愈伤组织的诱导和植株再生的实验

<正> 材料和方法一、愈伤组织的诱导 1、材料处理截取蜀葵(Alt haea rosea)(锦葵科)、金光菊(Hololeion maximovic gii)(菊科)、十姊妹(Rosa mulfiflroa uar Plafyphylla)(蔷薇科)的当年生嫩茎,除去全部叶片和芽,将茎切成1—1.5cm长的茎段,用清水洗净,放入0.1％HgCl_2,溶液中消毒灭菌10—15分钟,在无菌条件下放在无菌水中冲洗五次,备接种之用。     

鸡蛋花愈伤组织诱导和植株再生的研究

对以鸡蛋花叶片作为外植体进行愈伤组织诱导和植株再生研究,发现MS NAA0．1mg／L 6-BA 1mg／L对愈伤诱导效果最好,出愈率达96％;愈伤组织分化为芽时,MS NAA0．1mg／L 6-BA 2mg／L效果最好,分化率达98％．生根培养基为1／2MS NAA0．1mg／L．     

木槿(Hibiscus syriacus L)愈伤组织的诱导和试管植株的再生

本文报导了从木槿体细胞成功地诱导出愈伤组织并分化产生植株,筛选出了良好的诱导和分化培养基。同时,对于根的分化,再生植株染色体倍性以及继代培养的植株分化频率作了初步的分析研究。实验是以全胚以及胚轴、子叶、幼根为接种材料,从17种诱导愈伤组织培养基、7种分化培养基和5种再生植株根分化培养基中,筛选出了各类最适培养基,实验结果表明,木槿较好的诱导培养基是:MS 2.4-D0.5mg/l KT0.1mg/l 糖3%,较好的分化培养基是:MS ⅠAA2mg/l 6-BA1mg/l 糖1.5%,在上述培养基上,愈伤组织的诱导率最高可达100%,并分化出了大量再生植株。将这些再生植株转移到MS NAA0.2mg/1 KT0.1mg/l 糖2%的培基上,取得了有效根系的分化,进而根将系发展良好的植株移栽到花盆中,并巳成活。在移植前,取根尖压片镜检,染色体数目接近2n=80。此外,在继代培养植株分化频率的分析中,初步看到这一性状是相对稳定的,到第七代,分化频率仍高达73%。     

花生愈伤组织的诱导及植株再生

研究花生愈伤组织的诱导及植株再生的条件．用汕油71花生幼苗上胚轴、下胚轴、子叶、幼叶等不同外植体类型进行比较,发现幼叶较易诱导愈伤;用不同激素质量浓度配比研究对花生幼叶愈伤诱导的影响,发现IAA（吲哚乙酸）对花生的愈伤诱导效果较2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）和NAA（萘乙酸）好;用不同叶龄及叶切段比较,发现以10d苗龄的叶片中部切段愈伤诱导率较高取苗龄10d的花生无菌苗的幼叶中段为外植体,置于ρ（MS＋IAA）3mg／L＋ρ（BA）1mg／L培养基中培养,30d后诱导率达到100％且愈伤呈淡绿色、半透明、疏松状．50d后转至ρ（MS＋IAA）0．5mg/L＋ρ（BA）2mg／L＋ρ（TDZ）0．5mg／L分化培养基中诱导芽（TDZ,噻重氮苯基脲）,截取诱导芽单芽,转接至根诱导培养基中。获得再生植株     

茴香胚性愈伤组织的诱导和再生植株

以茴香幼苗的茎和叶柄为外植体，在不同种类和浓度的植物激素处理下产生了愈伤组织，进一步诱导生成胚性愈伤组织，在分化培养基上，愈伤组织通过形态建成的两种基本方式：器官发生和胚状体发生，得到了茴香的再生植株。     

