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人膜辅基蛋白MCP(membrane cofactor protein)和降解加速因子DAF(decay-accelerating factor)是免疫排斥反应中补体系统活性调节的重要蛋白.以PCR的方法分别从成人肝cDNA文库和胎儿骨髓cDNA文库中扩增得到MCP和DAF基因,克隆入载体pUC19,再以所构建质粒为模板,以PCR的方式在二基因间加入编码柔性连接肽的DNA序列,构建融合基因MCP-DAF,并克隆入pUCl9质粒.将MCP、DAF及MCP-DAF亚克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a( )或pET-32b( ),构建表达载体MCP-pET32a,DAF-pET32b及MCP-DAF-pET32a,分别导入E.coli BL21菌株中表达,得到预期分子质量大小的蛋白. 相似文献
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