 2 9.5 g ,耗氧率存在昼夜变化 ,1 7∶0 0耗氧率最高 ,为 (3 .877±0 .2 5 7) μg/(g·min) ,0 7∶0 0耗氧率最低 ,为 (1 .0 3 1 ± 0 .2 5 5 ) μg/(g·min) .真鲷白天的平均耗氧率为 2 .1 62 μg/(g·min) ,夜间的平均耗氧率为 2 .2 71 μg/(g·min) ,其代谢水平的昼夜变化不明显 .     

中国沿海真鲷群体遗传多样性的同工酶电泳分析

用同工酶电泳技术研究威海、厦门、北部湾3个海区真鲷群体的遗传多态性和群体之间的遗传趋异，共观测了LDH、MDH和EST3种酶11个基因位点，其中LDH的3个位点在3个群体都为单态，MDH有1个位点、EST有2—4个位点表现多态，3个群体多态位点数量和平均杂合度以威海群体最高(45．5％与0．161)，厦门群体次之(27．3％与0．156)，北部湾群体最低(27．3％与0．120)，北部湾与厦门海区的真鲷在遗传上较为相似，遗传距离0．012，威海海区真鲷与二者的差异较大，遗传距离分别达0．021(与厦门标本)和0．025(与北部湾标本)。     

笠贝幼虫变态相关基因筛选及分子网络构建

利用NCBI在线数字化差异显示工具（Digital Differential Display）对笠贝(Lottia gigantea)EST数据库进行筛选,获得笠贝幼虫时期显著差异表达基因203个,其中124个基因有Blast2Go注释结果,这124个基因可以归类成细胞组分、分子功能和生物学过程三大类;参与MAPK、Ras、PI3K-Akt、Rap1、cAMP等信号通路;涉及能量代谢、免疫应激、细胞分化、神经发育、细胞骨架、信号传递等生物学过程.将获得的转录子运用Cytoscape软件构建分子相互作用网络,最终获得7个核心转录子.涉及到神经发育、次生壳形成等相关基因调控关系.     

杂色鲍血清凝集素的初步研究

研究结果表明,杂色鲍血清中自然存在凝集素,该凝集素能够识别和凝集多种不同的细菌和人及动物的红细胞,其中对人体O型和B型血细胞的凝集效价显著高于A型和AB型血细胞(P<0.05);Ca2+能促进其凝集活性,而Mg2+则抑制其凝集活性;凝集作用不同程度地受反应介质的pH、离子强度及反应时间等因素的影响;该凝集素不被透析,在95℃、pH2.0～10.0时仍保持凝集活性,抗RNase、DNase、SDS和乙醚,对蛋白酶K、糖氧化剂NaIO4敏感;凝集素活性能被D-树胶醛糖、L-鼠李糖特异性抑制,D-果糖、D-木糖对其也有显著的抑制作用.