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从前列腺癌细胞系LNCaP中提取总RNA,经RT-PCR扩增前列腺特异性膜抗原(PSM)靶序列,将其定向插入带T7RNA聚合酶启动子的pSPORT1质粒,转入大肠杆菌DH5α,经蓝白斑筛选获得重组质粒,以此重组质粒线性化DNA为模板,以地高辛标记的rUTP及其他三种rNTP为底物,经T7RNA聚合酶体外转录,成功地制备了地高辛标记的PSM特异性RNA探针,为研究以PSM为分子生物学指标的前列腺癌分期诊断奠定了基础。 相似文献
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