尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)基因调控不同地源灵芝孢子粉次生代谢产物的差异

目的 探讨不同地源灵芝孢子粉携带尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-glucose pyrophosphorylase,UGPase)基因在转录水平上的差异表达,以及对灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP)含量的影响.方法 采集不同地源灵芝孢子粉共7批18份,通过水浸煮-醇沉法提取GLP,应用苯酚-硫酸法计算GLP含量.克隆、测序UGPase基因,荧光定量PCR检测UGPase-mRNA.结果 灵芝孢子粉GLP检测结果显示:吉林产含量为(3.3610±0.0046)％,云南产含量为(2.8870±0.0059)％,××堂孢子粉含量为(2.3990±0.0053)％,差异具有统计学意义(P<0.05);克隆UGPase基因测序结果显示:不同地域灵芝孢子粉携带UGPase基因序列相同,与Genbank中UGPase基因序列(Sequence:KM260167.1)核苷酸同源性达100％.UGPase-mRNA检测结果显示:吉林产灵芝孢子粉为表达量最高.结论 不同地源灵芝孢子粉GLP与UGPase-mRNA相对表达量存在差异.UGPase基因在高多糖灵芝菌株中存在明显的表达优势,与GLP的生物合成呈正相关,该机制为深入研究GLP的生物合成提供了理论依据.     

细胞培养物中支原体污染的检测

近年来在针对各类抗原决定族的单克隆抗体(McAb)的研制、LAK细胞和干扰素(IFN)等各种生物制剂的制备、对病毒的研究及病毒性疾病的分离鉴定过程中,细胞培养物常被支原体所污染,给科研。生产和实验带来难以弥补的损失。因为这种污染往往不能用抗生素(如青霉素等)所控制,因此引起有关人员的极大重视。即早发现、预防污染十分重要。     

中药材龟甲基因组DNA提取及PCR鉴定特征

目的探讨中药材龟甲基因组DNA提取方法,建立聚合酶链式反应(PCR)技术鉴别龟甲真伪的分子指纹特征.方法采用改良盐析法提取新鲜龟甲、龟甲易混品种及市售龟甲样品的基因组DNA.从Gen Bank数据库中下载中华金龟、中华草龟及5种常见伪品龟甲细胞色素b的基因序列,应用Premier 5.0引物设计软件设计特异性引物,对龟甲样品进行PCR扩增.结果改良盐析法提取新鲜龟甲样品DNA纯度均在(1.80±0.12)之间,基因组DNA大小为16.6×103bp.所设计的特异性引物只能扩增正品龟甲,扩增片段为78 bp,而伪品龟甲不能扩增出相应片段.结论改良盐析法可以从龟甲样品中提取到较高质量的基因组DNA.PCR技术鉴别中药材龟甲真伪具有特异性高、方法简便快捷、实用性较强的特点,在中药材龟甲真伪鉴别方面具有较高的应用价值.     

肠癌患者肠道菌群中大肠埃希菌携带β-葡萄糖醛酸酶基因的鉴定与特征

目的探讨肠癌患者肠道菌群中大肠埃希菌携带β-葡萄糖醛酸酶(β-Glucuronidase,GUS)基因序列变化特征,为肠癌的防治与诊断提供新的思路.方法采集肠癌患者晨起粪便,常规方法分离大肠埃希菌,提取细菌基因组DNA,设计GUS基因特异性引物,进行PCR扩增及测序分析.结果 10例肠癌患者肠道菌群中大肠埃希菌均携带GUS基因,与Gen Bank(Acession No.S69414.1)uid A基因序列同源性为99%,分别在第1141和1148位A缺失,第1149位A突变成T,第1158位A突变成G.结论肠癌患者大肠埃希菌GUS基因同时出现基因突变和缺失,可成为肠癌诊断的新标记物.     

某型无人机降落伞回收系统动力学分析

针对我国某型无人机降落伞回收系统,建立了无人机降落伞回收过程中各阶段的动力学模型,分析降落伞-无人机组合体在整个回收过程中的运动特性。并将将计算结果与试验结果中无人机俯仰角的变化进行比较,以验证数值仿真的可靠性。研究结果表明:(1)减速伞开伞动载第一峰值约为1G,第二峰值约为1.3G。主伞开伞动载第一个峰值约为2G;第二个峰值约为2.3G。减速伞和主伞的两个动载峰值相差均不大,说明降落伞设计比较成功;(2)在回收开始后第4秒至第5秒之间,无人机出现了较为强烈的抬头。为了使无人机姿态进一步稳定在期望值,需要在控制律设计中着重解决无人机在回收各个阶段受伞系统影响而产生抬头的问题;(3)当回收高度在2000-10000m之间时,从回收系统在有控和无控状态下的工作包线可知,有控状态时回收系统的正常工作范围比无控状态要广。     

肠出血性大肠埃希菌O157:H7紧密黏附素C300与LTB融合蛋白B细胞表位预测

目的 对肠出血性大肠埃希菌O157:H7紧密黏附素C300与黏膜佐剂不耐热肠毒素(LTB)融合蛋白二级结构及B细胞识别表位进行预测,为开发新型疫苗提供理论依据.方法 采用DNA star软件中的Protean预测软件对Intimin C300与LTB融合蛋白的亲水性指数、β-转角、柔韧性、表面可及性和抗原指数进行预测....     

铜绿假单胞茵主动外排系统与耐药性关系的研究

铜绿假单胞菌是一种重要的院内感染条件致病菌,常感染癌症患者、烧伤患者等机体免疫力低下的患者,它对多种不同理化性质的药物高度耐药,其主动外排系统在耐药性中起主要作用.主要研究了铜绿假单胞菌主动外排泵的类型、组成及对抗生素耐药性的影响.     

兔膝关节前交叉韧带不同功能束损伤模型的建立与评价

目的建立兔膝关节前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)不同功能束损伤模型,分析ACL不同功能束损伤对半月板产生的影响.方法将46只新西兰大白兔随机分为前内侧束损伤组、后外侧束损伤组和健康对照组,造模后第2,4,8周每组随机处死6只.观察半月板大体形态,进行HE染色.结果模型组半月板大体形态相似;HE染色见半月板表面不光滑,组织疏松,胶原纤维粗细不一.结论前交叉韧带不同功能束损伤可使膝关节半月板产生退变.