农杆菌介导的八氢番茄红素合酶基因转入人参愈伤组织影响因素

以PSY为目的基因,应用根癌农杆菌介导法对人参愈伤组织进行遗传转化,从菌液浓度、侵染胞龄、侵染时间、共培养时间四方面优化了遗传转化体系。经PCR分析鉴定初步证明,外源基因PSY已整合到人参的基因组中。     

模拟失重对钙调蛋白基因表达与人参皂苷合成的影响

在利用回转器模拟失重的生物学效应试验中对人参细胞的钙调蛋白(CaM)基因表达与人参皂苷合成展开研究.结果显示回转处理不仅在初始阶段可以诱导CaM基因表达的提高,而且在处理人参细胞的18h之内,CaM基因表达还呈现波动性变化.说明了Ca 2+ 依赖信号转导系统在转导重力变化刺激信号过程中的复杂性.回转处理还可以诱导人参皂苷的合成与人参皂苷合成相关基因鲨烯合酶基因(squalene synthase gene,sqs)与鲨烯环氧酶基因(squalene epoxidase gene,sqe)的表达.Ca 2+ 螯合剂EGTA、质膜钙通道抑制剂LaCl 3 与细胞内膜钙通道抑制剂钌红(ruthenium red,RR)都可以抑制回转诱导的CaM基因、sqs与sqe的表达,以及提高人参皂苷的合成.这种相关性说明胞外Ca 2+ 的内流与胞内钙库的Ca 2+ 向外流入胞质中,对于回转诱导人参细胞内皂苷含量的升高都是必须的,CaM可能介导了回转诱导人参皂苷合成的模拟失重效应.CaM拮抗剂氯丙嗪(CPZ)与N-(6-aminohexyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide(W 7 )可以抑制回转诱导的人参皂苷合成,sqs与sqe的表达也显示了CaM的介导作用.     

西洋参组织培养及愈伤组织中人参皂苷Rg1和Rb1含量分析

用西洋参(Panax quinquefolium L.)根作为外植体进行愈伤组织诱导,通过不同的培养基和激素配比实验,发现2.0mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA适合西洋参愈伤组织的诱导,愈伤组织在MS 2.0mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA培养基上生长较快,而在NB 2.0mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA培养基上细胞培养物中人参皂苷Rg1和Rb1含量较高,分别占干重的1.40%和0.24%.     

冬虫夏草菌生物转化人参皂苷Rb1的研究

研究冬虫夏草菌对人参皂苷Rb1的生物转化性质。利用冬虫夏草菌对人参皂苷Rb1进行生物转化,根据薄层色谱和液质联用检测结果构建生物转化途径,并对转化后的代谢产物进行相对定量分析,阐明转化动力学趋势。冬虫夏草菌能够将人参皂苷Rb1转化为稀有皂苷F2,转化途径为Rb1→Rd→F2,其转化率约为70.16%。冬虫夏草菌可以相对特异性地将人参皂苷Rb1转化生成F2,转化效率高,过程稳定,可以为人参皂苷F2的大规模发酵生产奠定基础。     

微波提取人参中活性成分人参皂苷的研究

研究了应用微波提取西洋参干燥根中人参皂苷的最佳工艺.采用正交试验进行优化,分光光度法测定人参总皂苷的含量.结果表明,用微波提取人参皂苷的最佳工艺条件为:微波功率300 W,固液比1∶20,提取温度60℃,提取4次,每次提取3 m in.在此条件下,人参皂苷的提取得率高达5.53%.微波提取人参皂苷工艺具有得率高、时间短、能耗低、环保等优点.     

人参皂苷Rh2对糖尿病大鼠心肌氧化应激的影响

目的观察研究人参皂苷Rh2对糖尿病大鼠心肌损伤的改善作用,并初步探讨其对糖尿病大鼠心肌氧化应激的影响,为DCM的临床防治提供新的手段.方法通过形态观察、心功能测定以及应用生物试剂盒和ELISA方法,检测观察STZ诱发的DM大鼠血清和心肌组织,主要研究下列问题:1)人参皂苷Rh2对DM大鼠心肌的保护作用;2)人参皂苷Rh2对DM大鼠心肌损伤过程中氧化应激作用的影响.结果人参皂苷Rh2可降低血清及心肌组织MDA含量,降低心肌组织8-OHd G水平,提高血清和心肌组织抗氧化酶SOD,CAT和GSH-Px活性(P0.05).结论人参皂苷Rh2对DM大鼠心肌具有保护作用,其改善机制部分是通过清除大鼠心肌组织内ROS、提高抗氧化酶活性、降低大鼠体内氧化应激水平而实现的.     

