基因工程抗体研究进展及其临床应用

基因工程抗体是继多克隆抗体和单克隆抗体之后的第三代抗体.近年来随着生物工程技术的发展,许多基因工程抗体陆续问世,本文详细介绍了基因工程抗体的研究进展,概述了基因工程抗体在临床方面的明显优势和应用潜力.     

抗体技术研究进展(1):人源抗体技术

100年来,抗体的发现为人类疾病诊断、治疗和有害物质的分析检测发挥了巨大的作用.特别是1975年发明了单克隆抗体技术以及1986年发明基因工程抗体技术,为研制特异性高、大量均一并大量生产抗体成为了现实,也使嵌合抗体、全人源抗体造福人类并产生巨大的经济效益.为了克服鼠源性单抗可诱发人抗鼠抗体(HAMA),通过嵌合抗体、改构抗体、小分子抗体等技术和改良抗体与抗原结合的特异性,已成为抗体技术研究的主要发展方向,本文主要就抗体人源化及抗体分子小型化,抗体功能复合化两个部分的进展进行综述.     

噬菌体抗体库的构建

噬菌体抗体库技术是近年来非常活跃的一个研究领域,本文主要讨论噬菌体抗体库构建中一些关键的问题。     

噬菌体抗体库的构建

噬菌体抗体库技术是近年来非常活跃的一个研究领域．本文主要讨论噬菌体抗体库构建中一些关键的问题．     

57例不规则抗体干扰ABO血型鉴定分析

通过研究干扰血型鉴定的不规则抗体的特异性及类型,为正确的进行血型鉴定提供实验参考依据。2013年7月至2014年7月对22 558例患者进行血型及不规则抗体筛查检测,对因不规则抗体干扰血型鉴定患者进行抗体鉴定,明确抗体特异性及类型,并选择与抗体对应抗原阴性的红细胞制备反定型细胞进行血型鉴定,以排除干扰明确血型。结果:发现57名患者因MNS、Rh、Lewis、Duffy、P血型系统产生的不规则抗体干扰血型鉴定,其中抗-M最多,共37例,占64.91%,其次为抗-E和抗-e相关抗体,均为5例,分别占8.77%;抗-Lea3例,占5.26%;Ig G与Ig M类混合抗体37例,单纯Ig G类抗体14例,单纯Ig M类抗体6例。研究结果表明,Ig M和Ig G类不规则抗体均可干扰血型鉴定,以Ig M类为主。     

催化抗体及其在化学中的应用

对一类新的有机反应催化剂－催化抗体作了介绍。它能提高速率１０＾３－１０＾４倍。许多有机反应，甚至那些在一般条件下很难发生的反应都能被特定的抗体所催化，并可进行克量级合成。     

自身抗体伴同种抗体所致输血反应1例

患者吴某，女，６７岁，血型为Ａ型。一年前诊断为ＡＩＨＡ，曾输血２０００ｍｌ。１９９４年３月为行脾切除住院治疗。术前输血４００ｍｌ，在输血３００余毫升时，患者感到腰痛、寒战、恶心和烦燥不安等症状，体温升高到３９℃，出现血红蛋白尿。临床检验：血清总胆红素５７．６μｍｏｌ／Ｌ，尿潜血阳性，Ｈｂ５０ｇ／Ｌ，ＲＢＣ２．０×１０１２／Ｌ，临床确诊患者为溶血性输血反应。经我室血型血清室检查结果证实为自身抗体伴同种Ｒｈ系抗Ｅ抗体所致的溶血性输血反应。血型血清学检查：复查配血与交叉配血试验，患者血型为Ａ型；供血者…     

