鸡马立克氏病诊断报告

作者对成都市近郊某鸡场暴发的一次鸡病进行了较为全面的检查诊断。根据流行病学、临床症状、病理变化及血清学试验,确诊为鸡马立克氏病(MD)。典型的临床症状和病理变化是诊断本病的主要侬据。据对省内部分县市送检鸡病理变化的初步观察诊断,作者认为鸡马立克氏病在四川省的存在可能范围较广,建议进行深入调查并采取相应措施,防止进一步扩散。     

鸡“腺胃型”马立克氏病的病理形态学观察

通过组织病理学检验，说明了近年来成都市某鸡场出现的仅腺胃表现肉眼可见病变的鸡病，属内脏型马立氏病，研究结果显示了组织病理学检验对正确诊断马立克氏病的重要作用。     

鸡马立克氏病的诊断报告

报告了—起雏鸡发生马立克氏病的诊断过程。     

鸡抗马立克氏病遗传标志研究进展(综述)

综述了鸡抗马立克氏病遗传标志的选择进展以及在抗马立克氏病育种中的应用前景     

三种不同方法检测鸡马立克氏病毒的效果比较

研究比较了核酸斑点杂交技术、多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增和病毒分离技术在检测ＭＤＶ中的效果和相关性，试验结果表明：以ＰＣＲ扩增Ｉ型ＭＤＶ１３２ｂｐ重复序列或以此序列标记的Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ探针进行Ｄｏｔ－ＤＮＡ分子杂交检测ＭＤＶ，均具有较好的效果，灵敏度比常规病毒分离高近万倍，其特异性较强，并能快速鉴别ＭＤＶⅠ型毒，使诊断时间缩短了许多。     

鸡马立克氏病病毒与大肠杆菌混合感染症的病原分离鉴定

鸡呼吸道病流行病学调查的过程中,在韶关市某养鸡场观察到一群100日龄广西黄肉仔鸡发生了以呼吸道症状为主要临床表现的疾病,死亡率达10%.病理解剖学检查可见病鸡有单一或多器官肿瘤病变(4/8)、典型腹膜炎病变(3/8)和肿瘤与腹膜炎病变并存(2/8).在病鸡肿瘤组织切片中可见典型MD病理组织学变化.采用CEF接种方法,从有肿瘤和腹膜炎病鸡的羽髓液中分离到MDV.在病鸡的心、肝、脾等脏器分离到大肠杆菌O78血清型菌株.研究结果表明:HVT疫苗免疫鸡群MDV强毒株和E.coliO78血清型菌株以混合感染形式存在,病鸡出现以呼吸道症状为主的临床表现,死亡率明显增加.     

马立克氏病病毒meq基因功能研究

从马立克氏病病毒（MDV）不同致病型毒株meq基因序列，meq基因产物及其细胞内表达特性和meq蛋白生物学功能的研究探讨马立克氏病病毒致瘤基因meq功能。完成了648A,CV1988/Rispens,814，广西地方毒株G2，N，0093，0095，0297，0304共9个MDV毒株meq基因的序列测定。MDV不同致病型毒株的meq基因序列相对比较保守，它们相互间核苷酸和氨基酸序列的同源性均很高；与所有7个致瘤的MDV毒株相比，在2个MDV-1弱毒疫苗CV1988/Rispens株和814株发现有二个特征性位点突变。此外，还在其ORF中首次发现含15个氨基酸残基（EELCAQLCSTPPPPI）的2个重复和含6个氨基酸残基（PPICTP）的4个重复，全分布在MEQ蛋白C-端的转录激活域内。MEQ蛋白的表达仅局限于感染细胞的核内，而且随感染时间增加。具有从核质向核仁和核膜转移趋向；Western Blotting和免疫沉淀试验证实重组杆状病毒感染细胞裂解物中有大小约为60kD的特异带，利用表达的MEQ蛋白产物免疫BALB/c小鼠，获得的杂交瘤细胞被克隆并与MDV感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）做免疫荧光试验（FA），获得4株稳定产生抗MEQ蛋白单克隆抗体（McAb)的杂交瘤细胞，其中3G12E6单克隆抗体能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物，而CV1988/Rispens感染的细胞则未检测到，发现细胞内表达的meq基因产物可明显促进MDVGA株对体外培养细胞的感染及增殖。研究结果表明，meq基因在感染细胞内的表达水平是MDV增殖和致病，致瘤的分子基因。     

液相芯片技术检测马立克氏病病毒方法的建立

目的 建立检测马立克氏病病毒的双抗夹心液相芯片技术方法。方法 将捕获抗体偶联到19号微球,分别确定捕获抗体的偶联量、检测抗体和SA-PE抗体的工作浓度,用建立的液相芯片方法进行特异性、灵敏度、重复性及临床样品的分析。结果 1×106个荧光编码微球的抗体偶联量为2 μg,最佳的检测抗体与SA-PE的工作浓度分别为2 μg/mL和4 μg/mL。该方法特异性强,只检出马立克氏病病毒,其他病毒未检出;灵敏度为125 pfu/mL;批内批间的变异系数分别为0.85%和2.4%;对58份临床样品检出率为31%。与PCR方法比较,符合率为94.8%。结论 建立的马立克氏病病毒液相芯片检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点。该方法可用于马立克氏病的监测,也可用于SPF鸡的筛选。     

