二苯并噻吩单加氧酶基因(dszC)的克隆及其在大肠杆菌中的表达

利用PCR法从红球菌DS-3中克隆了dszC基因,序列测定结果与报道的Rhod ococcus ery throp olisIGTS8中d szC基因有99%的同源性.构建了含dszC基因的表达载体paC 5并在E.coli中实现高效表达,重组蛋白(D szC)在降温条件下重组菌表达量可达20%.可溶性D szC经N i2 亲和层析纯化达到电泳纯(95%以上).用纯化的D szC制备一抗血清进行免疫印记检测,证明工程菌表达产物中存在目的蛋白.纯化的D szC酶活可达0.36 U.D szC能作用于DBT及其甲基取代物,但不能利用无硫的DBT类似物及无机硫源.     

利用紫外线诱变原生质体筛选四环素高产菌株的研究

以金色链霉菌为出发菌株，经溶菌酶作用制备原生质体，然后以紫外线对原生质体进行诱变处理，在再生培养基上再生培养，获得再生突变株，将其中的单菌落以琼脂挖块法进行初筛获得第２０号菌株，其相对效价为１．２８４。