夹心ELISA检测新冠病毒及其抗原方法的建立和验证

研究制备了快速检测新冠病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）及其表面刺突糖蛋白受体结合域（receptor-binding domain,RBD）的ELISA试剂盒.该试剂盒由一对RBD单克隆抗体作为捕获抗体与检测抗体，其中检测抗体进行辣根过氧化物酶（HRP）偶联，通过方阵滴定法确定双抗夹心ELISA的最适工作条件.另外，对检测试剂盒进行线性、特异性、准确度、精密度等进行了验证.结果表明，双抗夹心ELISA方法中捕获抗体和酶标检测抗体的效价分别为1∶160 000和1∶320 000，试剂盒的定量检测下限为31 ng/mL.经验证，组装的试剂盒精密度为0.71%～1.59%，平均准确度为96.53%，与其他的同种属灭活病毒无交叉反应.试剂盒各项参数均符合《中国药典》（三部）2020版标准，表明该试剂盒适用于新冠病毒以及RBD抗原的快速检测.     

基因工程抗体与制备技术的研究及应用

介绍了天然抗体的分子结构,对基因工程抗体的发展过程进行了回顾,陈述了各种基因工程抗体的设计思路、方法的特点,并在此基础上分析了当前基因工程抗体在临床上的应用前景。     

高迁移组染色体蛋白-17的分离提取及其抗体ELISA测定方法的建立

纯化高迁移组染色体蛋白－１７（ＨＭＧ－１７）,建立检测抗ＨＭＧ－１７,自身抗体的ＥＬＩＳＡ方法,探讨抗ＨＭＧ－１７抗体与临床疾病的关系,用水煮沸法提取,甲酸－吡啶缓冲液酸化和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０凝胶过滤技术,自小牛胸腺组织中分离ＨＭＧ－１７,用此纯化物包被,方阵滴定,建立测定抗ＨＭＧ－１７抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法,并进行方法学考核和临床标本检测,纯化的ＨＭＧ－１７抗原经十二烷基硫酸钠－聚丙烯     

从噬菌体抗体库中淘选人绒毛膜促性腺激素的单链抗体

由鼠源噬菌体抗体库淘选到展示有人绒毛膜促性腺激素单链抗体的噬菌体克隆。用ELISA方法进行检测,从结合力最强的克隆中分离单链抗体基因,插入经改造的高效表达载体pET-21a(+)中,转化大肠杆菌,诱导表达。从培养基中可检测到可溶性抗人绒毛膜促性腺激素的单链抗体。     

基因重组抗体研究的现状与未来

一、抗体研究的历史19世纪后期,微生物学的发展推动了抗感染免疫的研究。1890年,德国学者贝林和日本学者北里发现白喉毒素免疫动物的血清中存在一种能中和毒素的物质,称之为抗毒素。随后人们又相继发现免疫血清中有溶菌素、凝集素等可特异结合相应细     

分离人杀伤细胞抑制受体NKAT2特异的单链抗体

目的：人自然杀伤细胞表面的抑制受体（ＫＩＲ），是与表达在其他细胞表面的相应ＨＬＡＩ类分子相互作用的。许多ＫＩＲ受体已被克隆，小部分量的单克隆抗体也已产生。然而为区分不同位点及其等位基因的产物，并精确阐明其功能，而要更多的研究试剂。本研究探讨用噬菌体抗体库，分离ＫＩＲ单链抗体（ｓｃＦｖ）的可行性。方法：ＮＫＡＴ２－ＩｇＧ１为一ＫＩＲ，与人ＩｇＧ１Ｆｃ以融合蛋白形成表达而获得。噬菌体抗体库为“Ｎｉｓｓ     

TGAb、TMAb与合并甲状腺结节的桥本病相关性研究

目的对合并甲状腺结节桥本病（HT）的血清学研究可有助于临床诊断,便于采用不同的治疗方案、合理的手术方式,以减少术后复发率、癌变率及过少腺体保留量可能造成甲状腺功能的严重不足.方法因甲状腺结节行甲状腺手术,术后病理诊断为HT合并甲状腺结节（甲状腺癌、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤）的患者病例为A组,非HT组为B组.对每组术前...     

