SX1近交系小鼠遗传纯度的初步研究

目的初步鉴定山西省肿瘤研究所第22代SX1近交系小鼠遗传纯度。方法应用生化基因位点遗传质量检测法和皮肤移植测试法对山西省肿瘤研究所自行培育的第22代昆明近交系小鼠进行了遗传纯度的初步鉴定。结果所检测的6只近交系小鼠的13个生化位点均未发现杂合基因型,所检基因位点全部纯合;所检测的10只近交系小鼠异体间未发现急性排斥现象。结论初步判定山西省肿瘤研究所自行培育的第22代昆明近交系小鼠在遗传质量上符合国标有关实验动物遗传质量检测的要求。     

H-2基因检测方法在北京市实验动物遗传质量抽检中的应用

目的为贯彻实施新国标,通过检测小鼠H-2单倍型,确认近交系小鼠免疫遗传质量。方法依据新国标GB/T14927.2-2008中的微量细胞毒检测方法,检测北京地区主要生产厂家的BALB/c和C57BL/6小鼠共70只的H-2单倍型。结果共抽检4个单位的BALB/c和C57BL/6近交系小鼠70只,经检测BALB/c为H-2Dd和H-2Kd,C57BL/6为H-2Db和H-2Kb,符合率100%,质量符合要求。结论经抽检,北京地区主要生产厂家2个品系小鼠免疫遗传质量合格。     

BALB/c小鼠遗传污染对单克隆抗体制备的影响

目的检测BALB/c小鼠遗传污染对单克隆抗体制备实验的影响。加强近交系小鼠的饲养管理和重视实验动物的遗传质量检测。方法使用遗传生化标记方法对购进的两批BALB/c小鼠进行了碱性磷酸酶-1(Akp-1)等13个生化位点的检测。结果注射杂交瘤细胞后不产生腹水,经生化检测发现,购买的第一批BALB/c小鼠,在过氧化氢酶-2(Ce-2)等4个生化位点发现杂合基因,第二批BALB/c小鼠在过氧化氢酶-2(Ce-2)等8个生化位点发现杂合基因。结论本实验说明在实验动物的饲养管理上存在漏洞,上述两批BALB/c小鼠未严格按照国家实验动物管理操作规程操作,必须规范实验动物饲养管理,加强实验动物遗传检测,这是保证动物试验结果准确可靠不可或缺的重要环节。     

黑龙江省实验小鼠、大鼠遗传学质量调查

目的根据最新颁布的国家标准,对黑龙江省的实验小鼠、大鼠的遗传学质量进行调查。方法参照国家标准《实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法》GB/T 14927.1-2008,应用乙酸纤维素板,对来自4个单位的BALB/c和C57BL/6实验小鼠及3个单位的SD和Wistar实验大鼠进行生化标记位点的检测。结果被检的BALB/c小鼠和大鼠中均存在杂合。结论大鼠符合封闭群遗传概貌,但近交系小鼠出现了遗传漂变。     

近交系小鼠8个遗传生化标记杂合位点的研究

目的为了更加准确有效地监测近交系小鼠的遗传质量,对近交系小鼠的8个遗传生化标记杂合位点进行 研究。方法将近交系小鼠CBA／Ca与BALB／c交配得到杂交Fl代动物CCBFI,同时将近交系小鼠CBA／Ca与 C57BL／6交配得到杂交Fl代动物B6CBFI,对CCBFI和BbCBFI进行遗传生化标记检测。结果找到近交系小鼠 8个遗传生化标记的杂合位点。结论近交系小鼠的8个遗传生化标记位点相对应的等位基因均为共显性。杂合 位点的图谱可以作为监测近交系小鼠质量的判定标准。     

天花粉蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的制备及鉴定

将小鼠骨髓瘤细胞（SP2／0细胞）与经TCS免疫过的小鼠脾细胞融合,融合后的细胞悬浮于HAT培养液中进行选择性培养,挑选可以分泌TCS单克隆抗体的细胞系,再经克隆化为单克隆细胞系。用间接酶联免疫吸附法检测此细胞系分泌单克隆抗体情况。经细胞融合和2次克隆化后,获得1株可以稳定分泌TCS单克隆抗体杂交瘤细胞系,ELISA检测结果为阳性。获得了可以稳定分泌天花粉蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系,为TCS鉴定、应用奠定良好的基础。     

