方格星虫生物活性成分的研究进展

方格星虫(Sipunculus nudus)是重要的经济类底栖动物,具有重要的食用和药用价值,它含有多种生物活性成分,如多糖、多肽及蛋白质等,具有增加免疫、延缓衰老、抗疲劳等生理功能。本文对方格星虫中生物活性成分的提取分离、纯化、结构分析及药理作用等进行综述,为方格星虫资源的深入研究和开发提供借鉴。     

方格星虫苗种池塘中间培育试验研究

2008年8月19日至2008年10月22日在广西海洋研究所进行方格星虫(Sipunculus nudusLinnaeus)中间培育阶段苗种的生长及成活率的影响试验。试验共设3种不同的池塘底质,分别是海泥沙底质(1#)、中细河沙底质(2#)和中细河沙加配合饲料底质(3#),每口池塘面积0.2hm2,平均播苗密度为每公顷600万条。试验结果表明,中细河沙加饲料底质(3#)的池塘中培苗种生长速度最快,成活率最高,出苗数量最多,而中细河沙底质(2#)池塘的中培苗种次之,海泥沙底质(1#)池塘的中培苗种相对较差。1#、2#、3#池塘方格星虫苗种成活率分别为56.3%,78.%,80.2%,出苗数量分别为67.6万条、93.6万条、96.2万条。铺设适宜底质,投喂适量人工饵料,是提高方格星虫池塘中间培育技术的重要因素。     

方格星虫的质量检测方法及质量控制标准

目的:建立方格星虫干品质量检测标准,为其质量检测和科学开发利用提供参考。方法:参照2020版《中国药典》(四部)对来自3个不同产地的30批方格星虫干品进行性状、显微鉴别和薄层色谱(TLC)鉴别研究,检测活性物质氨基酸和总糖质量分数,检测其杂质、水分、总灰分、酸不溶灰分、重金属、水溶性浸出物质量分数,利用高效液相色谱法(HPLC)测定方格星虫的黄曲霉毒素质量分数。结果:方格星虫体壁似蚯蚓纵横交错成格状,显微观察可见先端淡棕色钝圆刚毛;在精氨酸、丙氨酸和甘氨酸处呈TLC特征色谱;氨基酸质量分数检测占比最高的依次为谷氨酸、精氨酸和天冬氨酸;总糖质量分数不低于2%;方格星虫供试品杂质、水分、总灰分和酸不溶灰分分别不超过3%、11%、10%和2%;水溶性浸出物质量分数不低于38%;黄曲霉毒素质量分数不超过10μg/kg。结论:本研究建立的方格星虫质量检测标准方法稳定,可为方格星虫药材质量控制提供参考。     

方格星虫多糖水法提取的条件及优化

分别从料液比、浸提时间、浸提次数、浸提温度等4个方面初步研究水法提取方格星虫体壁中的水溶性多糖的条件及优化.在单因素试验结束后,通过正交试验取四因素三水平得到方格星虫水溶性多糖水提法的最佳组合.结果：影响方格星虫多糖提取率的主次顺序为浸提温度＞料液比＞浸提时间＞浸提次数,最佳的浸提条件为：温度100℃,料液比1∶12 g/mL,浸提时间3h,浸提次数4次.在最优浸提条件下,方格星虫水溶性多糖水提法所得的最佳提取率为1.22％.该工艺稳定可行,能有效提高方格星虫多糖的提取率.     

方格星虫消化道发育与摄食研究

观察研究室内育苗、池塘中间培育和海区养殖过程中的方格星虫的消化道发育和摄食特点。结果表明,方格星虫消化道结构由＂C＂环结构发育成双肠环结构,变态7～10d后,发育完善;消化道随体长和生长日龄增加而增大,成体方格星虫消化道约为其体长的4倍;摄食饵料由单胞藻转变为底栖藻类和有机碎屑,幼体摄食最大沙粒径小于翻吻触手基径;方格...     