抗磷脂综合征1例

1临床资料患者女性,32岁,困乏力,纳差1周发热2天,右眼失明1天,于1997年12月5日以发热待查急诊入院,既往史：系统性红斑狼疮,习惯性流产。患者自1995年开始出现全血关节疼痛,头颈部皮肤有时发生红斑。实验室检查,血沉明显增快,每小时35mmHg,血小板减少74×109／L,（正常血小板100－300x＋109／L）,类风湿因于（＋）,抗链‘“0”（＋）,血Y球旦白H．7阮（正常＜见仍）,1990年以来,先后发生习慢性流产5次,眼科检查：右眼视力无光团,左眼1．0,双眼险结膜苍白,泪器、球结膜、角膜、虹膜及屈光间质均正常,房水问辉（－）…     

鸡新城疫母源抗体的消长规律及其免疫效果研究

为探讨科学的鸡新城疫免疫程序,对1～28日龄的土杂肉鸡和罗曼蛋鸡进行新城疫母源抗体的检测,并对两种雏鸡接种新城疫冻干疫苗和油乳剂疫苗后的HI抗体水平进行了检测。结果表明,两种雏鸡的母源抗体水平在1日龄时均达最高值,然后逐渐下降;肉鸡11日龄后降低到5.2log2以下,蛋鸡28日龄后降低到4.3log2以下。分别对肉鸡在12日龄时进行首免,蛋鸡在11日龄时进行提前首免可获得较高的抗体水平,根据试验所用的免疫方案,可有效预防鸡新城疫的发生。     

HIV-1和HBV复合型DNA免疫的初步研究

近年的研究表明,在啮齿类和非人灵长类免疫带有编码病毒和细菌抗原基因的质粒ＤＮＡ可以激发体液和细胞免疫应答．在本实验中,将ＨＢＶ的Ｓ基因和ＨＩＶ－１的ｇｐ１６０基因以融合形式插入到载体ｐｃＤＮＡ３中,其能表达ＨＢｓＡｇ和ｇｐ１６０的融合蛋白,并将此质粒ＤＮＡ分别直接注射到Ｂａｌｂ／ｃ小鼠和Ｓｗｉｓ小鼠．三次免疫后,用ＥＬＩＳＡ的方法初步检测ＨＢｓＡｇ和ｇｐ１６０抗原特异的抗体免疫应答均为阳性．结果说明,带有ＨＢＶ和ＨＩＶ－１融合基因的质粒ＤＮＡ直接免疫小鼠后,均激发了小鼠产生相应的免疫应答反应,这个结果为研究和生产多价疫苗提供了新的思路     

鸡禽流感母源抗体的消长规律及其免疫效果研究

为探讨科学的鸡禽流感免疫程序,对1～28日龄的土杂肉鸡和罗曼蛋鸡进行禽流感母源抗体检测,以及对雏鸡接种禽流感油乳剂疫苗后的HI抗体水平变化进行了监测。结果表明,两种雏鸡的母源抗体水平在1日龄时均达最高值,然后逐渐下降;肉鸡11日龄后H5、H9抗体滴度分别降低到4.2log2和4.3log2以下;蛋鸡28日龄后H5、H9...     

抗HBsAg单链抗体的等电点测定和结构模拟

应用实验生物学和计算生物学方法对重组人源抗HBsAg单链抗体(HBscFv)的部分理化性质和空间结构进行分析．首先应用蛋白质分析软件包Antheprot预测HBscFv等电点，然后等电聚焦测定HBscFv等电点，在此基础上，用神经网络法预测HBscFv二级结构，然后用同源建模的方法，获得HBscFv三级结构．结果发现，HBscFv等电点理论值为8．51，实验值为7．3～8．1；PHDsec结果表明，HBscFv是一种全β蛋白质；三级结构建模表明，HBscFv的VH结构域由9个片层组成，VL结构域由8个片层组成；由于单链抗体的特殊性，三级结构建模无法给出VH与VL结构域之间进一步折叠后形成的结构。