离心洗脱法在Rb蛋白与细胞分化关系研究中的应用

离心洗脱技术可分离到ＨＬ６０细胞周期中同步的Ｇ０／Ｇ１期细胞，被视黄酸诱导的Ｇ０／Ｇ１细胞可以进行一个正常的细胞周期，Ｒｂ蛋白磷酸化平随细胞周期而变化，但不能进入第二个细胞周期，细胞开始分化，Ｒｂ蛋白磷化水平的降低，是由于ＲＡ首先诱导细胞分化，使细胞生长停止，分化的细胞失去磷酸化蛋白能力的结果。     

Rb基因表达与非小细胞肺癌关系的研究

采用mRNA原位杂交和免疫组织化学方法对31例非小细胞肺癌及相应的正常组织进行Rb基因表达的研究。结果显示Rb基因转录的阴性率为16．1％（5／31）,蛋白表达异常率为19．4％（6／31）。表明,非小细胞肺癌的发生与Rb基因的表达有关。     

猪IFNα在毕赤酵母中分泌表达条件的优化及高密度发酵

从发酵时间、接种量、pH值、诱导剂量等方面对重组基因工程（毕赤酵母甲醇利用缓慢型）的摇瓶发酵条件进行了优化,进一步探索了酵母菌表达猪IFNα的发酵工艺,包括种细胞密度对初始发酵期的影响,补加甘油、甲醇速率条件的控制等．结果表明,摇瓶发酵时,诱导最佳时间为96h,甲醇最适浓度为8g/L,发酵pH范围为6.4～9．0．最适接种量2：1．在分批发酵、接种量为10%且种子细胞光密度（OD600）为5～6时,最有利于细胞的高密度培养,在补料发酵时,根据溶氧控制甘油流加速率与时机,细胞干重达到118．75g／L,在48h重组猪IFNα表达量达到1。304g／L．     

鼠转移抑制基因（nm23－1）在大肠杆菌中的高效表达及活力鉴定

肿瘤转移是引起恶性肿瘤患者死亡的主要因素［１］。对肿瘤抑制基因的研究在临床上具有重要意义。ｎｍ２３基因是目前研究得较多和认为最有前途的肿瘤抑制基因，它已从小鼠黑色素瘤细胞系Ｋ－１７３５中克隆得到。有证据表明，来源于人的ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２基因的氨基酸序列分别与人红细胞ＮＤＰＫ的两个亚基Ａ、Ｂ等同，且与果绳ａｗｄ基因高度同源。本实验利用ｐＥＴ表达系统在大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中高效表达了重组ｎｍ２３－１（鼠源），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ扫描结果显示，表达量高达４３．２％。并对其表达产物进行了分离纯化和活力测定，证实ｎｍ２３－１蛋白确实具有ＮＤＰＫ的功能，从而为进一步探讨ｎｍ２３基因家族在抑制癌细胞转移方面的功能打下了良好的基础。     

LA-PCR法制备赤麂Y2涂染探针与原位杂交

应用显微切割技术获得赤麂的Y2单条染色体,经LA-PCR（linker-adaptor PCR）扩增后用DIG标记制备探针,然后用Southern blot杂交法对所制备的探针进行验证并对毛冠鹿的中期核型进行原位杂交.结果表明：用该法制备的涂染探针是成功的,原位杂交也获得了阳性结果,可以初步验证毛冠鹿中的Y染色体.     

重组猪α-干扰素的纯化及生化性质鉴定

对巴斯德毕赤酵母高效分泌表达的猪α-干扰素(PoIFN-α)纯化工艺和纯化后重组蛋白的部分生化特性进行了研究,结果表明:猪α-干扰素(PoIFN-α)发酵液经离心、透析、过滤处理之后,依次利用亲和层析和离子交换层析使目的蛋白得到了纯化.经N端氨基酸测序,Westem-blot,对酸、热、巯基乙醇的稳定性和糖基化程度等检测后发现,所表达的猪α-干扰素N端氨基酸序列(前5个)正确,对酸和热基本稳定,二硫键对目的蛋白的活性至关重要,没有发现目的蛋白的糖基化.     

酶解猪血蛋白的化学分析及营养试验

目前,对猪血的综合利用是一个重要课题,江苏每年集中宰杀的生猪约九百万头,得到血粉近三千吨,並利用猪血进行各种生化药物的制备。我们利用胰酶水解猪血制成的水解蛋白进行有效成份的初步分析,並以该产品对动物(小白鼠)的生长作了饲养试验,初步进行了作为食品添加剂及营养价值的探讨。     

毛冠鹿胚胎有限细胞系的建立及生物学特性研究

建立了毛冠鹿胚胎肺、肾有限细胞系,并对细胞形态、生长速度及核型等生物学特性进行了观察,发现了毛冠鹿新核型,根据C－带分析结果,提出了毛冠鹿中存在B染色体,而核型多态的实质是B染色体的多态。     

人p16~(INK4) cDNA探针在非小细胞肺癌研究中的应用

制备总RNA ,RT PCR克隆p16 INK4 cDNA ,测序验证 ,制备探针 .进行PCR产物Southern杂交检测非小细胞肺癌组织标本中p16 INK4 基因第二外显子阴性杂交率为 12 .9% (4 / 31) .原位杂交显示p16 INK4 基因转录阴性率为2 2 .6 % (7/ 31) .结果说明克隆的p16 INK4 cDNA是正确的 ,可用于临床基因诊断 ,p16 INK4 基因变异及表达在非小细胞肺癌的发生、发展中起作用     

人p16^INK4cDNA探针在非小细胞肺癌研究中的应用

制备总RNA,RT－PCR克隆p16^INk4cDNA,测序验证,制备探针,进行PCR产物Southern杂交检测非小细胞肺癌组织标本中p1^^INK4基因第二外显子阴性杂交率为12．9％（4／31）,原位杂交显示p16^INK4基因转录阴性率为22．6％（7／31）,结果说明克隆的p^INK4cDNA是正确的。可用于临床基因诊断,p^16INK4基因变异及表达在非小细胞肺癌的、发展中起作用。