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用脂多糖诱导正常人单核细胞使产生粒细胞集落刺激因子。从诱导细胞中提取出总RNA,以特上物经逆转录PCR扩增出粒细胞集落刺激因子mRNA和cDNA,将其插入经改造的分泌型表达载体pIN-omp A,并转化受体菌E.coli。克隆的cDNA通过限制性酶双酶切的3'端、5'端及中间序列探针分子杂交鉴定,结果与预期一致。表达质粒在大肠杆菌哟IPRTG诱导,粒细胞集落刺激因子被分泌到细菌的周质中。产物提取后 相似文献
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