人类精液的程控冷冻法与悬吊冷冻法比较研究

降温冷冻是实施精液冷冻保存的必需工艺。目前主要有两种方法：利用程序控制的生物冷冻仪自动调节冷冻速度;用人工操作逐步降低悬吊在液氮蒸气中的精液样品与液氮面的高度来实现降温冷冻。前者在国外使用很普遍,国内也有一些医院开始采用这种方法冷冻精液,后者则是传统的精液冷冻方法。这两种方法有何差别,国内尚无祥细报道。本研究对这两种冷冻方法的冷冻效果进行实验比较。程序控制生物冷冻仪为英国Planer公司的Model10型。冷冻程序采用Watson的6步降温速率：Rt、＋2℃,－1℃／then;＋2℃、＋2℃,0℃／ndn,维持5then;＋2℃、－…     

卵黄缓冲液4℃保存3种低品质精液后的穿卵率变化

临床上采用手术、药物或激素调节疗法，对相当一部分不育患者的精液质量改善不明显。国外人类生殖临床目前趋向于借助体外的方法，对低品质精液作优化精子功能处理，但国内有关报告尚少，对不同低品质精液类型的处理效果未见详细评价。本研究探讨3种低品质精液经卵黄缓冲液冷保存后，精子受精能力的变化。参照世界卫生组织精液分析手册的精子参数标准，实验标本分为3组：低精子活动率组（n＝13），低精子密度组（n＝7）和低正常精子形态组（n＝9）。标本与卵黄缓冲液以等体积比混匀，置冰箱4℃；冷水浴24－48h。用去透明带地鼠卵穿透试验检…     

不孕妇女血清中卵透明带抗体的检测

利用与人卵透明带有交叉免疫反应的猪ZP3抗原，建立起不孕妇女血清卵透明带抗体检测的ELISA技术，并对120例不孕妇女血清进行了检测，发现15例透明带抗体阳性血清。该法灵敏、特异，稳定性和重复性好，易于在临床推广应用。     

人类睾丸精子和附睾精子的顶体蛋白酶活性

精子形成过程最明显的条件之一是顶体的发育，顶体蛋白酶则是顶体内发育的重要酶类。人类射出精子的顶体蛋白酶活性已有研究，但在人睾丸和附睾水平，顶体蛋白酶的活性状态国内外尚无报道。本文探讨顶体蛋白酶在人睾丸和附睾部位的活性和变化。先天性双侧输精管缺如者取睾丸精子和附睾精子；精索静脉曲张结扎者取睾丸精子和射出精子。睾丸精子从常规睾丸活检组织中分离；附睾精子在阴囊探查术或人工贮精囊术时获取。射出精子为手淫法取精。应用明胶薄层试验、去透明带地鼠卵穿透试验和透射电镜观察顶体蛋白酶活性及其影响。实验结果表明，睾…     

冷冻保存对人类精子膜完整性的影响

既往报道精子膜经历冷冻保存后的改变，但检测多局限在精子的一个部位，未能同时揭示单个精子头膜与尾膜冷冻损伤的状态，有些需荧光显微镜或透射电镜的方法，也难在基层实验室普遍应用。世界卫生组织（WHO）推荐Jeyendran的低渗肿胀试验（HOS）和Eliasson的伊红拒染（EY）法应用于对人类精子的评价。HOS检测精子尾膜完整性，EY反映精子头膜完整性。故此，结合这两种方法形成单一试验可以避免HOS或EY只显示精子一个部位膜状态的局限性。本研究建立HOS－EY结合试验探讨冷冻保存对人类精子头部和尾部膜完整性的影响。HOS－EY试验…     

水溶性聚[N—（2—羟乙基）—L—谷酰胺]的合成

目的：合成具有良好水溶性,生物相容性,低毒和可生物降解的高分子材料,以期作为键合药物的载体。方法：以L－谷氨酸为单位体,经r-羟基的苄基保护,与光气／甲苯液反应制备L－谷氨酰苄酯的羧酸酐,均聚得L－谷氨酸苄酯（PBLG）,然后经由2－氨基乙醇胺解得聚[N-(2羟乙基）－L－谷酰胺]（PHEG）。结果：对所合成物进行了UV,IR,HNMR,相对分子质量,羟基含量的表征,证实此物为PHEG。结论：合成的聚[N-(2-差乙基）－L－谷酰胺]的侧链上具有大量的羟基,具有优良的水溶性和反应活性,可作为良好的键合药物的载体。     