毛花猕猴桃愈伤组织诱导与植株再生

从毛花猕猴桃（ＡｃｔｉｎｉｄｉａｅｒｉａｎｔｈａＢｅｎｔｈ）田间生长的茎段、种子无菌条件下萌发的下胚轴及试管苗的茎段和叶片得到愈伤组织。田间来源的茎段诱导愈伤组织较难，愈伤组织生长缓慢；下胚轴及试管苗茎段和叶片容易产生愈伤组织，愈伤组织生长旺盛。消毒时间、接种方法、基因型和培养基都可能影响到田间来源的茎段愈伤组织产生。在ＭＳ附加玉米素或６－苄氨基嘌呤（ＢＡＰ）的培养基上下胚轴来源的愈伤组织不经转代即分化芽和根。试管苗茎段和叶片在附加玉米素或Ｎ－（２－氯基－４－吡啶基）－Ｎ′－苯基脲（ＣＰＰＵ）的ＭＳ培养基上培养一代也分化出芽、试管苗茎段在附加０．００２５ｍｇ／ＬＣＰＰＵ和０．１ｍｇ／Ｌ吲跺乙酸（ＩＡＡ）的ＭＳ培养基上产生愈伤组织、芽的分化和苗生长都较理想；试管苗叶片则以附加０．０２５ｍｇ／ＬＣＰＰＵ和０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ或０．５ｍｇ／Ｌ玉米素和０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ的ＭＳ培养基较好。当苗伸长至１ｃｍ或以上时切下，转入ＭＳ基本培养基（大量元素减半）上后可形成完整植株。     

由野大豆愈伤组织诱导再生植株

在种子萌发过程中,经6-BA(2.0mg/L)和2,4-D(20.mg/L)预处理,野大豆(GlyCine Soja)的上胚轴、子叶和子叶节外植物的愈伤组织在含6-BA(1.0～5.0mg/L)和 IAA(0.5～1.0mg/L)的 MS 培养基上分化出根和苗,获得再生植株。培养基中加入 KT(1.0mg/L)可提高苗的分化率。     

红掌叶片愈伤组织的诱导与植株再生

报道了红掌叶片愈伤组织诱导和植株再生的研究结果 ,试验表明 :诱导愈伤组织频率最高的培养基是MS BA 0 .5mg/L 2 ,4 D 0 .8mg/L ;较适于愈伤组织分化不定芽的基本培养基是N6 ,激素配比以BA 2 .5mg/L 2 ,4 D 0 .1mg/L和ZT 2 .5mg/L 2 ,4 D 0 .1mg/L为好 ;红掌试管苗生根较易 ;使用质量浓度为 0 .5mg/L的NAA ,2 ,4 D和IBA都能很好地诱导不定芽生根 ;富含有机质的疏松表土是理想的移栽基质 ,移栽成活率为 92 .3% .     

玉米胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

采用生产上推广的14个基因型的玉米为材料,由幼胚诱导出胚性愈伤组织并再生植株。其中原齐722×5003等单交种在适宜条件下,胚性愈伤组织的诱导率可达90%,愈伤组织分化苗频率高于80%。在加有1ppm 6BA 和0.1%活性碳的改良 N_b 培养基上,分化出的幼苗长成健壮的小植株。接种幼胚的大小和基因型、基本培养基成份及蔗糖浓度、激素种类和浓度等对胚性愈伤组织的诱导、继代和分化幼苗均有明显的影响。另外,将培养7-8天的幼胚抉碎,可显著提高胚性愈伤组织的诱导率,并能使较大的幼胚产生胚性愈伤组织。随着胚性愈伤组织继代次数的增多,再生植株中畸形苗频率也升高     

激素对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响

比较了2,4-D和Picloram对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响．实验结果表明,培养基中加入2,4-D的诱导效果优于Picloram,2,4-D加入量为6mg／L时,诱导的愈伤组织的分化效果最好．对不同小麦品种幼穗愈伤组织诱导和植株再生的比较结果表明,鄂恩1号、鄂麦11、鄂麦12和山农1355等有较高的植株再生率。其中前3个材料植株再生率达90％以上;从幼穗、幼胚和成熟胚的比较结果来看,幼穗的愈伤组织诱导率和植株再生频率高于幼胚的和成熟胚．     