马立克氏病病毒MEQ蛋白单克隆抗体的制备及应用研究

基因表达与病毒感染细胞及致瘤能力之间关系的阐明，将有助于我们对马立克氏病病毒（MDV）meq基因功能的了解，该研究利用通过杆状病毒载体在昆虫细胞系SF9上高度表达的MEQ蛋白免疫BALB/c小鼠，然后收获其免疫脾细胞与肿瘤细胞系SP2/0通过PEG于体外融合，获得的杂交瘤细胞被克隆并通过与MDV感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）做免疫荧光试验（FA），进行其分泌抗MEQ单克隆抗体（McAb）能力的筛选，获得4株稳定产生抗MEQ蛋白McAb的杂交瘤细胞，其中3G12E6通过FA和免疫酶组化技术能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物。研究的结果首次发现，MDV致瘤株GA、RB1B感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中均有meq基因的表达，但在弱毒疫苗株CV1988感染的CEF和免疫鸡组织细胞中则未检测到MEQ，作者认为这是由于meq基因在致瘤株中表达水平高，而在非致瘤株中表达水平低所致，这可能是决定MDV毒力（virulence）或致瘤性（oncogenicity）的关键因素之一。     

马立克氏病的流行病学调查及防治

<正>MD(马立克氏病)是一种高度接触性致肿瘤性传染病,以内脏、肌肉、皮肤淋巴肿瘤的形成和周围神经淋巴细胞浸润在临床上较为常见.MDV早期感染导致胸腺和法氏囊萎缩、坏死,引起免疫抑制,使鸡新城疫,鸡败血霉形体、鸡球虫病等易感性增强,疾病的发生又加剧MD的发生,从种使MD在临床上较为复杂.MD的免疫是CMI,凡能使CMI降低的绣因(饲养管理不当、密度大、卫生差、饲料霉变、疫苗接种不当等)都能使MD的易感性增高和死亡率增加.MD的易感年龄4—18周龄有向后延伸的趋势,潜伏期7—9天(3—5天)有较     

马立克氏病病毒疫苗CVI988株囊膜糖蛋白gI基因的序列分析

根据马立克氏病病毒(MDV)国际标准株GA株的基因序列设计合成了可扩增gI基因(1060bp)的引物.用PCR技术,以CVI988基因组为模板,扩增得到了预期大小的PCR产物.将此PCR产物和pUC18经同样的限制性内切酶KpnⅠ和BamHⅠ处理后,连接、转化、鉴定,得到了含有gI基因的质粒.将此质粒进行序列分析,比较了它与其他强毒和超强毒株的同源性.用DNAstar软件对其编码的氨基酸的疏水性和抗原性进行了预测.     

马立克氏病病毒疫苗CV1988株囊膜糖蛋白gI基因的序列分析

根据马立克氏病病毒（ＭＤＶ）国际标准株ＧＡ株的基因序列设计合成了可扩增ｇＩ基因（１０６０ｂｐ）的引物，用ＰＣＲ技术，以ＣＶ１９８８基因组为模板，扩增得到了预期大小的ＰＣＲ产物，将此ＰＣＲ产物和ｐＵＣ１８经同样的限制性内切酶ＫｐｎＩ和ＢａｍＨＩ处理后，连接、转化、鉴定，得到了含有ｇＩ基因的质粒。将此质粒进行序列分析，比较了它与其他强毒和超强毒株的同源性，用ＤＮＡａｓｔａｎ软件对其编码的氨基酸的疏水性     

马立克氏病毒感染的鸡肝脏肿瘤中热应激蛋白108含量的增高及其基因序列分析和表达的研究

从马立克氏病毒(MDV)引起的鸡肿瘤肝脏组织中纯化热应激蛋白(hsp)108,蛋白浓度测定结果显示,MDV感染后的鸡肝脏hsp108蛋白含量明显升高,约为正常鸡肝脏hsp108的4倍,发现鸡肝脏组织中hsp108含量在发生肿瘤后显著升高.经酸释放得到与hsp108结合的多肽,高压液相层析后没有发现MDV特异性多肽;对hsp108进行了基因序列分析,MDV感染引发的鸡肿瘤肝脏组织的hsp108与正常鸡肝脏组织的hsp108氨基酸完全相同,没有发生变异;克隆了鸡肝脏hsp108基因,将其在大肠杆菌中表达,纯化后与一个已知的乙肝病毒抗原表位进行体外组装,结果显示重组hsp108蛋白可以和乙肝病毒抗原肽在体外特异性结合,具有多肽结合活性     

鸡卡氏住白细胞虫病病例

<正>1994年元月,石河子某养鸡场饲养的9日龄的艾维因仔鸡,发生一起以内脏器官不同程度的灰白色、淡黄色为特征的疾病.经诊断为鸡卡氏住白细胞虫病,现报道如下;     

致弱Ⅰ型MDV pp38基因同源物的克隆和序列分析

将致弱Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV)感染的细胞基因组DNA的EcoRⅠ酶切产物建于Puc18质粒载体文库中,以digoxingenin标记的含有强毒GA株MDV pp38基因克隆片段作为探针,进行原位杂交反应,初步筛选出阳性重组质粒,进一步用EcoRⅠ酶切分析筛选到含pp38基因同源物的重组Puc18质粒. 序列分析表明该pp38基因同源物与pp38基因有极高的同源性,仅有1个碱基突变并导致1个氨基酸的替换.