松属树种种苗鉴定中AFLP指纹技术的研究

AFLP(扩增片段长度多态性)标记技术是高效而可靠的标记技术之一，特别对于那些基因组序列信息很少的物种更为有效。笔对基因组较大的松属树种的AFLP实验程序进行了优化，提供了松树树种AFLP分析中DNA酶切、引物连接、预扩增及选择性扩增的优化实验程序。结果显示．预扩增反应中利用选择碱基数不同的预扩增引物(E/M 1，E／M-2)制备的模板对后续的选择性扩增结果没有显影响；在选择性扩增反应中，对碱基数目选择进行了细致的优化．分别测试了15个E-3M-3引物组合，6个E 4/M 3引物组合及15个E 3/M 4引物组合。对于有相同选择碱基数的引物．扩增结果随选择碱基的组合不同而有较大差异。据总的扩增结果发现，选择碱基增加时．扩增谱带数明显减少，谱带清晰度增加，即当选择碱基增加到E引物末端时(M十4／E 3)，大多数引物组合的扩增谱带数要比选择碱基增加到M引物末端(E 3/M 4)的引物组合扩出的谱带数少且带型清晰。总体来看，E 4/M 3的引物组合比较适合于松属树种的AFLP分析。笔还利用单株树种子的胚乳组织对AFLP标记的遗传方式进行了研究，在所用的两个引物组合获得的标记中，约有30％左右的分离标记．分离标记中偏分离比例约为6％。另外．选用3个松属树种对选出的14个AFLP引物组合进行的验证显示，这些组合在不同种间均获得了较好的扩增结果．说明在不同松属树种中筛选出的引物组合可以为其它松属树种AFLP分析引物组合的选择提供借鉴。     

低温胁迫下两种七叶树苗木超微结构的比较

以七叶树(Aesculus chinensis Bunge)和红花七叶树(A.pavia L.)1年生苗木为材料,经不同低温处理后,用透射电子显微镜观察其顶芽基部组织细胞超微结构的变化.结果表明:七叶树顶芽基部组织细胞死亡的基点温度和冷冻时间分别为-18℃条件下冷冻72 h、-30℃条件下冷冻24～72 h和-70℃条件下冷冻24 h.此时细胞超微结构表现为大部分细胞内含物降解,空泡化,细胞质解体,少数细胞虽未解体,但核膜已变得模糊不清;红花七叶树顶芽基部组织细胞死亡的基点温度和冷冻时间分别为-18℃条件下冷冻168 h、-30℃条件下冷冻168 h和-70℃条件下冷冻24 h.此时细胞超微结构表现为细胞出现质壁分离现象,细胞结构不清晰,细胞质解体,核凝聚,质膜上含较多电子致密的黑颗粒.从细胞超微结构的比较可以看出,红花七叶树的抗寒能力明显大于七叶树.     

超低温贮藏对油松种子的影响

通过测定油松种子超低温贮藏后的电导率、脱氢酶活性、发芽率和发芽指数,对油松种子长期超低温贮藏的可行性进行研究。结果表明:超低温可以应用于油松种子的贮藏;冷冻方式和解冻方式是影响油松种子超低温贮藏的重要因素;防冻保护剂可有效减少种子在超低温贮藏时受到的损伤,二甲基亚砜的保护作用较为明显。试验的最佳处理组合为:10%二甲基亚砜 快速冷冻 慢速解冻。     

银杏、板栗不同组织DNA的提取

利用CTAB方法提取银杏、板栗的冬芽、嫩叶、半木质化韧皮部、老枝韧皮部和成熟叶子的DNA。结果表明,除成熟叶子外,其它4种组织的DN较容易提取,且DNA的纯度较高,A260/A280值都在1.8以上,每100mg材料的产量为22～50μg。清晰明亮的PCR产物也表明所提取的DNA可满足DNA分子标记的要求。     

