杆状病毒诱导凋亡昆虫细胞中的线粒体反应和Ca2+的变化

以罗丹明123作为线粒体跨膜电位荧光标记探针, 流式细胞术和激光共聚焦显微镜研究显示, SfaMNPV诱导凋亡的斜纹夜蛾SL-1细胞, 线粒体跨膜电位(∆Ψm)产生明显改变, 病毒接种后4 h, 膜电位开始下降, 随着病毒感染进程的延续, 线粒体膜电位∆Ψm持续降低. 利用Western 杂交分析定位于线粒体的Bcl-2蛋白, 结果表明, 线粒体Bcl-2蛋白含量随病毒感染逐渐减小, 表达水平降低, 病毒感染下调了Bcl-2蛋白的表达. Western杂交检测到显示细胞色素c从线粒体向细胞质中释放, 并在细胞质逐渐积累, 呈时间依赖性特征. 病毒感染诱发的线粒体反应, 提示杆状病毒诱导昆虫细胞凋亡, 可能存在线粒体介导的凋亡信号转导途径. 以Ca²⁺荧光探针Fluo-3/AM负载, 激光共聚焦显微镜观察和荧光分光光度计测定凋亡细胞 [Ca²⁺]_i浓度的变化, 检测到病毒诱导凋亡细胞内的[Ca²⁺]_i浓度明显升高, 细胞外Ca²⁺内流; 在EGTA抑制胞外钙离子内流和细胞质Ca²⁺钳制状态下, PI染色后流式细胞仪检测显示细胞凋亡不受影响, 说明胞质内游离Ca²⁺升高和胞外钙离子内流不是细胞凋亡的主要诱因, 提示内质网钙库Ca²⁺排空可能是SfaMNPV诱导SL-1细胞凋亡信号转导通路中的重要媒介.     

Web Quest在计算机技能教学中的应用研究

在校园网络迅速发展的今天，基于探究性学习理论的网络主题探究学习模式Web Quest得到了越来越多的教育者关注。把Web Quest引进计算机技能课教学中，探索出了一条适合计算机教学的Web Quest模式。     

夏蜡梅SSR引物适用性分析及其在遗传多样性研究中的应用

【目的】筛选适合夏蜡梅(Sinocalycanthus chinensis)遗传多样性分析的SSR(simple sequence repeats)引物并进行遗传多样性分析。【方法】从夏蜡梅转录组数据库组装的125 014条unigene序列中,随机选取了344对SSR引物,以夏蜡梅6个不同种群的DNA为模板,运用聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行引物筛选,根据扩增产物带型的丰富度,筛选出具有多态性的SSR引物;挑选扩增带型数在4以上的SSR引物,进一步验证这些引物在夏蜡梅种群间和种群内的适用性;利用已验证的引物对6个夏蜡梅种群的遗传多样性和遗传结构进行分析。【结果】共有148对引物能够扩增出清晰条带,占选取引物总数的43.02%,其中29对引物具有多态性,占扩增总数的19.60%;有15对引物扩增带型数在4以上,这些引物具有更高的多态性。对这15对高多态性引物进一步分析发现,根据扩增的带型数和遗传参数,这些引物均可用于种群间遗传多样性分析;同时,这15对引物可进一步分为3类,所揭示的遗传多样性程度依次降低。在种群内遗传多样性分析时,根据带型数及其分布和遗传参数,第1类、第2类及第3类中的P004和P061在各个种群内扩增的带型数较多且分布较为均匀,具有更高的多态性;而P021、P075、P095、P098、P018等5对引物在部分种群内扩增的带型数相对较少且分布较为集中,多态性相对较低。利用15对引物分析6个种群的遗传多样性得知,夏蜡梅的总基因多样性指数(Ht)为0.625 0,各种群的基因多样性指数为0.251 8~0.400 2,Shannon’s指数(I)为0.419 7~0.668 1,平均基因多样性指数(Hs)为0.3230。【结论】此次实验结果说明夏蜡梅物种水平具有较高的遗传多样性,但各种群内遗传多样性较低。聚类分析将6个种群分为3个分支,且各分支之间遗传距离较远,种群间遗传分化系数(Gst)为0.437,种群内近交系数(Fis)为0.430,种群间基因流(Nm)为0.309 4,基于AMOVA分子方差分析,56%的变异来自种群间,44%的变异来自种群内,这说明夏蜡梅种群间遗传分化显著,种群内存在显著的近交现象,各种群间基因交流受阻。     

结合研发转化过程的智能汽车企业运营效率评价

将智能汽车企业运营分为研发转化和生产经营两个阶段进行效率评价.选取上海、深圳证券交易所上市的24家智能汽车概念板块公司,采用二阶段数据包络分析模型,从多年度和多企业类型角度分别对2010~2015年智能汽车企业运营效率进行分析.基于多年度视角分析表明,2013年企业研发转化效率略有下降,在2014与2015年其呈现上升趋势,生产经营效率较为稳定.研究发现,企业整体运营综合效率与研发转化效率存在显著相关性.基于企业类型视角分析表明,企业研发效率较低,说明多数企业与标杆企业相比存在差距,尤其是在智能决策和网络信息领域;而生产经营效率均较高.通过投影分析发现,企业研发投入结构不合理、研发人员能力参差不齐是主要原因.     

