MTHFR基因C677T点突变的PCR-TGGE检测技术的建立

目的 :建立检测MTHFRC6 77T点突变的PCR -TGGE技术 .方法 :以中国人群外周血基因组DNA为模板 ,用聚合酶链反应扩增该基因外显子 4 ,用温度梯度凝胶电泳 (TGGE)分析检测PCR产物 ,对电泳结果异常者进行DNA测序 .结果 :垂直型TGGE与平行型TGGE均发现该外显子存在杂合性突变 ,经DNA测序证实为C6 77T点突变 .结论 :该技术具有快速、分辨能力高和重复性好的特点 ,是一种有效的检测核酸序列变异和点突变的技术 .     

项目利益相关者管理的必要性

本文对项目实施过程中的项目利益相关者管理进行了研究，提出了目前我国企业项目经理在项目管理过程中应充分重视项目利益相关者管理的观点。并对项目利益相关者分析及其需求进行管理的必要性进行了研究。     

桥序列在构建人工核酶M1GS中的作用

目的：为检验连接的Gs序列是否会影响M1RNA高级结构而导致M1RNA活性改变,对核酶的催化机制进行探讨。方法：通过软件模拟对M1GS进行结构分析,筛选了一段独立折叠的桥序列连接M1RNA与GS,并通过体外切割实验检验有桥和无桥序列的核酶的活性。结果：有桥序列的M1GS具备体外特异切割底物的核酶活性,而无桥序列的M1GS核酶未表现体外切割活性。结论：证实桥序列对维持M1RNA高级结构和保持人工核酶M1GS的体外切割活性具有重要作用。     

锌指核酸酶介导的高效多位点基因打靶

该研究旨在建立锌指核酸酶介导的多位点基因打靶技术,为获得稳定遗传的转基因动物或基因治疗临床应用解决技术难题.首先利用OPEN平台设计、构建能识别人基因组内rDNA基因间隔序列的锌指蛋白基因序列,与FokⅠ的切割结构域连接、表达后获得锌指核酸酶基因,再构建锌指核酸酶真核表达载体.另外,构建含有2条同源重组引导序列和绿色荧光蛋白基因(EGFP)的多位点基因打靶载体.将锌指核酸酶真核表达载体和多位点基因打靶载体共转染HEK293细胞,内参对照PCR-灰度分析法检测外源基因定点整合效率,结果显示单独转染多位点基因打靶载体的定点整合效率为6.8%;而由于锌指核酸酶在染色质DNA上切割rDNA基因的间隔序列,诱导高效同源重组,锌指核酸酶载体、多位点基因打靶载体共转染的定点整合效率为24.2%,较常规基因打靶定点整合率(10-6～10-5)提高了24000多倍.共转染的HEK293细胞在无任何筛选的条件下持续培养2个月,经过20次传代之后,子代细胞能够持续表达EGFP,提示表达稳定.本研究建立了锌指核酸酶介导的高效多位点基因打靶技术,不仅大大提高了外源基因的定点整合效率,而且兼顾了基因表达的稳定性和安全性,为动物定点转基因和人类基因治疗提供了重要的技术平台,具有广泛的应用前景.     

妊高征候选基因EDNl多态性的初步研究

目的内皮素-1基因是妊高征的候选基因之一。通过研究该基因TaqⅠ位点在中国人群中的多态性,探讨中国人群中EDN1与妊高征的关系。方法根据EDN1第4内含子中多态性片段的有关序列,设计相应引物,建立检测该多态性片段的PCR技术。结果26个样品52个内皮素-1基因TaqⅠ位点等位基因中T1的频率为80.9％,T2的频率为19.1％。结论显示中国汉族人群内皮素-1基因中存在着TaqⅠ酶切位点多态性。     

塞拉利昂粘土制造建筑陶瓷的可行性评价

研究了塞拉利昂不同沉积地区的3种粘土的物理、化学和矿物性质，以确定这些粘土是否可用于生产建筑陶瓷。结果表明，Mambolo粘土具有中等可塑性，Nitti和PaLoko粘土具有高可塑性，符合陶瓷制品的原料要求，XRD图谱和SEM照片表明：石英和高岭石是这些粘土的主要矿物成分，它们经1250℃烧成后形成大量的莫来石和少量的α-方石英，表明[ 些粘土适合用于生产建筑陶瓷，但由于Fe2O3含量偏高，故不可直接用于生产白色陶瓷，而需作进一步处理，不过可直接用于生产非白色陶瓷制品，如陶瓷墙地砖等。     

让“口算除法”教学“活”起来

大家知道,传统小学数学计算教学是注重让学生牢记法则,通过反复练习形成计算技能,而忽视了学生主动参与、积极探索获取知识的过程,使计算变得乏味无趣,不利于学生能力的培养.     

项目管理软件在施工进度管理中的应用状况分析

目前国内外项目管理软件在进度控制方面的功能已经相当完善,施工企业各管理层已经配置了可以满足需要的管理软件、计算机硬件及网络系统。但是令人遗憾的是,70%以上的企业施工项目进度管理不能够很好地使用这些管理软件来提高科学管理的水平,文章分析了我国施工企业进度管理中使用项目管理软件的现状和存在的问题,指出了在施工管理中使用项目管理软件的一些有益的建议。     

利用PCR—RFLP分析eNOS基因exon 7 BanⅡ酶？…

目的：探讨内皮型一氧化氮合酶基因多态性与妊高征的相关性。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术检测了１２例正常女性的内皮型一氧化氮合酶基因第７外显子。结果：发现１２例正常女性中有４例的基因型是ｅＮＯＳ／ＧＧ,有８例的基因型是ｅＮＯＳ／ＧＴ,未检测到ｅＮＯＳ／ＴＴ型的个体。等位基因Ａ１（ｅＮＯＳ／Ｇ）的频率为６６．７％,等位基因Ａ２（ｅＮＯＳ／Ｔ）的频率为３３．３％。结论：广东女性人群存在内皮型一氧化氮合酶