上皮型钙粘附蛋白在人子宫内膜和早期胚胎的表达和变化

目的 :探讨上皮型钙粘附蛋白 (E -cadherin)在人子宫内膜和早期胚胎的表达和变化。方法 :采用免疫组织化学、间接免疫荧光和激光共聚焦显微镜等方法 ,检测人子宫内膜和人早期胚胎E -cadherin的表达。结果 :月经周期各阶段子宫内膜腺上皮均见E -cadherin表达 ,分泌中期达高峰 (P <0 .0 5 ) ,间质细胞未见表达。卵母细胞和早期胚胎表面均见E -cad herin表达 ,囊胚组的表达显著高于 2 - 7细胞期胚胎组 (P <0 .0 5 )。结论 :E -cadherin在子宫内膜及胚胎的表达增多变化有同步性 ,可能有利于着床。     

国产第一代人类绒毛膜促性腺激素(hCG)避孕疫苗第一期临床前预初试验的实施探讨

免疫避孕是利用机体自身的免疫防御机制来阻抑非计划妊娠，它是目前国内外科学家重视研究，尚处在发展阶段的一类新的生育调节方法。我国在80年代初期已开始避孕疫苗抗原制备的探索性试验。1986年，国家对hCG避孕疫苗立项科技攻关。经过全国多中心协作研究，“八五”期间制备我国第1代hCG避孕疫苗。本文就我国第1代hCG避孕疫苗第1期临床前预初试验的理论根据、设计原则和具体实施方案进行探讨。1研究背景近20年来，很多卓有远见的国际组织和国家的科研领导部门，有目的、有计划地组织领导了免疫避孕和避孕疫苗的开发研制工作。应用近代发…     

维生素D受体蛋白及其mRNA在人输卵管黏膜上皮的表达

目的:探讨人输卵管黏膜上皮维生素D受体(VDR)蛋白及其mRNA的表达.方法:30例输卵管标本取自具有正常妊娠生育史,因子宫肌瘤、子宫腺肌病等行腹式子宫切除术,一并切除输卵管的妇女.输卵管取材包括峡部、壶腹部和伞部,按子宫内膜组织学分期分为增生早期组6例、增生中晚期组9例、分泌早期组7例、分泌中晚期组8例.应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应法检测人输卵管黏膜上皮VDR的表达.结果:人输卵管黏膜上皮中检测到VDR蛋白及其mRNA表达.VDR蛋白主要表达于输卵管上皮细胞的细胞核中,部分间质平滑肌细胞核内亦有表达.相同时期各不同部位输卵管上皮细胞VDR蛋白表达无明显差别(P＞0.05),随月经周期变化,各不同部位输卵管上皮细胞VDB蛋白表达发生改变,在增生早期和分泌中晚期较低,与之比较,在增生中晚期和分泌早期其表达明显增高(P＜0.01),至分泌早期达最高值;壶腹部输卵管黏膜上皮组织VDR mRNA表达在增生早期和分泌中晚期较低,在增生中晚期和分泌早期明显增高(P＜0.01).结论:人输卵管黏膜上皮组织存在VDR蛋白及其mRNA表达,在增生中晚期和分泌早期其表达明显增高,且具有周期性变化.     

冷冻保存对人类精子顶体蛋白酶的影响

探讨了冷冻保存对人类精子顶体蛋白酶的影响,应用明胶薄层法检测,冷冻保存后精子顶体蛋白酶反应率和成环直径显著减少（ｎ＝３０,Ｐ＜０．０１）．透射电镜观察到冷冻保存后精子（ｎ＝３）头部结构完整性显著降低,提示浆膜、顶体膜超微结构的冷冻损伤与冷冻精子顶体蛋白酶活性丢失和降低有关．冷冻精子穿卵率与顶体蛋白酶反应率不呈相关性（ｎ＝２１,ｒ＝０．３４,Ｐ＞０．０５）,提示两项检测反映的是精子功能的不同方面．