Overexpression and export of Vibrio anguillarum metalloprotease in Escherichia coli

Vibrio anguillarum metalloprotease, an extracellular zinc metalloprotease involved in the virulence mechanism of Vibrio anguillarum, is synthesized from the empA gene as a 611-residue precursor and naturally secreted via Sec secretion pathway in Vibrio anguillarum. In this study, heterologous expression of the empA gene encoding metalloprotease and export of the recombinant metalloprotease in Escherichia coli were examined. The empA gene was subcloned into pBAD24 with arabinose promoter and sequenced. The sequence encoded a polypeptide (611 amino acids) consisting of four domains: a signal peptide, an N-terminal propeptide, a mature region and a C-terminal propeptide. The empA gene inserted in plasmid pBAD24 was overexpressed in TOP10 strain of E. coli after arabinose induction. The 36kDa polypeptide of the recombinant metalloprotease as the mature protease was further confirmed by SDS-PAGE and immunoblotting. It was found that recombinant metalloprotease with the EmpA activity and antigenicity was exported into the periplasm of Escherichia coli cells via Sec translocation pathway, whereas it was secreted into extracellular environments in V. anguillarum. The results imply that the expression, export and processing mechanism of the protein in E. coli are similar to those in V. anguillarum.     

基于NB-IoT技术的智能LED灯杆监控系统的研制

针对传统LED灯杆在远程监控、自动巡检、实时单灯调控、故障定位处理等方面存在的问题,本文提出基于窄带物联网(narrow band internet of things,NB-IoT)技术的智能LED灯杆监控系统的研制方案,采用STM32L151单片机作为主控芯片,控制多种传感器采集路灯信息,通过NB-IoT模块与核心...     

二次微分电位溶出法测定食品中镉、锌含量

建立了二次微分电位溶出法测定食品中镉、锌含量的方法.优化了试验条件如pH值、电沉积电位、平衡电位等,线性范围:镉0～16 ng,锌0～800 ng;检出限分别为0.24 ng/mL、0.71 ng/mL,RSD<2.5%(n=7).该法测定食品样品结果与石墨炉原子吸收法一致.     

中原崛起若干问题及对策探讨

通过论述中原崛起的基本内涵与背景,分析河南省与中部其他五省比较所具有的独特优势,证明河南省在中部六省发展中,比较优势大于劣势,经济总量、产业基础、区位、人口、资源以及发展潜力等均居前列,说明河南省有望率先实现中原崛起,并在我国中西部地区发展中起排头兵的作用.     

基于Hough变换的列车客运票图像倾斜校正

为解决列车客运票防伪和自动验票中的列车客运票图像倾斜校正的问题,提出了一种基于Hough变换的列车客运票图像倾斜校正方法.该方法根据现有倾角检测算法及列车客运票图像的特点,将列车客运票图像的前景与背景分离,在对图像前景进行水平轨迹线平滑的基础上提取文本行特征线,然后采用分级Hough变换的思想实现倾角的检测,最后用直线拟合的方法实现图像的校正.实验结果表明了所提出的算法的有效性和可靠性.     

导电高分子复合材料逾渗阈值的预测

逾渗阈值是表征导电高分子复合材料导电性能的重要参数之一,但是由于影响因素异常复杂,逾渗阈值的预测存在不确定性.文中从导电复合材料的微观角度出发,分析了导电高分子复合材料的逾渗行为及机理,并基于Flory的凝胶化理论和Bueche的无限网链模型,提出了一种新的预测导电高分子复合材料逾渗阈值φc的方法,最后将理论预测值与其它研究成果进行了比较分析.结果表明:由此方法计算得到的逾渗阈值更加接近高密度聚乙烯/碳黑导电复合材料的实验结果.     

人车分流系统在大学校园中心区规划中的应用

众多校园中心场所的营造都离不开"步行优先"这一前提,人车分流系统成为校园中心区规划设计所主要采用的交通模式.回顾早期的校园规划,由于对车行交通的考虑不够完善,造成目前校园内人车混行,人行空间被车行占用,停车空间严重不足.所以,近几年的校园建设都把人车分流作为校园中心区主要采用的交通组织方式,充分满足人行和车行的不同需要.文中从介绍人车分流的理论原型入手,结合实例分析了人车分流系统在校园中心区规划中的应用方法,并提出通畅、舒适、便捷的人车分流系统应用原则.     

EGFR基因C端结构域真核表达载体的构建

构建EGFR基因C端结构域的真核表达载体.应用PCR技术,从含EGFR基因C端结构域的大肠杆菌DH 5α中扩增其序列,亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1( )中,经酶切及测序进行验证.PCR扩增片段与预期结果相符,真核表达载体构建成功,测序结果与GenBank公布的基因一致.成功地构建了EGFR基因C端两个结构域的真核表达载体.     

水工建筑物对生态环境影响的模糊综合评判

针对水利项目的复杂性及负面环境影响,分析、归纳水工建筑物建后对生态环境影响的因素,建立了模糊综合评价模型.运用层次分析法确立各因素的权重,得到了评价矩阵,并通过工程实例运算得到综合评价结果.     

黑龙港麦区小麦品种设计及沧麦026选育

沧麦026新品种以临汾605为母本,CA837为父本有性杂交,经水旱两圃平行交替选择法培育而成.表现性状稳定,抗逆性强,适应性广,节水、丰产特点突出.在1999～2001年冀中北水地组区试及大区生产试验中.平均产量5 790 kg/hm2,比对照京冬8号增产6.1%,居参试品种第一位.大区生产试验平均产量6 135 kg/hm2.经省品审会审定通过,适宜河北省黑龙港麦区中高肥力水平麦田种植.