橄榄苦苷对三氧化二砷致神经毒性的保护作用

目的:研究橄榄苦苷对三氧化二砷(As_2O_3)致神经毒性的保护作用.方法:将昆明小鼠随机分成正常对照组、模型组和橄榄苦苷组,采用灌胃4 mg/kg As_2O_3建立动物损伤模型,比较As_2O_3单用及与橄榄苦苷联用对大脑组织部分神经递质基因表达谱的影响来评价橄榄苦苷对As_2O_3致神经毒性的减毒作用.结果:与正常对照组比较,模型组小鼠大脑组织的基因Chat、Chrm1、Th、Dbh、Aldh7a1、Tph1、Sdha、Pck1、Drd3、Drd4、Htr1d、Htr5b、Adra1a、Adra2a、Adra2b、Adrb3、Grin2d和Gria2的表达均下调,基因Drd1a、Htr1f、Htr4、Htr7和Grin3b的表达上调.橄榄苦苷干预后,As_2O_3致小鼠的神经毒性明显减轻,大脑组织乙酰胆碱、单胺类和氨基酸类神经递质代谢酶基因及各神经递质受体基因的表达水平与正常组差异不显著.结论:橄榄苦苷可降低As_2O_3对小鼠神经系统的毒性,其机制与影响大脑组织神经递质基因的表达有关.     

达乌尔黄鼠(Spermophilus dauricus)冬眠启动过程中枢生长抑素信号对HPA轴的抑制

生长抑素作为一种具有广泛抑制性作用的多肽类激素,对多种激素及机体功能均具有抑制作用。为探索冬眠动物冬眠启动过程中枢生长抑素信号系统的变化及其影响,实验选择典型的贮脂类冬眠动物达乌尔黄鼠为研究对象,按照其状态分为快速育肥期、育肥完成期、冬眠期3个时期,分析下丘脑-垂体-肾上腺轴及生长抑素信号在冬眠启动过程中的变化。采用免疫组织化学法检测下丘脑生长抑素神经元平均光密度及垂体促肾上腺皮质激素水平和生长抑素受体2的表达,采用放射性免疫法检测血清皮质醇的浓度及测定肾上腺质量。结果显示：冬眠启动过程中下丘脑生长抑素神经元平均光密度无显著变化,垂体生长抑素受体2的表达量在育肥完成期最高,显著高于冬眠期和快速育肥期;垂体促肾上腺皮质激素和血清皮质醇浓度变化趋势相同,从育肥完成期到冬眠期呈下降趋势,且冬眠期显著降低;育肥完成期肾上腺质量显著下降。提示冬眠启动过程中下丘脑-垂体-肾上腺轴受到抑制,中枢生长抑素信号具有重要调节功能。     

下丘脑IL-6对大鼠心功能的调节作用

通过下丘脑促垂体区微量注射白细胞介素-6,记录左心室内压峰值(LVSP)、心率(HR)、瞬时上升速率峰值(dp/dtmax)和瞬时下降速率峰值(-dp/dtmax),探讨SD大鼠下丘脑IL-6对心功能活动的影响及其中枢机制.结果显示:与对照组相比,大鼠下丘脑微量注射IL-6能引起LVSP、HR、dp/dtmax、-dp/dtmax极显著升高(P<0.01),并具有时间效应.注射一氧化氮合酶抑制剂L-硝基精氨酸甲酯后对心功能无明显影响;预先注射L-NAME后再注射IL-6,与单独注射IL-6组无明显差异.与对照组相比,注射阿片肽受体拮抗剂纳洛酮引起LVSP显著下降(P<0.01),其他指标无明显变化.预先注射纳洛酮后能明显抑制IL-6所引起的LVSP、HR、dp/dtmax和-dp/dtmax升高效应(P<0.05,P<0.01).结果表明:下丘脑注射IL-6引起心功能增强效应与一氧化氮通路无关,而是经内源性阿片肽通路介导.     

抑郁症发病的下丘脑中枢驱动调节机制

本课题组的研究发现,抑郁症病人下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)神经元上雌激素和雄激素受体表达增加,性激素与CRH神经元上的性激素受体结合,作用于CRH启动子上的性激素反应单元调节CRH的转录活性,雌激素可增加CRH的表达而雄激素可抑制CRH的活性.除性激素受体外,抑郁症病人下丘脑内调控CRH神经元活性的许多其他受体也表现为平衡紊乱.靶向于糖皮质激素和性激素受体的药物可能通过作用于海马不同区域的神经元,调控抑郁症动物的相关行为.根据上述发现,我们提出抑郁症发病的多受体平衡紊乱假说.     

