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目的:对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的阻遏蛋白LexA进行基因克隆、重组表达及蛋白纯化.方法:采用PCR法从PAO1株基因组中扩增出1 086 bp的LexA基因,将此基因片段插入到表达载体pET32a( )上,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.包涵体洗涤后用8 mol/L尿素溶解,以镍离子亲合柱层析作为第1步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第2步精细纯化,反相高相液相色谱法(HPLC)测定蛋白的浓度.结果:LexA以包涵体形式表达,表达量为45%,经镍离子亲合柱层析纯化后LexA蛋白纯度达到85%以上,回收率大于80%,镍离子亲合柱层析和凝胶过滤层析两步纯化目的蛋白,经HPLC测定,最终目的蛋白的纯度为98.97%.结论:在pET32a( )表达系统中实现了PA的LexA蛋白的高效表达,两步纯化法获得高纯度的目的蛋白,为进一步鉴定LexA靶位点奠定了基础. 相似文献
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维、汉族妇女宫颈病变进程与雌激素受体1(ESR1)蛋白表达缺失的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
以往的报道显示宫颈癌组织内的雌激素受体1(Estrogen Receptor 1,ESR1)基因启动子发生高度甲基化,并提示其基因表达水平可能下降或基因休眠。本研究从蛋白质水平观察ESR1表达缺失与宫颈病变进程的关系及其维、汉妇女族群差异。收集维吾尔族和汉族妇女宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变(Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN)I/II/III和宫颈鳞癌患者的福尔马林浸泡与石蜡包埋宫颈组织标本共180例,采用免疫组织化学方法鉴定ESR1蛋白表达水平。结果显示,ESR1蛋白在宫颈上皮和间质细胞均有表达,但是随着CIN和宫颈鳞癌的发病进程,其在上皮细胞内的表达逐渐发生缺失;ESR1蛋白表达缺失率在宫颈炎和CIN I组较低(22%),CIN II/III组明显升高(64%),宫颈鳞癌达到最高(76%),各组之间差异显著(P<0.01),但是在个体年龄之间无统计学差异(P>0.05)。维、汉妇女族群ESR1表达缺失率的变化趋势有共性,其族群差异也无统计学意义(P>0.05)。由此表明,ESR1表达缺失可能是宫颈鳞癌的早期预警指标,这为揭示该基因高度甲基化相关的表观遗传学机制提供了重要依据。 相似文献
55.
沙爱龙 《北京联合大学学报(自然科学版)》2009,23(2)
主要阐述了流式细胞仪在无脊椎动物血细胞分类、细胞免疫学、定量流式细胞分析、染色体核型分析、细胞核、细胞受体分析等研究中的应用,供研究无脊椎动物的科技工作者参考. 相似文献
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科技成果转化理论形成于计划经济时代,是计划科技体制的产物。在市场经济确立之初,科技成果转化理论指导了技术市场活动,对适应科技体制改革起到重要作用。但是,今天的技术市场不论从市场化程度还是发展规模都有了质的飞跃,科技成果转化理论在指导技术市场实践活动中显得力不从心。相比较而言,技术转移理论在内涵、研究内容、研究范围、以及研究系统性等方面优势明显,为技术市场理论从科技成果转化向技术转移理论嬗变提供了重要依据,为确立其在技术市场理论中的主导地位,科学指导技术市场实践活动奠定基础。 相似文献
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回顾性分析了21例经手术证实的胃肠道间质瘤的CT表现。21例肿瘤中发生于胃8例,小肠10例,结肠3例;其中恶性15例,良性6例。21例肿瘤CT表现为外生性或内生性肿块。肿块2.5-15cm。5cm者5例,≧5cm者16例。15例为恶性间质瘤,肿块密度不均,腔外不规则或分叶状肿块,界限不清,中心伴有坏死囊变。增强扫描明显的不均匀性强化多为恶性。良性CT显示一般小于2cm,密度均匀,边缘无分叶,界限清楚,均匀强化。CT有助于胃肠道间质瘤的定位,定性诊断。 相似文献
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建筑电气安装管理涉及到多个方面的内容,需要采取科学的方法进行严格的把关,对于每一道工序、每一道环节都要充分的重视,这样才能保证建筑电气的安全性和可靠性。本文在阐述了建筑电气安装的重要性的基础上,分析电气安装过程中存在的问题,并提出了相应的对策,旨在不断的消除安全隐患,保障人民的生命和财产安全。 相似文献
59.
为了提高数值求积的代数精确度,对Cotes数值积分公式的积分余项作出渐进估计,利用渐进估计对Cotes数值积分公式进行了改进,从而得到了具有7次代数精确的的改进Cotes积分公式。 相似文献
60.
中国植物保护学会和中国昆虫学会于1964午3月10—17日在武汉联合召开了全国第一届农林害虫生物防除会议,出席正式代表52人,列席代表27人,还特邀了湖北省有关专家5人。会议共收到论文126篇,其中天敌昆虫方面88篇,昆虫病原方面38篇。会上,刘崇乐教授作了“廿年来昆虫病理学三大进展”、高尚蔭教授作了“昆虫病毒研究进展”、曹诒孙教授作了“家蚕的僵病、卒倒病与害虫 相似文献