光生物素标记DNA荧光法微孔板DNA杂交测定类单胞菌DNA-DNA相关性的研究

应用光生物素标记DNA荧光法微孔板DNA杂交测定类单胞菌的分离菌株和参考菌株DNA-DNA相关性.热变性DNA固化在96孔微孔板,光生物素标记DNA与固化DNA杂交,测定酶链霉抗生物素偶联β-D-半乳糖苷酶(Strept-avidin-conjugated β-D-galctosidase)作用于敏感荧光底物4-甲基荧光素-β-D-半乳糖苷(4-methylumbelliferyl-β-D-galactoside).在波长365nm激发450nm发射,荧光分析仪测定杂交的荧光强度.根据荧光强度,计算分离菌株和参考菌株DNA-DNA相关性.试验结果表明:光生物素标记ONA荧光法微孔板DNA杂交是更敏感的方法,与光生物标记DNA硝酸纤维膜比色法点杂交、DNA动力学测定DNA同源性,数值分类法的结果基本相符.     

以光生物素标记DNA的点杂交比色法迅速鉴定类单胞菌的研究

应用光生物素标记参考菌株DNA比色法以DNA-DNA点杂交对类单胞菌属的分离菌株及参考菌株进行遗传学鉴定。在强日光灯下,光生物素标记DNA15min。以少量菌体法提取被测菌株的DNA,并将此DNA点种在硝酸纤维膜上;碱性磷酸酶偶联链霉抗生物素基物显色法DNA-DNA点杂交,颜色图形分析仪测定点杂交颜色强度。该方法鉴定结果与数值分类法的结果和复性率定量测定DNA-DNA同源性的结果基本相符。光生物素标记DNA比色法DNA-DNA点杂交鉴定类单胞菌是一种快速而简便的方法。     

生物素标记的PSTV互补DNA探针分子杂交的研究

用~(32)P标记的互补DNA探针进行分子杂交是基因重组和分子克隆中常用技术,然而由于~(32)P的半衰期短,从而为供应和保存带来不便,致使这一技术的应用受到一定限制。近年来国内外均十分重视研究应用非同位素标记DNA探针的技术。我们用Biotin—11—dUTP(Bethesda Research Laboratories)以缺口平移(Nick translation)标记了pST-B14和pST-B5 DNA中的PSTV cDNA插入顺序,制备出生物素标记的DNA     

毫微克DNA—DAPI复合物荧光法测定的研究

DAPI（4－6＝脒基－2－苯基吲哚）是检测微量DNA的专一性荧光染料，其最高灵敏度为0．1ng/ml,DNA浓度由微微克向毫微克增大时，峰位红移10－20nm。DNA浓度在1－100ug/ml时，DAPI的适宜浓度范围为30－100ng/ml。     

催化荧光法测定痕量铬(Ⅵ)的研究—铬(Ⅵ)—溴酸钠—还原型罗丹明B体系

基于铬(Ⅵ)对BrO_3~-—还原型罗丹明B体系的催化作用。本文建立了一种荧光增强测定痕量铬(Ⅵ)的新方法。运用固定时间法研究了该方法的最佳反应条件。其线性范围为4.0～32.0ng/ml,检出限为1.6ng/ml。