RAW264.7细胞诱导分化和鉴定

为探讨RAW264.7诱导后分化的破骨细胞的鉴定方法,选出了最优方案,为破骨细胞的体外功能研究奠定了基础。通过将RAW264.7细胞以5×104接种在96孔板,分别与骨磨片共培养和单独培养,并取小鼠重组sRANKL因子以100ng/mL的浓度诱导10d后分别进行形态学和功能学鉴定和检测,HE、甲苯胺蓝、TRAP染色和扫描电镜观察。结果显示,随着诱导时间的延长,多核细胞数量增多,骨吸收陷窝数量增多;各种方法均可鉴定,HE染色、甲苯胺蓝染色鉴定方法简单但结果不可靠;扫描电镜鉴定准确但操作繁琐;TRAP染色价格较昂贵但结果特异性强、结果准确。研究表明,从形态学角度鉴定TRAP染色为最优,从功能学角度鉴定扫描电镜为最优。