蛇足石杉中石杉碱甲含量测定及其时空动态

采用 HPLC 法首次测定江西庐山和井冈山蛇足石杉不同时期、不同组织部位中石杉碱甲（HupA）的含量.结果表明,蛇足石杉中 HupA 含量随着季节的推移逐渐增加,庐山和井冈山蛇足石杉植株 HupA含量均在每年12月达到最高,分别为211.9μg·g -1和325.9μg·g -1.蛇足石杉中不同组织部位 HupA含量各不相同,茎部和叶部 HupA 含量较高,且表现出相同的变化趋势,根部含量较少.本研究揭示了蛇足石杉中 HupA 含量的时空动态变化规律,从而为合理利用该稀缺植物资源提供科学参考.     

珍稀濒危药材蛇足石杉的研究概况及开发前景

蛇足石杉中有较高含量的石杉碱甲,对治疗老年痴呆症和提高记忆力有显著疗效,备受国内外学者们的关注.系统总结了近年来国内外学者对蛇足石杉的相关研究成果,旨在为蛇足石杉资源保护与可持续利用、开展蛇足石杉繁殖技术的研究,为解决蛇足石杉原料生产的瓶颈提供理论依据.     

石杉碱甲的含量测定方法及在蛇足石杉不同产地居群中的含量比较

采用Waters 1525-2487高效液相色谱仪,测定了产自浙江遂昌大西坑、遂昌九龙山、磐安大盘山、庆元百山祖、临安西天目山、金华南山、金华北山和福建武夷山等8个产地居群蛇足石杉(茎叶)中石杉碱甲的含量.结果发现,磐安大盘山居群蛇足石杉的石杉碱甲含量最高,百山祖和天目山居群的含量最低.因此,人工栽培时可以考虑以磐安大盘山产的蛇足石杉作为种源,并注意以该居群生长环境条件作为栽培的参数.     

不同色光对蛇足石杉离体叶状体产HupA及内源激素水平的影响

为探究不同色光对蛇足石杉离体叶状体生长和石杉碱甲(Hup A)累积的作用,设置了二极管白光(W)、二极管蓝光(B)、二极管红光(R) 3种不同色光处理,以普通荧光灯(CK)为对照,研究不同色光下叶状体生长和Hup A累积的差异及其与IAA、ZT、ABA、GA几种内源激素水平的关系.结果表明:红光处理对蛇足石杉离体叶状体生长繁殖有促进效果,但对Hup A含量累积有极显著的抑制作用;蓝光相较CK提高了叶状体的生长量和Hup A的含量,其叶状体Hup A生产率最高达1 811. 728μg·L~(-1),较CK提高了49. 67%;蓝光处理的叶状体IAA/ZT值、ABA含量、ABA/ZT值、ABA/IAA值在全生育期均高于CK.依据不同类型激素功能,该研究结果说明:蓝光培养的叶状体中存在高水平的生长型激素IAA/ZT,促进其生长,增加了生物量,且其体内成熟型激素ABA的高水平存在,促进了次级代谢产物Hup A累积增加.     

药用植物蛇足石杉的生物学特性

首次较系统地报道了蛇足石杉的生物学特性,包括其外部形态、内部结构、孢子囊和孢子形态、菌根、生活史、生长特性、地理分布、生态学和群落学特性等     

蛇足石杉的组织培养初探

针对蛇足石杉资源分散,资源更新周期长,难以大规模开采的情况,初步探讨了蛇足石杉的组织培养技术.以蛇足石杉茎尖为外植体,分别在1/2MS+0.05 μmol/L IBA+1.4 μmol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺、MS+0.05 μmol/L IBA+1.4 μmol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺、1/2MS+2 mg/L谷氨酰胺/无激素、MS+2 mg/L谷氨酰胺/无激素等4种培养基中培养.结果显示:较为适宜的初代培养基为2号培养基,即MS+0.05 μmol/L IBA+1.4μ mol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺.在组织培养工作中,污染问题比较严重,本实验中,采用了以下2种方法对外植体进行消毒：（1）70%酒精浸泡1 min→5% NaOCl浸泡1 min→7%H₂O₂浸泡10 min;（2）0.1%升汞液灭菌3’ →无菌水冲洗5次.结果显示第2种方法比较理想.     