小麦叶基切段愈伤组织的诱导和植株再生

从3～5d龄小麦籽苗幼叶基部切段诱导出大量愈伤组织。诱导可再生的愈伤组织的培养基为MS 1．5mg／L 2，4-D 0．2mg／L，激动素(KT) 500mg／L，水解酪蛋白(CH) 120mg／L，天冬酰胺 100mg／L，肌醇 3％蔗糖 0．7％琼脂粉。当愈伤组织转移到生长调节物质改变为2mg／L KT，1mg／L NAA和0．1mg／L 2，4-D的MS培养基上培养后，出现了苗的分化。当分化苗在无机盐分减半的MS培养基上培养后，产生了根。愈伤组织的形成和植株再生的频率与外植体的位置和籽苗的发育阶段密切相关，3～4d龄苗叶基1cm处的切段效果最好。叶基愈伤组织的分化能力可保持3～4个月。     

小麦幼胚愈伤组织诱导及植株再生

选取 2 3个品种 (系 )及 8个杂交组合F1的幼胚作为供试材料 ,取 12～ 16日龄的幼胚接种在附加 2 ,4 -D2 0mg/L和 6 -BA 1 0mg/L的MS培养基上 ,诱导 3～ 5d后所有供试材料都具有愈伤组织。筛选出适宜的继代培养基为 :MS +2 ,4 -D 4 0mg/L +NAA 0 5mg/L +LH 5 0 0mg/L +0 5 %蔗糖 +0 85 %琼脂 ;大穗 2、昌乐 2号、抗锈 2 0 4、品系 38等材料愈伤组织生长较好。植株再生适宜的培养基为 1/2MS +NAA 0 5mg/L +6 -BA0 5mg/L +0 3%蔗糖 +0 85 %琼脂。抗锈 2 0 4、昌乐 2号、优 2 6 5 /昌乐 2号、优 2 6 5 /京选 6号、优 2 6 5 /有芒白 4号等 5个供试材料分化率较高 ;杂交胚与常规品种比较 ,幼苗分化率表现出较强的杂种优势     

中国水仙愈伤组织诱导及植株再生研究

以中国水仙鳞茎为试材,进行中国水仙愈伤组织诱导及其分化的研究.结果表明:1)2%次氯酸钠20 min较适合水仙花花苞的消毒处理,水仙鳞茎的消毒处理以0. 1%升汞12 min灭菌效果较好,以内层鳞片存活率最高,外层鳞片次之;2)在MS+6-BA2. 0 mg·L-1+2,4-D 0. 5 mg·L-1为愈伤诱导及继代的培养基上,子房壁愈伤诱导率最高,为77. 8%,但继代未见再分化,外层鳞片愈伤诱导率次之,外层鳞片与带鳞片的鳞茎盘诱导的愈伤均能继代发育成小鳞茎;3)以培养基MS+6-BA 2. 0 mg·L-1+NAA 0. 5 mg·L-1较适合外层鳞片愈伤组织的再分化,鳞茎分化率达64. 4%;4)在培养基1/2 MS+IBA1. 0 mg·L-1上,水仙鳞茎苗生根效果较好,生根率达86. 7%,移栽成活率高.     

互叶白千层愈伤组织诱导及植株再生

本文报导了互叶白千层从无菌种子苗叶片诱导愈伤组织到植株再生的研究结果．实验表明：以继代代数不同的无菌苗叶片为诱导材料,在MS基本培养基中添加TDZ0．4mg／L＋2,4-D0．4mg／L的第五代继代苗诱导效果较好,愈伤组织诱导率达100％．在互叶白千层愈伤组织分化阶段,在MS基本培养基中,激素组合筛选中以添）m6-BA2．0mg／L＋IAA2．5mg／L的分化效果较好,分化率高达94．53％．在分化苗伸长生根阶段,以MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．8mg／L＋AC0．1％的效果较为显著,苗平均高度9．4cm,苗最壮,根粗且壮．     

花生不同外植体愈伤组织的诱导及植株再生

以成熟花生种子的上、下胚轴和叶片外植体为对象,在离体培养下,考察几种外植体再生能力的差异并对其作出对比分析.结果表明:上述外植体均能诱导出愈伤组织并能够进一步再生出幼苗,但不同外植体的再生能力有所差异,其再生能力大小依次为:上胚轴>叶片>下胚轴,培养基的差异对外植体愈伤组织诱导及再生起决定性作用,不同预培养时间对愈伤诱导及再生也有影响,总的来看是预培养时间短的外植体要好于预培养时间长的外植体.     