利用优选的微卫星标记建立常用大小鼠品系的遗传监测体系

摘要 目的 利用微卫星位点在不同近交系小鼠、大鼠中可能具有的多态性,分别筛选出可以一次性区别5种常用近交系小鼠和3种常用近交系大鼠的微卫星引物组合,为近交系小鼠和大鼠的遗传监测分析提供高效的微卫星位点与简易可靠的鉴定条件。 方法 通过查询相关数据库以及文献报道,按照已有明确的微卫星实验数据记录为原则,进行比对和筛选,组成了小鼠37 个和大鼠24个微卫星位点库。 通过PCR扩增和5%琼脂糖电泳鉴定,优化筛选出可以区分单一品系和所有品系的微卫星位点组合。 结果 小鼠优选出11个位点可用于5种常用近交系的鉴定,并建立了1个包含6个微卫星位点的库可用于5种小鼠品系的遗传监测;大鼠优选出6个微卫星位点,可用于3种常用近交系的监测。 结论 成功建立了一套可以区分常用5种小鼠和3种大鼠品系的微卫星监测方法。     

微卫星与生化位点法对BALB/c小鼠遗传检测比较分析

目的 应用微卫星DNA标记检测BALB/c小鼠的遗传质量,并与现行国家标准生化标记法进行比较,探讨其在近交系小鼠遗传监测中的应用,为建立微卫星DNA检测方法奠定基础。方法 采用20个微卫星基因位点和毛细管电泳技术对BALB/c小鼠进行遗传质量检测,同时采用现行国家标准生化标记法进行检测比较分析。结果 各样品20个微卫星基因位点DNA片段大小相同,没有新的等位基因出现;生化标记检测结果亦显示Akp1等14个生化标记基因均为纯合,个体间生化标记表型均一致,根据国家标准符合品系特征。微卫星DNA标记检测结果与生化标记检测结果一致。结论 微卫星DNA标记可准确可靠、方便快捷地检测近交系小鼠遗传质量,本研究所选的20个微卫星基因位点可用于BALB/c小鼠遗传质量监测。     

汉滩病毒G1重组腺病毒的表达及其免疫学特性研究

将汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白G1重组腺病毒(Adeno-G1)感染VeroE6细胞,用IFA法检测其表达产物;并进一步将其免疫Balb/c小鼠。结果可检测到HTNV糖蛋白G1在VeroE6细胞中表达;用该重组腺病毒免疫小鼠,结果表明免疫小鼠体内可诱导产生抗汉滩病毒G1特异性抗体,同时微量细胞培养中和实验结果表明重组腺病毒还可刺激机体产生低水平的中和抗体,但淋巴细胞增殖反应不明显。说明Adeno-G1免疫小鼠后,主要刺激机体产生特异性的抗HTNV体液免疫应答,但刺激机体产生特异性的细胞免疫应答不明显,为HTNV基因工程疫苗的研究提供了实验基础。     

抗β8整合素单克隆抗体在推断小鼠死亡时间中的初步应用

用抗β8整合素单克隆抗体,检测星形胶质细胞氧糖剥夺-复氧模型,小鼠死后不同时间肾和脑组织β8整合素表达、定位的变化,绘制光密度平均值-死亡时间曲线,初步推断小鼠个体死亡时间.结果显示缺氧环境中,星形胶质细胞、肾小管上皮细胞和脑胶质细胞β8整合素表达量升高.细胞形态的变化以脑胶质细胞最为明显,β8整合素定位由细胞膜到细胞浆,最后随细胞膜破裂释放到细胞外基质.Image-Pro Plus分析显示,缺氧脑胶质细胞β8整合素表达量在48 h达最高值,绘制的光密度平均值-死亡时间曲线能初步推断小鼠个体死亡的时间.     

三种小鼠血液生理生化正常值的测定

本文通过对三种小鼠－ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠和昆明远交群小鼠的血液学和血液生化指标进行测定。其结果：⑴血液学指标：ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的嗜中性白细胞、淋巴细胞雌雄间差异显著;Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠、昆明小鼠雌雄间差异不显著;昆明小鼠的白细胞比ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠的低;ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的单核细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞记数比Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小     

用于乙肝疫苗效力检定的小鼠种群的建立

目的在进行乙肝疫苗效力检测时应用统一的动物种群。方法目前评价乙肝疫苗免疫效力的主要方法是用小鼠测定乙肝疫苗的ED50值(接种疫苗后使50%的动物抗体阳转的疫苗稀释度的倒数),而小鼠对HBsAg免疫应答的水平与H-2单倍型密切相关。因此我们通过微量细胞毒法和PCR方法检测小鼠的H-2单倍型的特点,得出乙肝疫苗与不同动物种群的相关性,解决实际工作中的问题。结果通过多方面的实验验证,NIH鼠可以对乙肝疫苗产生高应答效应。结论NIH鼠的H-2单倍型中有q型基因,同时NIH鼠保持了原封闭群动物繁殖力强生长速度快等优点,所以便于进行乙肝疫苗效力检测时应用。     