酶法提取方格星虫多糖的条件及优化

【目的】确定胰蛋白酶酶解法提取方格星虫(Sipunculus nudus)体壁中水溶性多糖的最优条件。【方法】分别从料液比、浸提温度、浸提时间、浸提pH值、酶底比等5个方面进行了初步研究。研究分为两部分进行,先确认提取方法中各单因素的最优条件,再根据单因素试验结果选取4个主要因素(料液比、浸提温度、浸提pH值、酶底比),进行四因素三水平的正交试验,得到方格星虫水溶性多糖水提法的最佳组合。【结果】正交试验结果表明:对方格星虫多糖提取率影响最大的为浸提温度,其次是pH值和料液比,影响最小的为酶底比。最佳浸提条件为:温度60℃、pH值8.0、料液比1∶12g·mL-1、酶底比为2.0%、时间3h。【结论】在最优浸提条件下,方格星虫水溶性多糖酶提法所得的最佳提取率为1.59%。此方法高效稳定可行,能有效提高方格星虫的多糖提取率。     

光裸方格星虫(Sipunculus nudus)人工繁殖及生物学的初步研究

对经济海产动物光裸方格星虫(SipunculusnudusLinnaeus)若干繁殖生物学作初步研究.主要报导,干露5～8h,成熟星虫亲体可排放精、卵并达成受精和正常胚胎发育,它是行之有效的人工催产方法.产卵(精子团)于体腔与排卵(活动精子)于体外是两个必经的先后生殖过程.体腔液中的精、卵必需通过肾管(兼有排泄和生殖的功能器官)的再成熟,排放才能受精及发育.取自厦门及其附近海域的生殖种群雌雄性比为1:1.2.中细沙质泥的底质为亲体暂养的适宜底质.耐饥饿实验结果表明,43h内亲体仍有50%存活,并且仍可作亲体使用.测定5批体壁干湿重关系,其直线回归为y=0.1810x-0.0078(R2=0.9366,),回归系数与个体大小、季节不呈相关.     

方格星虫多糖碱法提取工艺研究

【目的】研究碱法提取方格星虫体壁中水溶性方格星虫多糖的条件及优化。【方法】根据料液比、浸提时间、浸提温度、碱液浓度对多糖得率的影响,并通过正交试验得到方格星虫水溶性多糖浸提工艺优选因素组合。【结果】影响方格星虫多糖得率的因素主次顺序为浸提温度料液比浸提时间碱液浓度;最佳浸提条件为温度50℃,料液比1∶6g/mL,时间4h,碱液(NaOH)的质量分数为8%。【结论】最佳浸提工艺条件下多糖浸提提取率最大为1.81%。     

方格星虫多糖抗菌和抗氧化活性研究

通过比较水提和碱提方格星虫粗多糖的抗菌和抗氧化活性,探讨这两种方法在方格星虫粗多糖提取中的优劣.结果,水提粗多糖对副溶血弧菌（Vib rio parahemol yticus）不敏感,对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）中度敏感,对其它细菌均为低敏感;碱提粗多糖对大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aures）和鳗弧菌（Vibrio an guillarum）低敏感,对白葡萄球菌（Staphylococcus cremoris）和副溶血弧菌中度敏感,对枯草芽孢杆菌和藤黄八叠球菌（Sarcina lutea）高度敏感.表明,碱提粗多糖的抗菌活性较水提粗多糖强.两种方法提取的方格星虫粗多糖均有一定的抗氧化性.水提和碱提多糖浓度均在800μg·mL-1时对羟自由基的清除能力最大,清除率分别为40.32％和39.86％;两种多糖浓度分别在800μg·mL-1和600μg· mL-1时对超氧自由基的抑制作用最大,抑制率分别为9.91％和5.86％.表明,水提方格星虫粗多糖的抗氧化性强于碱提粗多糖.     

方格星虫苗种池塘中间培育过程水环境因子变化研究

2011年7月18日至11月8日,从广西海洋研究所竹林海水增养殖试验基地的5口中间培育方格星虫苗种的池塘采集水样,监测和分析中培过程中水温、盐度、溶解氧、pH值、化学需氧量、生化需氧量、氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮及溶解性磷酸盐等水环境因子。结果发现,5口池塘水环境因子的变化趋势基本一致,水温21.133-33．170℃、盐度23‰-31‰、溶解氧4．926-8．873mg／L、pH值7．910～9．487、化学需氧量1．067～3．999mg／L、生化需氧量1．6865．247mg／L、氨氮0．004-0．160mg／L、亚硝酸盐氮0．001～O．012mg／L、硝酸盐氮0．014-0．103mg／L、溶解性磷酸盐0．012-0．145mg／L,除了最大pH值超过渔业水质标准的规定外,其它环境因子基本符合规定。     