不同穴位处方电针对失眠大鼠下丘脑IL-1β、TNF-α及IL-6的影响

目的: 观察不同穴位处方电针对失眠大鼠下丘脑白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)质量浓度的影响,探讨电针治疗失眠症的作用机理.方法:将SD大鼠36只随机分为6组,即对照组、模型组、安定组、电针1组(取百会、神道、心俞穴)、电针2组(取三阴交、神门穴)、电针3组(取申脉、照海穴),模型组以腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立大鼠失眠模型,安定组给予腹腔注射安定,电针各组分别按穴位给予电针治疗,每组连续治疗6 d后检测大鼠下丘脑细胞因子IL-1β、TNF-α及IL-6的变化.结果:电针各组IL-1β、TNF-α和IL-6明显升高,与模型组和安定组比较差异显著(P<0.05,P<0.01);电针各组之间比较,电针2组好于电针1组(P<0.05),电针3组与电针1组、电针2组比较均无显著性差异(P>0.05).结论:电针可能是通过提高失眠大鼠下丘脑细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的质量浓度而改善睡眠;电针2组作用好于电针1组,说明取三阴交、神门穴治疗失眠症疗效更好.     

经水摄入三氯乙烯对BALB/c小鼠干扰素-γ和白细胞介素-4的影响

探讨经水摄入三氯乙烯(TCE)对BALB/c小鼠的干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的影响。将60只BALB/c雌性小鼠随机分为3组:空白对照组、溶剂对照组和TCE染毒组,每组20只,TCE染毒组经饮水摄入2.5g/L TCE,染毒2、4、8、12周,每组各处死5只小鼠,取其外周血和脾脏。利用免疫组化法检测脾脏组织中IFN-γ和IL-4的表达,ELISA法检测外周血血清中IFN-γ和IL-4的含量。与空白对照组和溶剂对照组相比,TCE染毒组小鼠脾脏与血液中IFN-γ和IL-4的表达明显上升,IFN-γ/IL-4比例明显下降,且差异有统计学意义。经水摄入TCE能够同时上调小鼠体内IFN-γ和IL-4的表达,进而可能上调Th1和Th2细胞免疫应答,而Th2细胞上调更占优势,故Th1/Th2比例下降。     

利用噬菌体肽库筛选小肽免疫抑制剂

利用MT-2细胞系特异性表达白细胞介素2受体α(IL-2R α)在细胞表面,作为靶蛋白在噬菌体六肽库中筛选,经过4轮筛选得到能特异性结合IL-2R α的配体,挑选出与IL-2R α亲和性高的21个噬菌体克隆,经过DNA测序,得到3组肽序列,其中2组序列分别与白细胞介素2(IL-2)的N端17-24(LLLDLQMI)序列和C端114-121(IVEFLNRW)序列相似,另外一组与IL-2R β和γ有共同的保守序列(WSXWS)相似.因此推测这些筛选到的序列可能模拟IL-2与受体α相互作用的位点和IL-2R β,γ与α结合的位点.根据筛选结果,进一步合成了一个九肽AIVEFLNRW,以ConA诱导的淋巴细胞转化实验为模型,观察到这个肽在终浓度≥31.3μg/mL时抑制效果明显.     

烟气中As_2O_3的氧化脱除试验

以芬顿(Fenton)溶液作为吸收剂,在自制的小型鼓泡反应器内,进行了Fenton氧化法脱除气态As_2O_3的试验,考察了反应温度和模拟烟气成分等因素对烟气中As_2O_3脱除效率的影响。研究结果表明:在H_2O_2浓度为0.2 mol/L、Fe~(2+)浓度为5 mmol/L、Fenton吸收液初始pH值为5.5、反应温度为50℃时,烟气中As_2O_3的脱除效率可达100%。模拟烟气中SO_2和NO质量浓度、O_2和CO_2质量分数等因素对As_2O_3脱除效率影响显著。同时,采用高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法,对液相离子产物进行了定性与定量检测,得到As_2O_3脱除产物主要为As(V)。     