葶苈子植物愈伤组织诱导及植株再生的研究

对葶苈子植物 :葶苈 (Drabanemorosa)、印度菜 (Rorippaindica)及北美独行菜(Lepidiumvirginicum)愈伤组织的诱导、分化、再生苗的生根进行了研究。结果表明 :(1)在基本培养基为MS ,附加 6 -BA 0 .5mg/L +NAA0 .5mg/L的培养基上三种植物均能产生愈伤组织 ,其出愈率达 10 0 % ,而且 2 0 %的外植体具有一次成苗的能力 ;(2 )在愈伤组织的分化中 ,6 -BA1mg/L +NAA 1mg/L的激素组合是最佳的 ,其分化率为 10 0 % ;(3)无根苗生根的培养基为MS + 0 .5mg/LNAA ,生根率为 90 %     

青蒿茎段愈伤组织的诱导及植株再生

为了建立青蒿的快速繁殖与遗传育种体系,以青蒿茎段为外植体,研究其离体培养及试管苗再生途径.结果表明,青蒿基段愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA1.0mg·L-1 NAA1.0mg·L-1,分化培养为MS 6-BA3.0·L-1 NAA0.5 mg·L-1,生根培养基为MS NN1.5mg·L-1.     

杉木合子胚愈伤组织的诱导及植株再生

以杉木成熟及未成熟合子胚为外植体,研究了基本培养基、植物激素、合子胚的发育阶段等因素对杉木愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明：1／2MS＋2mg／L 2,4-D＋1．0mg／L 6-BA＋1．0mg／L KT＋30g／L蔗糖是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基;处于胚胎选择阶段或者组织与器官分化阶段的幼胚,能诱导出松软、晶莹透明的愈伤组织,诱导频率为2％～6％。成熟阶段的幼胚诱导出的愈伤组织的外观形态与成熟合子胚诱导出的愈伤组织相似,愈伤组织的诱导频率随着合子胚发育的成熟而迅速提高;DCR＋1．5mg／L 6-BA＋1．5mg／L KT＋20g／L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基。高约1．5cm的不定芽转入生根培养基,生根率可达100%。     

金边瑞香花瓣的愈伤组织诱导和植株再生研究

以金边瑞香的花蕾作为外植体,接种于MS附加不同种类外源激素及其浓度配比的培养基中。结果表明:MS 6-BA2.00mg.L-1 IAA0.10mg.L-1愈伤组织诱导率最高,达85.1%;MS Zeatin1.00mg.L-1 6-BA0.10mg.L-1愈伤组织的分化率最高,达97.5%;MS IBA1.00mg.L-1有利于生根,生根率达89.2%,且试管苗生长健壮.     

特种工业用油料作物Lesquerella fendleri的愈伤组织诱导和植株再生

以Lesquerella fendleri下胚轴和子叶作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对于愈伤组织诱导和植株再生的影响．研究表明,L．fendleri下胚轴和子叶在许多激素组合的培养基上都能诱导出愈伤组织．当6-BA的浓度从0提高到1．0mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率也从35．14％提高到97．30％,进一步提高6-BA浓度会降低下胚轴的愈伤组织诱导频率;将NAA浓度从0提高到0．2mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率从70％提高到76．76％,进一步提高NAA浓度则降低下胚轴的愈伤组织诱导频率;将2,4-D的浓度从0提高到0．5mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率从64．29％提高到85．00％,进一步提高2,4-D浓度会降低下胚轴的愈伤组织诱导频率．当6-BA的浓度为0．5mg．L-时子叶的愈伤组织诱导频率最高,达到80．00％;提高NAA浓度可以提高子叶愈伤组织诱导频率,提高2,4-D浓度则会降低子叶的愈伤组织诱导频率．绝大多数愈伤组织在含有6-BA和NAA的MS培养基上都能够分化出许多不定芽．不定芽在MS基本培养基能够诱导生根,生根率在80％以上．