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301.
302.
目的建立表达、纯化结构完整的全长人PPAR-γ的方法。方法构建pReceiver-B01-PPAR-γ质粒并转化E.coliBL21(DE3)细胞,诱导表达重组蛋白,优化细胞生长条件;利用亲和色谱和尺寸排阻色谱纯化重组蛋白;胶内酶解重组蛋白,用离子阱质谱仪分析二维AgilentHPLC-Chip纯化的酶解片段;基于MS/MS搜索IPI、Swiss.Prot、NCBInr和MSDB数据库,鉴定重组蛋白。结果在优化的细胞生长条件(TB介质、37℃、0.8mMIPTG、诱导3h),从每升TB中可获得280mg重组蛋白;两步纯化后,获得176mg、纯度为95%的均质重组PPAR-γ蛋白;经质谱分析和搜索蛋白质数据库,获得均匀地分布在整个PPAR-γ多肽链中的33个阳性肽段,覆盖率为60%,表明重组蛋白为结构完整的全长人PPAR-γ。配体结合活性位点S289、H323、H449和Y473无突变,保证全长人PPAR-γ与配体结合的生物学活性。结论本文所建立的方法能成功用于大量表达结构完整的全长人PPAR-γ,有利于进一步的结构、功能研究和活性配体的筛选。 相似文献
303.
Se Hwan Mun Na Young Ko Hyuk Soon Kim Jie Wan Kim Do Kyun Kim A-Ram Kim Seung Hyun Lee Yong-Gil Kim Chang Keun Lee Seoung Hoon Lee Bo Kyung Kim Michael A. Beaven Young Mi Kim Wahn Soo Choi 《Cellular and molecular life sciences : CMLS》2010,67(22):3883-3892
Interleukin (IL)-33 is a recently described pro-inflammatory cytokine. Here we demonstrate IL-33 as a regulator of functional osteoclasts (OCs) from human CD14+ monocytes. IL-33 stimulates formation of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)+ multinuclear OCs from monocytes. This action was suppressed by anti-ST2 antibody, suggesting that IL-33 acts through its receptor ST2, but not by the receptor activator of NF-κB ligand (RANKL) decoy, osteoprotegerin, or anti-RANKL antibody. IL-33 stimulated activating phosphorylations of signaling molecules in monocytes that are critical for OC development. These included Syk, phospholipase Cγ2, Gab2, MAP kinases, TAK-1, and NF-κB. IL-33 also enhanced expression of OC differentiation factors including TNF-α receptor-associated factor 6 (TRAF6), nuclear factor of activated T cells cytoplasmic 1, c-Fos, c-Src, cathepsin K, and calcitonin receptor. IL-33 eventually induced bone resorption. This study suggests that the osteoclastogenic property of IL-33 is mediated through TRAF6 as well as the immunoreceptor tyrosine-based activation motif-dependent Syk/PLCγ pathway in human CD14+ monocytes. 相似文献
304.
建立了一种快速、有效、环境友好的样品前处理方法,即无溶剂微波辅助-液相微萃取技术,并结合高效液相色谱法对土壤中的滴滴涕残留进行了测定分析,同时对影响萃取效率的相关因素,如萃取溶剂的种类、微波辐射功率、萃取时间和pH等因素进行了优化。最终确定最佳优化条件为:萃取溶剂为正庚烷,微波辐射功率为120w,萃取时间为1rain,pH为5。在最优条件下,滴滴涕的检出限(S/N=3)为0.18μg/kg,定量限(S/N=10)为0.59μg/kg,实际土壤加标回收率87.34%~96.41%之间,相对标准偏差RSDs在5.75%~6.72%之间。理论分析和实验结果表明,该方法具有操作简便,节省溶剂,快速,高效,选择性好等特点。 相似文献
305.
任务规划技术是嫦娥三号任务中月面巡视器遥操作中的一项关键技术.本文首先分析了各种月面环境因素对巡视器月面工作过程的影响机制,综合考虑月面地形因素、太阳能量、光照阴影以及对地通信条件等,建立了面向任务规划的综合月面环境.在该环境模型基础上,提出了一种月面巡视器遥操作中的任务规划方法.通过定期更新环境模型,将动态环境模型下的路径规划问题转换为一系列静态环境模型下的路径规划问题,实现任务层的动态路径规划;在路径规划过程中进行实时约束检查,实现行为规划并将其影响效果迭代入动态路径规划过程中,最终实现巡视器任务规划.针对不确定性,本文引入弹性计划提高任务规划输出结果在实际工程中的可行性.仿真实验结果表明:月面综合环境模型全面描述了影响巡视器任务规划的各种环境因素及其影响;任务规划方法可生成全局最优路径,以及沿路径安排的满足约束条件的巡视器行为序列,最终生成巡视器的月面工作序列,作为地面遥操作实施的依据. 相似文献
306.
目的观察手性旋光异构体德氮吡格(TNBG)对6株人体肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨其抗肿瘤作用机制。方法运用MTT法检测手性TNBG对6株肿瘤细胞生长抑制情况;油红O染色法观察QGY-7701细胞中脂质聚集情况;流式细胞仪检测手性TNBG对人肝癌细胞株QGY-7701细胞周期分布和凋亡影响。结果手性TNBG能不同程度抑制肿瘤细胞增殖,且呈剂量依赖性;油红O染色提取显示QGY-7701细胞内脂质量与给药剂量呈正相关;流式细胞仪检测到有s期细胞增加,并且手性TNBG还能诱导QGY-7701细胞发生凋亡。结论手性TNBG在体外具有良好的抗肿瘤活性,其抗肿瘤作用机制可能是通过促使肿瘤细胞产生脂质聚集,抑制肿瘤细胞增殖、诱导其凋亡从而达到抗肿瘤效应。总体看(+)TNBG体外抗肿瘤活性比(-)TNBG更强。 相似文献
307.
介绍了在当前铝加工行业较为困难的情况下,A356.2铝合金生产线的设备选型,提出了几种创造效益的新思路,论证了设备管理不再是狭义上的设备技术管理,而是更广义的生产力管理.设备管理需根据市场经济要求,不仅为生产服务,更要为提高企业的经济效益服务,为提高产品质量、降低能耗、控制污染、减少成本和占领市场服务. 相似文献
308.
针对水位线下降会改变坡内的水力梯度,从而导致边坡失稳问题的出现,采用极限分析法和强度折减法建立二维含水边坡,通过优化迭代确定边坡安全系数Fs,并分别与稳定性图表、有限元方法得到的安全系数进行对比,同时探究水位线下降进程、非均质性、各向异性,以及坡脚等参数对边坡稳定性的影响规律.结果表明:水位高度一定时,非均质系数增加,... 相似文献
309.
深部软岩巷道爆破卸压技术及工程应用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为控制深部软岩巷道的变形,利用爆破卸压技术,对淮南矿业集团谢桥矿高应力软岩巷道进行了爆破卸压工程试验,充分改变围岩应力状态,使巷道的变形量及稳定时间得到了很好的控制。 相似文献
310.
为了实现高盐废水中NaCl的回收,采用纳滤-反渗透双膜串级组合工艺,处理NaCl和Na2 SO4的混合模拟废水,考察了浓度配比、操作压力、流速及温度等工艺参数对膜分离效果的影响,并确定出了最佳工艺参数.实验结果表明:在最佳工艺参数下,经纳滤和反渗透分离后的反渗透浓缩液中,[NaCl]/[Na2SO4]≥41.45,可实... 相似文献