细胞因子IL-17E、IL-17F及其受体在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞因子白细胞介素17E(IL-17E)及其受体白细胞介素17RB(IL-17RB)、细胞因子白细胞介素17F(IL-17F)及其受体白介素17RC(IL-17RC)在正常前列腺组织(normal prostate,NP)、良性前列腺增生组织(benign prostatic hyperplasia,BPH)和前列腺癌(prostate cancer,Pca)组织中的表达差异.方法利用免疫组织化学染色法检测了6例NP、39例BPH和20例Pca标本中IL-17E、IL-17RB、IL-17F和IL-17RC阳性表达率,并分析配体与相应受体阳性表达率的相关性,配体阳性表达率与前列腺癌恶性程度的关系.结果在前列腺组织中,IL-17E、IL-17RB、IL-17F和IL-17RC主要表达于腺上皮细胞以及单个核细胞,少部分表达于血管内皮细胞及部分癌细胞.与BPH和NP比较,在Pca组织中,IL-17E表达明显降低,差异具有统计学意义(P0.05),且随着前列腺癌Gleason分级增加,IL-17E的表达降低;与NP比较,IL-17RB在Pca中表达增加,差异具有统计学意义(P0.01);与BPH和NP比较,IL-17F在Pca组织中表达明显增加,差异具有统计学意义(P0.05),随着前列腺癌Gleason分级的增加,IL-17F表达增强;与BPH和NP比较,IL-17RC在Pca中表达也增加,差异具有统计学意义(P0.05,P0.01);在Pca组织中,IL-17F与IL-17RC表达呈正相关性(r=0.633,P=0.021).结论 IL-17F可能具有促进前列腺癌发生发展的效应,而且主要是通过IL-17F—IL-17RC信号通路的激活实现的.     

RDP-p53融合蛋白对小鼠炎症细胞因子的影响

研究不同剂量RDP-p53融合蛋白对小鼠炎症细胞因子的影响。通过大肠杆菌Rosetta表达蛋白并纯化,SDS-PAGE确定RDP-p53融合蛋白准确性。同时,将昆明小鼠分为空白对照组和RDP-p53融合蛋白高、中、低剂量组,经腹腔注射给药,摘眼球取血,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。RDP-p53融合蛋白在上清和沉淀中均获得表达。ELISA测定结果表明,与对照组比较,低、中剂量组小鼠血清炎症因子水平没有明显变化(P0.05),高剂量组的IL-1β和TNF-α含量显著升高(P0.05)。成功制备RDP-P53融合蛋白,并为进一步研究RDP-p53融合蛋白抗神经胶质瘤药理作用时给药剂量的确定提供了实验依据。     

二种中药复方对慢性心理应激大鼠行为及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的：观察半夏厚朴汤、桂枝甘草龙骨牡蛎汤对慢性心理应激大鼠行为及下丘脑一垂体一肾上腺轴的影响。方法：将SD大鼠分为5组：正常组、模型Ⅰ组（慢性心理应激模型,不灌服生理盐水）、模型Ⅱ组（慢性心理应激模型,灌服生理盐水）、半夏厚朴汤组（灌服半夏厚朴汤水煎浓缩液）、桂枝甘草龙骨牡蛎汤组（灌服桂枝甘草龙骨牡蛎汤水煎浓缩液）,连续灌服19d测试各组大鼠行为、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）及血清皮质酮（CORT）。结果：半夏厚朴汤组大鼠第11、19d爬格次数增加,第11d挣扎次数增加,CRH、ACTH降低;桂枝甘草龙骨牡蛎汤组大鼠第19d爬格次数增加,第19d静止时间缩短,CRH、ACTH降低。结论：半夏厚朴汤、桂枝甘草龙骨牡蛎汤可作用于下丘脑-垂体-肾上腺轴的不同环节,一定程度上影响慢性应激大鼠的行为方式,调节慢性应激大鼠的内分泌功能。     

鱼类白细胞介素-1β研究进展

白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)是一种有效的促炎细胞因子,参与细胞增殖、分化和凋亡等多种生命活动.在鱼类中,IL-1β基因已被广泛克隆和鉴定.鱼类与哺乳动物的IL-1β之间存在许多相似特征,在免疫调节过程中发挥着重要的功能.对IL-1β的进化研究能够揭示I L-1家族的起源和进化历程,有助于...     

