核酸酶I-SceI介导的转基因斑马鱼构建及连接蛋白Connexin48.5的定位研究

细胞连接蛋白是由多基因家族编码的一类结构相似、分子质量不同的蛋白质.在细胞膜上,每6个相同或不同的连接蛋白围绕中央孔排列形成一个连接子,相邻细胞膜上的连接子相互对接形成细胞间隙连接,细胞间隙连接是一种重要的通讯连接,它不仅是细胞间代谢偶联、冲动传导的结构基础,而且可以通过介导与细胞的迁移、分化、增生和器官形成有关的信号物质而在胚胎发育中起重要作用.为了进一步探讨细胞间隙连接在生物体中的作用,采用斑马鱼胚胎显微注射核酸酶I-SceI和质粒DNA的方法成功构建了绿色荧光蛋白GFP与细胞连接蛋白Connexin48.5融合表达的转基因荧光斑马鱼品系,并通过对荧光蛋白发光的观察在斑马鱼鱼体中进行连接蛋白Connexin48.5的定位.实验结果表明:核酸酶I-SceI介导下的斑马鱼转基因方法效率较高,可行性好;连接蛋白Connexin48.5在斑马鱼体内主要定位于眼球晶状体和脊索.所获得的Connexin48.5-GFP融合表达斑马鱼系,以及利用该品系进行的Connexin48.5定位研究对细胞连接蛋白在生物体内的功能研究将具有重要作用.     

RP-HPLC法测定人血浆中的替勃龙

采用反相高效液相色谱法检测人体血浆中替勃龙的含量.以5倍样品体积的乙腈萃取2次,经氮气吹干,甲醇溶解后,上机分析.采用Promosil-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇-乙腈-水,流速:1.0mL/min,进样量:10μL,检测波长:204nm,柱温:25℃.在优化的色谱条件下,替勃龙在0.5～250.0μg/mL内线性关系良好(r=0.999 9),最低检测限为0.05μg/mL,平均回收率(n=3)为92.7%,RSDs小于1.6%.本方法简单,灵敏,准确,适合于体内替勃龙含量的检测与分析.     

酸性离子液体[BPy]HSO4和[BMMIm]HSO4催化合成查尔酮反应机理探讨

离子液体作为绿色的溶剂和催化剂具有很多独特的性质,特别是离子液体的可设计性,使其具有酸性可调的特点.分别以酸性离子液体[BPy] HSO4和[BMMIm] HSO4为催化剂,在无溶剂条件下考察了两种离子液体对Claisen-Schmidt缩合的不同催化效果,探讨了两种离子液体在查尔酮合成中可能的催化机理.     

博弈论中某些概念的辨析

近年来,博弈论几乎成为了西方经济理论的一部分,在国内当前流行的教材中也用大量篇幅介绍博弈论相关内容.但是在某些教材中对基本概念解释存在错误,这使得对相关理论的分析与说明都出现了问题.分析了博弈论中策略等概念,探讨了相关内容的理解问题,纠正了某些文献中对相关概念的误解.作为数学应用,＂博弈论＂仅仅是为各种设定的场景构建数学模型,其结论都是有严格限制的.     

R~n上具有记忆项的非自治反应扩散方程的拉回吸引子的存在性

研究了如下在无界区域Rn上具有线性记忆项和在相空间中无界的外力项的非自治反应扩散方程的解的长时间行为u/t-Δu＋λu-∫∞0k（s）Δu（t-s）ds=f（x,u）＋g（x,t）.运用一致先验估计方法证明了解的拉回渐近紧性,进而证明了方程分别在相空间X0=L2（Rn）×M0和X1=H1（Rn）×M1上的拉回吸引子的存在性.     

长白山地区熊蜂的访花偏爱性研究

对长白山地区7种熊蜂访问的主要蜜源植物的花形、花色、花味及花粉的形态结构进行了研究,总结出了熊蜂偏爱访问的蜜源植物的花部特征.结果表明:熊蜂偏爱访问具有圆锥花序、总状花序和聚伞花序的花,对于单生花,通常花形较大;访问的花冠类型以辐射对称和两侧对称为主;花多具有蜜腺,分泌花蜜;色泽艳丽,常为黄色或蓝紫色;花粉粒较大,形状多为长球形,具三孔沟,表面具网状纹饰;花的气味成分主要为酸类和酯类化合物,其中含有较高浓度的羟基丙酮、乙酸、甲酸、苯酚和9,12-十八碳二烯酸乙酯.     

苯乙酮烯醇式互换异构对聚乙烯电树枝老化性能影响的理论研究

对苯乙酮烯醇式互换异构反应机理进行了理论研究,并首次提出苯乙酮/聚乙烯复合材料中的苯乙酮的烯醇式互换异构反应是抑制聚乙烯中电树枝引发和生长的重要因素.在B3LYP/6-311+G(d,p)水平下优化了苯乙酮和类聚乙烯苯乙酮模型化合物烯醇式互换异构反应的反应物、过渡态和生成物的几何构型,并进行了简谐振动频率分析.在相同的理论计算水平下,利用内禀反应坐标理论计算了反应的最小能量路径.研究结果表明,苯乙酮和类聚乙烯苯乙酮模型化合物由酮式转换成醇式的反应能垒均低于聚乙烯碳碳键的平均键能.     

表达FLP重组酶pCEP4-FLP载体的构建及其在FLP/FRT重组系统中的应用

构建重组载体pCEP4-FLP和pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP,重组载体pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP瞬时转染PK-15细胞24h后,再将重组载体pCEP4-FLP瞬时转染该细胞,利用荧光显微镜观察PK-15细胞GFP蛋白的表达情况,利用细胞流式技术统计绿色荧光蛋白表达效率.结果表明:重组载体pCEP4-FLP在细胞内能够表达FLP重组酶,并且表达的FLP重组酶能够识别FRT位点,删除两同向FRT位点间的DNA片段,为FLP/FRT位点特异性重组系统在转基因猪的应用奠定了基础.     

电极加工时间对电火花加工效率影响规律研究

研究电极加工时间对电火花加工效率的影响规律可以为控制电极加工时间来提高电火花加工效率提供重要理论依据.首先通过实验检测不同电极加工时间对应的有效放电频率,发现在带抬刀的电火花加工中,加工效率随电极加工时间的增加而先增加后降低.随后通过观察放电过程中加工间隙内气泡和加工屑的运动,发现底面间隙内加工屑浓度随电极加工时间的增长而增加.在此基础上,证明了加工效率随电极加工时间的变化规律具有确定性.     

离心铸造碳钢-高铬铸铁复合管有限元模拟研究

采用离心铸造的碳钢--高铬铸铁复合管界面达到了冶金结合.利用ANSYS有限元软件对复合管凝固过程外层及内外层温度场进行了模拟与分析.模拟结果表明:离心浇注外层20钢大约9 s后,铸件最低温度为1430℃,已经低于20钢固相线温度1490℃,由此可见,浇注间隔时间为9s时,可形成规则稳定的过渡层.当外层20钢的温度降至1350℃时,浇注高铬铸铁,大约30 s后,内层的温度已降至1257℃,低于高铬铸铁固相线温度,此时,内层熔体已经完全凝固.