新型抗剪连接件在SRC组合板中的受力性能分析

针对型钢混凝土(SRC)地下综合管廊的上部组合板结构,提出了一种新型PBL抗剪连接件。采用有限元软件Abaqus对传统PBL抗剪连接件和3组不同螺柱数量的新型PBL抗剪连接件的型钢混凝土组合板进行加载数值模拟,将得到的挠度、荷载—滑移量进行对比分析。结果表明:设置不同螺柱数量的新型PBL抗剪连接件的型钢混凝土组合板相比较传统PBL抗剪连接件的组合板,结构极限承载力提高了10%~12%,抗剪承载力提高了12%~14%。分析发现螺柱数量的增加对组合板的极限承载力和抗剪承载力的提高影响较小,并确定组合板中新型PBL抗剪连接件螺柱数量为5个。     

台球运动中计算主球进攻方向的精确模型及实用方法

在台球比赛中,如何提高目标球的落袋概率是一个最基本的问题.事实上,该问题等价于计算主球的最佳进攻路线问题,为此,给出了三点一线碰撞模型.由该模型衍生出的虚拟球训练法简单易行,同时适用于短距离和长距离进攻,能够快速提升初级台球选手的击球水平.     

齿轮磨损状态的周期平稳信号分析

对齿轮常见的失效形式——磨损进行分析,并根据实际信号,将时域分析、FFT与周期平稳信号分析相比较.仿真结果表明,周期循环平稳分析方法在提取故障特征方面具有更大的优势.     

三参数冰相云微物理方案的构建及在单柱大气模式中的应用

云微物理的参数化对天气及气候的准确模拟至关重要,其中云粒子谱分布特征通过改变云演化发展和云辐射效应,必然进一步影响气候模拟.目前广泛使用的双参数云微物理方案,无法预报云粒子谱分布的谱形参数,阻碍了气候模式对云物理过程的准确描述.鉴于此,本文在单柱大气模式SCAM5.3(Single Column Atmosphere Model,Version 5.3)中增加雷达反射率因子的预报方程,构建了三参数冰相云微物理方案,实现了冰晶粒子谱分布谱形参数的预报.利用该模式,模拟了大气辐射观测计划在1997年夏季实施的为期29 d的观测个例(ARM97),分析了双、三参数方案对云量和辐射的模拟差异.结果表明:首先,三参数方案预报的冰晶粒子谱的谱形参数主要集中在0～4,峰值在2左右,至少有85%的μ都大于默认的0.其次,与双参数方案相比,三参数方案对云量的模拟更接近观测;利用辐射通量密度的观测值进行评估,发现无论是短波还是长波辐射通量密度,三参数方案的误差都比双参数方案小.最后,揭示了三参数方案对云量和辐射模拟效果的改进机理:主要是因为三参数方案减弱了冰晶到雪的自动转化过程,增强了冰晶凝华增长过程,从...     

Tussah Silk Fibroin Porous Scaffolds Prepared with a Mild Self-assembly Process for Controlled Drug Release

Besides excellent biodegradability and biocompatibility,a useful tissue engineering scaffold should provide favorable surface properties,outstanding mechanical strength and controlled drug release property. In this paper,a mild process to prepare porous tussah silk fibroin（ TSF） scaffolds from aqueous solution was described. The n-butanol was used to control the self-assembly of tussah silk. The scaffolds with different TSF concentrations and the same volume showed differences in pore size and distribution. The maximum porosity of the poprepared porous scaffolds was 80% in this paper. And the pore size of the prepared porous scaffolds with different concentrations was between 10μm and 230 μm. X-ray diffraction（ XRD） analysis revealed that amorphous TSF was crystallized to β-sheet secondary structure upon gelatin. The TSF scaffolds for controlled drug release was studied and the result showed that the time of drug release was significantly longer. The produced TSF scaffolds with sustained drug release have potential application in tissue engineering.     

基于状态解耦的两坐标外源雷达3D目标跟踪

考虑利用两部两坐标外源雷达对高度近似恒定的目标进行三维跟踪。结合外源雷达自身的特点，提出了一种将目标高度与水平状态(水平位置、速度等)进行解耦估计的方法，通过两个并行估计器来实现对三维目标的跟踪。在高度估计器中，将目标高度区间划分为多个高度子区间，然后利用量测值递推计算目标在各个高度子区间的权重，最后通过加权融合各个高度子区间的方式估计目标高度；在水平面的状态估计器中，进一步考虑了目标在水平面机动的场景，利用交互式多模型扩展卡尔曼滤波器，并结合目标高度的估计值，更新目标的水平状态。仿真与实验结果显示，利用两部两坐标外源雷达可以实现对高度近似恒定目标的精确三维跟踪，为水平机动的目标提供精度在200 m以内的高度估计，并消除了二维跟踪情况下因未考虑目标高度而引起的误差。