白细胞介素23基因沉默对支气管哮喘小鼠的影响

目的观察白细胞介素23(IL-23)基因沉默对肺组织IL-23蛋白表达、哮喘鼠气道炎症和支气管肺泡灌洗液(BALF)中干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-5(IL-5)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平的影响.方法构建siRNA IL-23表达载体并通过脂质体转染获得高浓度的含有siRNA IL-23的浓缩液,RT-PCR和WB法检测IL-23mRNA及IL-23蛋白表达水平,确定转染成功.通过滴鼻方式吸入到卵蛋白(OVA)致敏的小鼠体内,观察其对BALF中炎症细胞的影响;ELISA方法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子IFN-γ,IL-5,TNF-α,ICAM-1的变化;HE染色观察肺组织病理学改变;WB法检测肺组织中IL-23蛋白表达.结果与对照组相比,模型组及空质粒组BALF中IL-5,TNF-α,ICAM-1水平升高,IFN-γ水平下降,肺组织中IL-23蛋白表达量升高(P0.01),沉默组上述各项指标明显下降,IFN-γ水平升高(P0.01);病理学检测结果表明:与对照组相比,模型组和空质粒组气道内有大量炎性细胞浸润,沉默组炎症受到抑制(P0.01).结论 IL-23在哮喘发病中起重要作用,阻断其基因表达可以明显改变哮喘症状.     

CRH在大鼠脑内不同区域表达的研究

目的:探讨促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)免疫阳性神经元在大鼠脑内不同部位的分布及其特征。方法:用免疫组织化学方法,采用ABC法并通过硫酸镍铵加强呈色和荧光免疫法,在光镜和激光共聚焦显微镜水平观察SD雄性大鼠CRH免疫阳性神经元在大鼠脑内不同部位的表达。结果:CRH神经元多为非锥体形神经元,细胞直径为10~15μm,在胞浆和轴突表达;大鼠的下丘脑室旁核、杏仁核、大脑皮质的前额叶部和其他部分都有分布;在下丘脑室旁核和杏仁核内呈簇团分布,大脑皮质内的Ⅰ~Ⅵ层均有分布,其中Ⅱ、Ⅲ层相对较多,Ⅰ层次之,Ⅳ、Ⅴ层较少,Ⅵ层偶见。结论:大鼠脑内广泛区域分布着CRH神经元,其对应激过程机体的自主神经和情绪行为反应的调节是否仅仅通过下丘脑-垂体-肾上腺轴实现,值得进一步研究和关注。     

白细胞介素-32与广西肝癌高发地区肝癌家族聚集性的相关性（英文）

目的:探讨广西肝癌高发区白细胞介素-32 (IL-32)和肝癌家族聚集性的关系.方法:在广西肝癌高发地区选取115例肝癌高发家族成员为肝癌高发家族组,115例无癌家族成员为无癌家族组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定研究对象血清IL-32水平.从两组研究对象的血清IL-32总体水平及不同人口学特征(民族、HBsAg携带情况、性别、年龄等)层面比较IL-32的表达差异,分析IL-32表达与广西肝癌高发地区肝癌家族聚集性的关系.结果:肝癌高发家族组血清总体IL-32表达水平高于无癌家族组(Z=-2.702,P=0.007),肝癌高发家族组男性、HbsAg阴性、年龄≤25岁、瑶族成员IL-32表达水平均高于无癌家族组(均P0.05),肝癌高发家族组中,不同等级亲缘关系的成员IL-32表达无统计学差异(P=0.429),具有不同肝癌先证者例数的肝癌高发家族成员IL-32表达差别不明显(P=0.298).男性成员的肝癌罹患率远远大于女性成员.结论:肝癌高发家族成员IL-32表达水平升高与肝癌家族聚集性存在一定的相关性,其过度表达增加了罹患肝癌的易感性.     

单增李斯特菌致流产小鼠子宫中Th1和Th2细胞因子的变化

为探讨Th1和Th2细胞因子在单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)致小鼠流产中的作用,用LM感染妊娠小鼠和小鼠巨噬细胞,统计胚胎存活率,酶联免疫测定(enzyme linked lmmuno sorbent assay,ELISA)小鼠子宫组织中和巨噬细胞培养基中主要的Th1和Th2细胞因子水平.结果显示,LM诱导的流产小鼠子宫中Th1细胞因子水平显著增加,溶血素O(listeriolysin O,LLO)基因缺陷型(Δ hly)LM感染组胚胎存活率和子宫中Th1、Th2细胞因子水平无显著变化;LM感染的巨噬细胞分泌的Th1细胞因子和白细胞介素-4(interleukin, IL-4)水平显著增加,IL-10水平显著降低,Δ hly LM感染组Th1和Th2细胞因子水平无显著变化.因此,LM感染后子宫中Th1/Th2细胞因子失衡诱导了小鼠流产,这可为临床防治LM诱导的流产提供科学依据.     