人参根组织形态及其生理生化活性成分相关性研究

为了探讨人参根组织形态及其生理生化活性成分的相关性,利用番红-固绿双重染色观察人参组织形态,紫外分光光度法和ELISA等方法测定其代谢物含量和相关酶活力,并比较人参生物量的差异.结果表明园参比根重高于林下参,但其树脂道、周皮木栓层细胞和韧皮部裂隙却不如林下参发达,皂苷和丙酮酸含量及苹果酸脱氢酶(MDH)活力也低于林下参;林下参比根长与抗氧化相关代谢物含量及酶活力随年限增加而降低,但其树脂道、周皮木栓层细胞和韧皮部裂隙逐渐发达,皂苷、淀粉和丙酮酸含量及MDH活力均升高.而且随人参生长年限的增加,能量代谢逐渐增强,分泌组织(树脂道)和贮存组织(周皮木栓层细胞、韧皮部裂隙)趋于发达,使根逐年增粗增重;皂苷含量的变化与其周皮木栓层细胞和韧皮部裂隙的变化呈正相关性;抗氧化能力与周皮木栓层细胞的紧密性呈负相关.这均为利用人参形态来评价其质量提供了实验依据.     

RP-HPLC同时测定人参总皂苷粗提物中人参皂苷Re和Rh2

利用反相-高效液相色谱法(RP-HPLC)建立了快速测定人参皂苷Re和Rh2含量方法。色谱柱为Agilent Extend C18（4.6×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.05%乙酸梯度洗脱溶液,流速1.00 mL/min,波长203 nm,柱温30.0℃。人参皂苷Re和Rh2的线性范围分别为0.17~456.6 mg/L和6.00~449.4 mg/L;人参皂苷Re和人参皂苷Rh2的平均加标回收率分别为99.60%和99.78%。本方法快速、灵敏、准确性好,可用于测定人参和西洋参提取物中人参皂苷Re和人参皂苷Rh2的含量。     

根癌农杆菌介导的绿色荧光蛋白基因在水稻植株中的表达

将改良的绿色荧光蛋白（EGFP）基因插入到植物表达载体中,构建了ubi启动子驱动下的植物表达载体p13UEGFP．通过根癌农杆菌介导转化水稻的胚性愈伤组织,经潮霉素筛选,获得抗性愈伤组织和再生植株．对T2代植株进行PCR分析、激光共聚焦显微镜检测和RT—PCR分析,结果表明,绿色荧光蛋白基因已经在转基因植株中稳定表达．     

人参皂苷CK转化复合菌群的筛选及条件优化

目的引入协同关系的理念,利用TLC和HPLC法从人参栽培地土壤中筛选出高效转化人参皂苷CK的复合菌群R2A48.方法采用微生物转化法生产人参皂苷CK是目前的首选方法,而高效菌株的筛选是大量制备人参皂苷CK的首要条件.结果通过因子转化实验确定其最佳转化条件:初始p H为7.0,底物浓度为3%,转化温度为35℃,摇床转数为140 r/min,转化时间为14 d.结论本研究为目前只利用单一微生物转化人参皂苷CK的研究提供一个新的思路和途径,对微生物转化人参皂苷的生产具有重要意义.     

HPLC/UV法分析具有促进神经细胞生长作用的人参提取物(LFG)

人参提取物（LFG）具有显著的促进神经细胞生长的活性,为解析其活性的物质基础,利用HPLC-UV法分析了人参提取物的成分,结果表明LFG中含有多种多炔类化合物,而不含有常见的人参皂苷.     