蛇足石杉内生真菌的分离与鉴定

从健康蛇足石杉的茎中分离内生真菌,用PDA培养基分离纯化菌株,对照真菌鉴定手册,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率以及菌丝体和孢子的形态特征进行鉴定。从蛇足石杉的茎中分离出5株内生真菌,经鉴定它们分别属于链格孢霉属、镰刀菌属、无孢类群和青霉属。     

蛇足石杉内生菌的分离与鉴定

从蛇足石杉的培养组织中分离内生真菌,利用传统方法,观察菌落的外观形态,对照《真菌鉴定手册》对其进行鉴定.通过马铃薯培养基（PDA）培养菌体,通过三点接种、分区划线的方法进行分离纯化,利用显微摄影的技术进行形态观察和鉴定.从蛇足石杉的茎尖培养组织中分离出7株内生真菌,经鉴定它们分别属于盘菌属、镶孢霉属、瓶梗青霉属、青霉属、沙卡氏属、曲霉属.     

蛇足石杉内生真菌 TL 的分离鉴定与药敏研究

从蛇足石杉植株中分离出内生真菌,通过马铃薯培养基（PDA）培养菌株,利用三点接种法分离纯化,筛选出一株优势菌株TL作为供试菌株通过菌落形态和培养特性观察以及显微摄影技术进行形态观察,对照《真菌鉴定手册》,经鉴定为半知菌亚门( Amon imperfect fungi )丝孢纲（Hyphomycetes）丛梗孢科(Moniliaceae)单端孢属(Trichothecium Link ex Fries)通过单因素试验与正交试验相结合,最终发现对供试菌株具有最佳抑菌效果的药物浓度组合     

蛇足石杉内生真菌的分离和抗植物病原真菌活性

采用内生菌常规分离法对健康的蛇足石杉植株体内的内生真菌进行了分离和筛选.结果表明:从蛇足石杉的不同部位所分离到的内生真菌的数目有所不同,茎部最多,有100株;其次叶部73株;根部最少,仅7株.经初步鉴定,这180株菌分属于13属,即交链孢属(Alternaria)、头孢霉属(Cephalosporium)、球座菌属(Guignardia)、青霉属(Penicillium)、间座壳属(Diaporthe)、木霉属(Trichoderma)、茎点霉属(Phoma)、曲霉属(Aspergillus)、镰刀菌属(Fusarium)、轮枝孢属(Verticilliun)、组丝核菌属(Phacodium)、瓶梗青霉属(Paecilomyces)、刺盘孢属(Colletotrichum).采用抑制率法对所分离到的菌株稀释十倍的发酵液进行抗植物病原真菌实验,结果表明:部分菌株对病原菌有不同程度的抑制作用,其中对油菜菌核病菌抑制率达100%的有37株,对苹果炭疽病菌抑制率达100%的有27株.     

蛇足石杉外植体表面消毒及内生菌消除方法

为了获得蛇足石杉的无菌材料,使用双氧水、酒精、升汞等消毒剂对外植体进行表面消毒,使用混合抗菌溶液及不同温度的热水浴处理外植体以消除内生菌.结果表明:茎段经预处理后,用47 ℃热水浴处理1 h,再经70 %酒精处理30 s, 0.1 %升汞处理7 min后,能达到较好的表面消毒及内生菌消除的效果;孢子囊和茎尖经预处理后,再经过70%酒精处理30 s,0.1 %升汞处理4 min即可达到较好的表面消毒效果;消毒剂结合温度处理能降低内生菌的污染率;孢子囊和茎尖几乎不含内生菌,是可用于组织培养的较好的外植体.     

武陵山区蛇足石杉居群的分布与生境特征

采用田野调查法对分布于武陵山区蛇足石杉(Huperzia serrata)居群进行了较全面的研究,发现该种主要分布于原生常绿阔叶林、各种次生林及人工林下的荫湿生境,在群落中处于从属地位.分析了影响蛇足石杉分布的生物学因素,以及导致其濒危的主要原因,并提出相应的保护策略.     

蛇足石杉芽胞萌发及生长发育的影响因素

为研讨蛇足石杉芽胞萌发及生长发育的影响因素,试验分析了培养温度、培养基和光照强度以及赤霉素对蛇足石杉芽胞萌发及生长发育的影响.试验结果表明,蛇足石杉芽胞萌发最佳培养温度为(22±2)℃;最佳培养基为Moore,萌发率约82%,植株平均高度约14.620 mm;Knudson C培养基次之,萌发率约64%,植株平均高度约为5.158 mm;暗培养适宜芽胞萌发及不定根生长,萌发率高达92%,平均根长9.088mm,800 lx弱光照培养不定根生长缓慢,平均根长8.675 mm,1 600 lx光照对不定根的生长有一定的抑制作用;赤霉素对于芽胞萌发与生长有一定抑制作用.建立了蛇足石杉芽胞萌发培养体系,为进一步研究蛇足石杉生长发育、生理生化变化提供参考.