光裸方格星虫(Sipunculus nudus L.)生殖细胞及胚胎发育

１９９０年３月至１９９１年２月,每月采样１－２次,每次取３０条个体,在显微下观察雌雄生殖细胞的发育和形态特征。计数雌性个体腔卵细胞。１９９０年６月－７月取体重≥１３ｇ的个体。解剖取肾管中的精卵进行人工授精,观察胚胎发育进程。取部分担轮幼虫于１０Ｌ容器中培养,观察早期个体发育。     

方格星虫滩涂养殖对沉积物TOC和TN垂直分布的影响

为探讨方格星虫(Sipunculus nudus)滩涂养殖对沉积物环境的影响,采用滩涂围隔法研究方格星虫不同养殖密度(0、5、10、15、20 ind./m²)条件下围隔中沉积物总有机碳(TOC)和总氮(TN)含量的季节变化。结果显示,10 ind./m²养殖密度处理下的方格星虫成活率和规格最高,分别为(61.1±36.1)%和(5.21±0.69) g/ind.,但不同处理间差异不显著(P>0.05)。方格星虫不同密度养殖过程中,滩涂沉积物的TOC含量基本呈随着深度的增加而升高的趋势,且不同深度间TOC含量存在显著差异(P<0.05);而TN含量垂直分布比较均匀,说明方格星虫生物扰动会导致有机质向下层迁移。整体上来看,所有养殖密度处理围隔中滩涂沉积物TOC和TN平均含量分别呈现“V”型和“∧”型的季节变化规律。15 ind./m²和20 ind./m²养殖密度处理围隔中滩涂沉积物TOC的全年平均含量低于空白对照;所有养殖密度处理围隔中滩涂沉积物TN的全年平均含量均高于空白对照。研究结果...     

低氧胁迫对光棘球海胆Mesocentrotus nudus致死性及生理机能的影响

全球近海底层水体低氧现象日趋频繁，严重影响到海洋生态系统的稳定性。为掌握光棘球海胆Mesocentrotus nudus对低氧胁迫的耐受能力，通过室内生态模拟实验，分析3种规格的光棘球海胆，即大规格海胆平均体质量(91.41±3.31) g、中规格(60.79±3.42) g和小规格(4.15±0.18) g，在3个溶解氧(Dissolved Oxygen，DO)浓度水平(0.5 mg/L、2.0 mg/L、3.0 mg/L)胁迫下的行为、存活、半致死时间(Median Lethal Time，LT₅₀)以及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)活力。结果表明，在DO 0.5 mg/L和DO 2.0 mg/L低氧胁迫下，海胆行为表现异常，低氧初期海胆表现为管足活力下降、吸附力降低，移动能力变弱，同时伴随棘脱落，随着低氧暴露时间延长，海胆各项活动能力进一步减弱，直至死亡；在DO 3.0 mg/L胁迫下，中、大规格海胆无死亡现象。3种规格海胆死亡率随低氧暴露时间延长都有所增加，其中在DO 0.5 mg/L胁迫下，3种规格海胆的最终死亡率都达到100%，但在DO 2.0 mg/L胁迫下，随低氧胁迫时间的延长，3种规格海胆都对低氧胁迫表现出不同程度的适应，很少死亡。3种规格海胆的LT₅₀在DO 0.5 mg/L和DO 2.0 mg/L两种低氧胁迫水平下存在差异，DO 0.5 mg/L胁迫下，大规格海胆的LT₅₀为70.50 h，中规格为34.64 h，小规格为34.02 h；DO 2.0 mg/L胁迫下，中规格海胆的LT₅₀延长至120.88 h，小规格海胆延长至107.15 h。此外，中规格海胆在两种低氧胁迫水平下，体内的超氧化物歧化酶活力均发生了明显变化，说明低氧胁迫已影响到光棘球海胆的抗氧化系统。本研究初次掌握了光棘球海胆在不同环境低氧胁迫下的生存和低氧适应情况，可为低氧海域光棘球海胆种群维持以及海胆养殖业的健康发展提供参考。