Tm值差异型不对称PCR方法的建立及其在分子诊断中的应用

多数分子诊断方法对靶基因的检测都是以单链DNA为基础的,如何获得大量和高质量的单链靶DNA分子一直是研究热点.以包含BRCA1基因上3个单核苷酸多态性(SNP)的DNA片段为研究对象,通过调整不对称扩增引物碱基序列组成(5′-端引入错配或加入锁核苷酸(locked nucleic acid,LNA)),使用相差10倍浓度来增加不对称引物间Tm值差异,改进扩增条件(添加增强剂的扩增缓冲液,不同退火温度的二阶循环扩增程序)后,进行不对称扩增来产生大量单链靶DNA产物.结果表明Tm差异型不对称PCR(Tm difference asymmetric PCR,TDA-PCR)可有效提高单链DNA分子产率,降低引物设计难度,也扩大了模板序列的适用范围.此外,还针对禽流感病毒H5N1的血凝素(haemagglutinin)HA基因保守序列进行不对称扩增,用获得的单链DNA为模板进行焦磷酸测序检测,所得结果与参考序列一致且无明显干扰信号.因此,采用Tm值差异型不对称PCR可使焦磷酸测序等分子诊断流程更为简便,成本更低,效率更高,具有很好的通用性和实用性.     

大采高综采煤壁片帮的原因与防治

综合机械化放顶煤开采技术是近些年来发展较快、较为先进的采煤方法之一。它具有单位产高、掘进率低、适用范围广、减少工作面搬家次数、且成本相对较低等优点。但在煤层开采中,特别是仰斜开采时,片帮现象较易发生。如不能及时加以有控制,极易导致上覆煤岩层在支架前端发生冒落现象,就会造成工作面支架前端发生直接顶大面冒落,而影响生产,并给煤矿生产带来极大的不安全隐患。     

EVA塑料发泡倍率的影响规律实验

采用田口实验设计方法,选取模具温度、模压时间、注射压力和模压压力进行正交实验,分析工艺参数对EVA(乙烯-醋酸乙烯酯共聚物)发泡倍率的影响.结果表明,模具温度对发泡倍率的影响较为显著,模压时间次之,注射压力与模压压力的影响较小.随着模具温度的升高,发泡倍率逐渐增大,最终趋于稳定值,随着模压时间的增加,发泡倍率也逐渐最大...     

基于事故树方法的城市轨道交通乘客坠落站台分析

以系统工程学为视角，结合北京市2004-2008年地铁运营异常记事信息，运用事故树分析法对城市轨道交通乘客坠落站台事件进行分析。通过分析得出，在现有无屏蔽门的条件下，除去乘客自身原因，乘客坠落站台事件发生的概率主要取决于站台管理措施和引导服务设施设置是否合理。本研究有助于城市轨道交通运营公司对引起该事故发生的各个因素提高警惕意识，也为运营安全管理工作提供理论依据。     

玉米花粉酸奶的开发

花粉,自古以来就被誉为“植物生命的精华”,素有“微型天然营养库”的美称,在许多国家已被制成保健食品作为强身、健美的最佳选择.但其采集困难、不易储存、加工成本较高以及人们的认识等原因,至今没有成为一种大众化产品.同时,个别花粉吃起来略显腥涩,食用不方便,产业界也一直没能找到解决花粉口味与食用不便的有效途径.就玉米花粉的采集、采后处理、加工及营养酸奶的加工工艺进行了介绍.     

并联电容器内部故障保护的现状及分析

在我实际工作的基础上,对我国目前电容器内部故障保护的现状及存在问题进行初步分析。     

陈子龙文学思想摭谈

陈子龙所处的时代,经历了多次复古与反复古更迭的文坛并没有大放异彩,明王朝更是内忧外患、风雨飘摇。文坛浅陋、庸俗的诗风并不能承担起拯救时弊的重任。陈子龙在这种情况下祖述六经、力返风雅,承前后七子之余续,宗法唐诗秦文,提出了"文以范古为美"、"诗之为经"、"诗有六义,比兴要焉"等文学主张。强调诗人要忠君爱国、济世安邦,诗歌要雅正崇古、忧时托志。     

基于工作过程的情境教学法在数控铣床实训教学中的研究

本文通过情境教学法,按照工作过程对课程内容进行序化,通过科学的教学设计,将学习领域细化成具体的学习情境。通过六步法,对数控铣床实训教学课程进行研究。     

《红楼梦》霍译本“冷笑”翻译研究

基于自建《红楼梦》语料库,运用定性分析与定量分析相结合的方法,通过计算机统计手段,对《红楼梦》中“冷笑”一词在原著及霍克斯、闵福德译本中的再现情况进行检索与分析,借以探求其“冷笑”翻译在意义显化与隐化方面的特点.研究发现,译本中“冷笑”的翻译51.20％存在显化现象,33.60％存在隐化现象.