IRM-2抗辐射小鼠的研究与应用

21世纪是生命科学的世纪 ,实验动物是生命科学研究的重要基础材料和手段 ,几乎所有人类服用的药物都是先在实验动物的活体上进行实验后研制而成的 ,而在放射生物学、肿瘤学、免疫学等领域的研究中 ,需要用不同类型的动物模型以满足实验要求。为此我们选用以ICR JCL小鼠为母本、6 15小鼠为父本进行杂交 ,连续同胞交配 2 0代培育成功了IRM 2近交系小鼠。现已传到 5 2代 ,它具有产仔率高、生长发育快的特点 ,适合做急性辐射损伤模型、自发性肿瘤模型、移植性肿瘤模型。为了确定IRM 2小鼠的基因纯合性和遗传质量 ,我们对该小鼠进行了皮肤移…     

SX1近交系小鼠主要脏器及血液生化指标的测定

目的测定SX1近交系小鼠的主要生化及血液指标,为建立该品系小鼠的生物学特性资料提供实验数据。方法从F29、F30代仔鼠中选择1、2、3、4月龄的小鼠,分别测定这些小鼠的体重、体长、尾长;心、肝、脾、肺等12种脏器的重量;总蛋白、白蛋白、血糖、肌苷等16项血液生化指标及白细胞、红细胞、血红蛋白等15项血液常规指标。结果SX1小鼠在1、23、、4月龄时的体重、体长、尾长,心、肝、脾等脏器随小鼠生长而增加,但胸腺随小鼠生长而缩小;各脏器重量均雄性大于雌性,肾上腺为雌性大于雄性;其中14项血液生化指标随小鼠的生长基本无明显变化,而总胆红素和碱性磷酸酶指标随小鼠生长而降低,多数指标无性别差异,但碱性磷酸酶指标雌性大于雄性;其中13项血液常规指标随小鼠的生长基本无明显变化,只有白细胞与平均血小板压积随小鼠生长而降低,且白细胞指标雄性大于雌性。结论各项指标基本符合近交系小鼠的特征,补充了SX1近交系小鼠的资料。     

IRM-1小鼠生物学特性的初步研究

目的　测定和比较不同年龄和性别IRM 1小鼠主要脏器重量和系数、生殖生长数据。方法　将不同周龄小鼠断颈处死 ,取主要脏器称重 ,计算脏器系数 ,测定出IRM 1小鼠不同时期的生殖生长数据。结果和结论　 9周龄雄性小鼠心、肝、肾重量高于雌性小鼠 ,(P <0 0 5 ) ,6周龄雄性小鼠心、肝、肺、肾重量高于雌性小鼠 (P <0 0 5 ) ,9周龄和 6周龄雄性小鼠胸腺重量均低于雌性小鼠 (P <0 0 0 1)。IRM 1小鼠生殖生长特性与IRM 2小鼠相似     

谷胱甘肽过氧化物酶模拟物6-CySeCD对过氧化氢诱导小鼠成纤维细胞损伤的保护作用

考察不同剂量的H2O2作用于小鼠成纤维细胞(NIH3T3)后,细胞脂质过氧化、存活率、DNA片段化的变化情况,并研究谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的模拟物6A,6B-环己胺-6A′,6B′-硒桥联-β-CD(6-CySeCD)抗H2O2诱导小鼠成纤维细胞损伤的能力.结果表明:H2O2对NIH3T3细胞有严重损伤;6-CySeCD能有效保护细胞,防止紫外线引起的损伤.     

3种仙人掌多糖抗肿瘤作用的研究

研究3种仙人掌多糖对S180、H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用.通过腹腔注射给药,以抑瘤率、生命延长率及胸腺指数和脾指数为指标比较3种仙人掌多糖对荷瘤小鼠(S180和H22)的抑瘤作用.结果表明,3种多糖(食用仙人掌、药用仙人掌、仙人球)对S180荷瘤小鼠肿瘤有抑制作用,最大抑瘤率分别为46 38%,33 82%,36 23%;其对H22荷瘤小鼠有延长存活时间的作用,最大生命延长率分别为56 98%,45 53%,78 89%;另外,除药用仙人掌多糖低剂量组(50mg/kg)的胸腺指数及脾指数与生理盐水组无差异外(P>0 05),其他各多糖组的胸腺指数及脾指数均与生理盐水组及5-Fu组有显著差异(P<0 05,P<0 01).     

红酵母RY-2004产胞外色素条件的研究

研究不同氮源对红酵母RY-2004胞内外色素含量的影响，并通过正交实验优化了红酵母产胞外色素的培养基组成。实验结果表明以NH4H2PO4为氮源，培养基组成为CH3CH2OH3％、NH4H2PO43％、Mg—SO40．1％，ZnSO40．05％，有利于红酵母产胞外色素。