中国多年生野生大豆Glycine亚属rbcS基因的结构和系统发生的研究

用PCR法从我国多年生野生大豆Glycine亚属的烟豆 (GlycinetabacinaBenth .)和多毛豆 (短绒野大豆GlycinetomentellaHayata)的总DNA中扩增到Rubisco小亚基基因 (rbcS) ,2个基因的顺序分析结果表明它们包含了 5 37bp长的编码区 ,其编码的 178肽的Rubisco小亚基前体由 5 5个氨基酸组成的前导肽和 12 3个氨基酸组成的成熟肽组成 .基因内有 2个内含子 .比较Glycine亚属内烟豆和多毛豆之间的rbcS间碱基同源性为94 5 % ,差别主要存在于内含子中 ;Soja亚属的G .soja和G .max之间该基因同源性高达 99 7% ,而Glycine亚属和Soja两亚属之间rbcS同源性则为 84 8% .从这 2个亚属内 4个种的rbcS成熟肽 12 3个氨基酸顺序可知 ,同一亚属内 2个种之间仅有 2～ 3个氨基酸不同 ,而Glycine亚属和Soja亚属之间差异增大至 5～ 6个氨基酸 .系统进化树分析也表明Glycine亚属与Soja亚属在进化过程中分离较早 ,这从分子水平上为大豆属的分类研究提供了科学的依据 .     

水稻蛋白质激酶CK2催化亚基的表达和活性测定

用RT-PCR的方法分离到了水稻蛋白质激酶CK2催化亚基（OsCK2α）的cDNA,通过大肠杆菌高效表达系统表达了OsCK2α,并利用亲合层析的方法纯化了重组蛋白质GST—OsCK2α．得到的大肠杆菌重组蛋白质GST—OsCK2α能够体外磷酸化CK2的常用底物酪蛋白,并且该磷酸化反应能够被CK2的特异性抑制剂肝素所抑制,研究表明重组CK2α具有典型的蛋白质激酶CK2的活性,为研究水稻CK2及其底物的功能奠定了基础．     

与小麦高分子量谷蛋白基因探针杂交的阳性克隆分离及基因在重组子上的定位

将经San 3A部分酶切后的小麦总DNA片段克隆到λCharon40载体上构建了小麦基因文库.以两个人工合成的同源于小麦高分子量(HMW)谷蛋白基因的片段对此基因库进行筛选,获得了两个阳性克隆,推测其中一个包含了HMW谷蛋白全部的基因顺序.两个克隆的部分限制性内切酶位点已被确定.在Southern杂交中,用位于基因编码区内的寡核苷酸片段作探针,将阳性部分定位在一定的酶切片段上.     

烟草拟核小体组装蛋白cDNA的克隆、表达及其蛋白产物的纯化

从烟草BY2细胞cDNA文库中筛选到核小体组装蛋白1(Nucleosome assembly protein1,NAP1)的cDNA，序列分析发现该NAPI的cDNA编码374个氨基酸，与巳知植物来源的NAP1同源蛋白相比具有80%，以上的同源性，而且一些具有重要功能的结构域是相当保守的，如核定位信号，核输出信号，酸性结构域及异戊烯化修饰位点，重要功能结构域的存在预示了NAP1蛋白潜在多种功能，为了深入研究MAP1的功能，应用大肠杆菌表达体系高效表达了烟草NAP1蛋白，并以表达产物进行了分离纯化。     

水稻中一个与花发育相关的MADS-box基因的表达检测

根据MADS－box基因的保守区结构，设计简并性引物，利用RT－PCR从水稻（Oryza sativa L.)中克隆到一个新的水稻MADS－box基因cDNA睛段，将它命名为FDRMADS5．该基因核苷酸序列851bp,编码160个氨基酸，有典型的植物MADS－box基因的结构，FDRMADS5的Southern分析，表明它为单拷贝基因，用Northern检测了FDRMADS5的表达情况，发现该基因除了在花中有表达外，在水稻的根尖和幼苗端中也有微量的表达，这一结果表明，水稻的MADS－box基因功能可能并不局限于控制花的发育。     

一种少量λ噬菌体重组DNA的快速抽提方法

用DEAE-纤维素(二乙氨乙基纤维素)和聚乙二醇(PEG 6000)纯化的体外重组λ噬菌体,经SDS(十二烷基磺酸钠)裂解和酚/氯仿抽提等处理,得到了重组DNA。该DNA纯度高,适用于限制性内切酶分析。     

栽培和野生大豆核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶的结晶及其大小亚基等电聚焦分析

栽培大豆和野生大豆叶片的蛋白抽提液经硫酸铵盐析、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０柱层析以及浓缩透析等步骤,分别得到核酮糖－１,５－二磷酸羟化酶（简称Ｒｕｂｉｓｃｏ）的结晶．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ酶标抗体技术鉴定证实为Ｒｕｂｉｓｃｏ．用ＩＥＦ－ＰＡＧＥ方法分析这２种不同进化类型大豆的Ｒｕｂｉｓｃｏ 大小亚基,发现其具有高度同源性     

水稻花发育相关MADS-box基因的克隆

以水稻幼穗总ＲＮＡ为模板,利用３′－ＲＡＣＥ克隆了８个接近于全长的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因的ｃＤＮＡ．在ＧｅｎＢａｎｋ 的数据库中查询表明,其中２个ＦＤＲＭＡＤＳ１,ＦＤＲＭＡＤＳ２分别与已报道的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因Ｏｓ－ＭＡＤＳ５和ＯｓＭＡＤＳ４５有极高的同源性,另外６个为新的尚未见报道的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ 基因．系统进化树分析表明ＦＤＲＭＡＤＳ１,ＦＤＲＭＡＤＳ２和ＦＤＲＭＡＤＳ４可能与Ｃ组基因的功能相关;ＦＤＲＭＡＤＳ３,ＦＤＲＭＡＤＳ６和ＦＤＲ－ＭＡＤＳ７可能与Ａ 组基因的功能相关     

水稻基因组中U2snRNA基因的结构分析

对水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ）Ｕ２ｓｎＲＮＡ基因的结构分析结果表明单子植物水稻的Ｕ２ｓｎＲＮＡ基因以多基因家族的形式存在,且Ｕ２ｓｎＲＮＡ基因中存在连锁现象。３个新的水稻Ｕ２ｓｎＲＮＡ基因和已报道的ＦＤＲＧＵ２－３一样,编码区上游除含有植物ＵｓｎＲＮＡ基因共有的ＵＳＥ和ＴＡＴＡ元件外,还含有单子叶植物ＵｓｎＲＮＡ所特有的ＭＳＰ元件,且具有保守的四茎环二级结构,基因成员间的同源性最低为８５．１＾     

麻疹病毒RNA与寄主细胞质蛋白因子的相互作用

麻疹病毒(MV)属付粘病毒科,是单链的负链RNA病毒.基因组大小为16kb,其结构与同科的仙台病毒和弹状病毒科的水疱性口膜炎病毒(VSV)十分相似,然而基因转录与复制的机制可能不同.仙台病毒与VSV有效的体外转录系统早已建立,相似的系统在MV中却难以建立,而且与这两种病毒不同,在MV感染的细胞内至今未发现游离的前导链.研究表明,MV的体外转录仅在寄主细胞质蛋白提取物存在下才能进行,这意味着MV RNA的转