磁场对马尾松种子质量和POD、 SOD酶活性的影响

利用不同强度磁场处理马尾松种子,研究马尾松种子活力及其POD、 SOD活性的变化.结果发现:中等活力的马尾松种子经0.2T或0.3T磁场处理10min或15min,发芽率明显提高,尤以0.3T处理15min最为明显,发芽率提高到83%.这些处理条件对高活力马尾松种子的发芽率没有显著影响,但经0.3T磁场处理15min后种子的发芽势由32%提高到46%.此外,随着处理时间的延长,中等活力和高活力种子过氧化物酶活性均逐渐增强.中等活力种子经0.3T磁场处理15min,过氧化物酶活性比对照几乎增加了一倍,高活力种子过氧化物酶活性比对照增加了74%.磁场处理使中等活力马尾松种子超氧化物歧化酶活性由0.20(U/(g·min))提高到0.79U/(g·min),却降低了高活力种子超氧化物歧化酶的活性.     

关于林木种子质量分级问题的讨论

提出了《林木种子质量分级》及现行分级方法存在的问题，目前的质量分级标准（GB7908－1999）在某种程序上不能反映种子的真实质量，指出林木种子质量分级不能仅根据检验结果的大小参照植准直接确定，而应通过统计检验来判定种子质量等级。     

白皮松种子休眠研究进展

种子休眠普遍存在于高等植物中,是植物历经长期的自然选择而保存下来的一种生物学特性。白皮松(Pinus bungeana Zucc.)是中国特有种,观赏价值高,以种子繁殖为主,但种子具有深休眠特性,给苗木繁育带来一定困难。分析关于白皮松种子休眠的研究结果认为,休眠原因主要包括:种子成熟时种胚的发育状况,内、外种皮和胚乳含有种类和含量不尽相同的萌发抑制物且脱落酸类在各部位均存在并有较强的抑制能力,种皮对种子萌发的机械阻力和透水性、透气性障碍以及内源激素在种子休眠中的作用。解除白皮松种子休眠的方法主要有低温层积处理、长时间流水冲洗、植物激素浸种、化学试剂和机械处理以及环境条件处理等。     

建兰花色形成的成分检测

【目的】花色是建兰重要的观赏性状之一。对建兰花色形成的色素类成分进行检测分析,为探索建兰花色形成的物质结构组成及新花色品种培育提供依据。【方法】以建兰复色花瓣为材料,用色差计测定花色表型并进行色度比色,检测两种颜色花瓣的总蛋白含量和pH; 通过高效液相色谱-质谱联用,检测两色组织的主要色素成分和结构组成。【结果】黄绿色花瓣组织亮度值(L*, 70.1±1.7)是红色系花瓣组织的近2倍; 红色花瓣红度值(a*, 51.2±1.9)为黄绿色组织4倍多,而黄绿色花瓣黄度值(b*, 35.2±1.5)为红色组织近3倍,两种颜色组织色度差异较显著; 红色系花瓣组织可溶性蛋白含量[(3.44±0.11)mg/g]是黄绿色花瓣组织2倍多; 从两种颜色组织材料中共检测出12种黄酮醇苷和8种花青素苷。【结论】异鼠李素糖苷为建兰黄绿色花瓣组织特有,天竺葵素-二糖苷、飞燕草葡萄糖苷、山奈酚鼠李糖苷、矢车菊素芸香糖苷、山奈酚芸香糖苷和山奈酚芸香糖苷半乳糖苷为红色花瓣组织特有。     

观赏海棠新品种‘赞春’

【目的】丰富我国城乡绿化应用的观赏海棠品种资源，选育观赏价值较高的海棠新品种。【方法】从‘红缨’海棠(Malus‘Hongying’)自由授粉种子实生子代苗中选育出观赏海棠新品种‘赞春’(M.‘Zanchun’)。【结果】‘赞春’海棠为优良的红花绿叶型观赏海棠品种，花量大且密集，花色由初期紫红色变为末期淡粉色，包含花苞观赏期整株观花期可达20 d;梨形果，果实初为青绿色，果熟后为黄色。【结论】‘赞春’海棠适应性强，生长迅速，具有较高的观赏价值和应用前景。