一种含精氨酸和抗氧化成分的胶囊对糖尿病小鼠糖脂代谢改善作用的研究

用含有精氨酸和多种抗氧化剂成分的纳欧胶囊溶液对小鼠进行灌胃,灌胃不同剂量的胶囊1个月后制备糖尿病小鼠模型.结果表明,纳欧胶囊能显著降低小鼠空腹血糖、糖耐量、总胆固醇、血清铁水平;下丘脑转铁蛋白受体1和铁蛋白表达无显著变化,肝脏转铁蛋白受体1表达呈下降趋势;糖尿病小鼠出现了胰岛素抵抗,纳欧胶囊对胰岛素抵抗指数无明显影响.纳欧胶囊对糖尿病小鼠具有辅助降血糖、降血脂及降低血清铁的作用,这可对临床上预防和治疗高血糖疾病提供动物实验数据和理论支持.     

羊痘病毒基因组中编码白细胞介素-18结合蛋白

从羊痘病毒基因组中寻找并扩增羊白细胞介素-18结合蛋白(IL-18BP)基因。将该基因克隆到表达载体PGEX-5X-3,在大肠杆菌BL21中实现了高效表达。目的蛋白以包涵体形式存在。表达产物经过变性、复性和层析纯化后,具有体外拮抗羊IL-18刺激外周血单核细胞产生IFN-γ的活性。     

维生素E对硫丹染毒小鼠脾细胞因子基因转录的影响

目的 为了探讨维生素E对硫丹染毒ICR小鼠脾细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）和γ-干扰素（1FN．γ）基因转录的影响,我们设计了该实验。方法将24只ICR小鼠随机分成对照组、硫丹染毒组（染毒组）和染毒同时给予维生素E（VE）组（实验组）,所用硫丹和维生素E的剂量分别是：0mg／（kg·d）和0mg／（kg·d）（对照组）、0．8mg／（kg·d）和0mg／（kg·d）（染毒组）和0．8m∥（kg·d）和100mg／（kg·d）（实验组）。灌胃21d后,取其脾,用Real—Time PCR法检测其脾脏IL-2、IL-6、IFN-1基因转录的变化。结果染毒组小鼠脾细胞因子IL-2和IL-6 mRNA水平与对照组相比明显升高,IFN-γ,mRNA水平虽有升高趋势,但无显著变化。实验组小鼠脾IL·2和IL-6 mRNA水平明显低于染毒组,IFN·-γ mRNA水平虽有降低趋势,但与染毒组相比无显著变化。结论上述结果说明,硫丹能促进小鼠脾脏细胞因子IL-2和IL-6的基因转录,但对IFN-γ基因转录没有显著影响;维生素E能缓解或部分缓解硫丹的作用。     

卵巢局部瘦素受体缺失对卵巢生殖功能影响的分子机制

为探索卵巢局部瘦素信号缺失对卵巢自身功能的影响,进行以下研究:①对瘦素长受体(LR)缺失(LR-)的雌性B6.Cg-m+/+Leprdb小鼠及其同窝出生的有完整LR的雌性野生型C57BL/6J小鼠(LR+)进行卵巢交互移植,在同一雌性野生型C57BL/6J小鼠体内构建两侧卵巢不同的LR基因型,分别标记为KO(卵巢LR-)、WT(卵巢LR+)两组.②监测卵巢的周期变化;动情周期恢复后各组均予GnRH-a降调节后取材,RT-PCR检测分子生物学指标.结果显示:①卵巢移植术后小鼠仍有正常的动情周期,经GnRH-a降调节后,小鼠失去动情周期的变化;②RT-PCR结果显示,KO组卵巢中Star、Cyp17、Cyp19、Jak2、Star3、Pias3 mR-NA的表达量均明显低于、WT组,Ob-Rb mRNA在KO组卵巢中无表达,WT组有表达,Socs3 mRNA在两组间表达无明显差异.研究表明,卵巢内存在完整的瘦素信号传导通路;瘦素受体缺失及外周糖脂代谢环境对卵巢功能的影响并不重要,重要的是下丘脑-垂体对卵巢的调控作用,其对卵巢作用的分子机制是调控卵巢甾体激素合成酶基因的表达.