野山人参和栽培人参的DALP指纹图谱

采用DALP分子标记技术寻找野山人参和栽培人参DNA之间的特异性差异．选取10个野山人参和5个栽培人参(包括一个移山参),通过改进微量人参DNA提取的方法和优化DALP—PCR实验体系,得到了人参的DALP指纹图谱．图谱显示,野山人参的遗传多样性远高于栽培人参,野山人参与栽培人参图谱存在差异,且各自存在一条特异性条带．结果表明,DALP分子标记技术可以用来进行野山人参和栽培人参的遗传差异研究．     

野山参与园参rDNA-ITS序列比较分析

目的比较野山参与园参rDNA-ITS序列差异,寻找其DNA分子鉴定方法.方法提取野山参与园参总DNA,扩增其ITS序列,运用Clustal X等软件比较分析野山参与园参ITS序列特征.结果野山参与园参经PCR扩增后分别获得700 bp和500 bp两条条带.其中对野山参和园参的700 bp条带测序分析后未发现差异位点,而二者的500 bp条带测序结果相似性仅为38%.结论该结果为野山参的鉴别提供了实验依据.     

微卫星标记在人参和西洋参鉴别中的应用

从GenBank中寻找含有简单重复序列(SSR)位点的人参DNA片段序列,设计SSR引物,挑选PCR扩增条带清晰的引物,对人参和西洋参进行PCR扩增及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,选择能够区别2个种的引物.共有来自8个SSR位点的9对引物能扩增出可区分人参和西洋参的特异性片段,其中7对SSR引物在西洋参中能稳定地扩增出特异性...     

尖孢镰刀菌对人参皂苷的动态响应机制

研究尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）与人参根部中皂苷质量比的关系, 为确定人参根部接种尖孢镰刀菌对人参皂苷质量比的影响, 利用高效液相色谱（HPLC）法监测3种人参皂苷Rb1,Re,Rg1的质量比在接种尖孢镰刀菌120 h内的变化. 结果表明： 尖孢镰刀菌侵染后, 人参皂苷Rb1的质量比升高, Re,Rg1的质量比未发生显著改变;人参皂苷Rb1对尖孢镰刀菌分生孢子有明显抑制作用, Rb1的质量浓度越大, 萌发率越低, 抑制率越高, Rg1和Re对尖孢镰刀菌孢子萌发几乎无抑制作用. 因此, Rb1可能是人参根部对抗尖孢镰刀菌产生的抗病化合物.     

人参果胶SB对免疫细胞因子分泌的双向调节作用

以人参中的重要活性成分——人参果胶为实验材料,研究分析了其对免疫细胞因子分泌的影响.结果表明,人参果胶SB对人单核细胞THP-1分泌细胞因子IL-8及对小鼠脾细胞分泌细胞因子IL-2均具有明显的双向调节作用,即低浓度的人参果胶促进免疫细胞因子的分泌,而高浓度的人参果胶却呈现抑制作用.从细胞免疫学的角度初步揭示了人参的双...     

吉林人参低聚肽抗疲劳作用

 为探讨吉林人参低聚肽对实验小鼠的抗疲劳作用,将336 只SPF 级雄性ICR 小鼠随机分为7 组,分别为空白对照组、乳清蛋白组(0.500 g/kg)及5 个吉林人参低聚肽剂量组(0.125、0.250、0.500、1.000、2.000 g/kg).连续灌胃30 d 后,进行负重游泳实验测定各组小鼠负重游泳力竭时间,采用全自动生化仪测定各组小鼠血清尿素氮含量和乳酸脱氢酶活力,采用紫外分光光度计法检测各组小鼠血乳酸水平,采用试剂盒检测各组小鼠肝糖原含量.各项指标中空白对照组与乳清蛋白组之间均无统计学差异;与乳清蛋白组相比,适当剂量的吉林人参低聚肽干预可提高小鼠运动耐力,延长负重游泳时间,降低运动后血乳酸和血尿素氮的含量,提高乳酸脱氢酶活性和肝糖原的含量.因此,吉林人参低聚肽具有缓解实验小鼠体力疲劳功能.     

人参生产专家系统的研究与应用

为提高人参产品质量和产量,利用人参生产知识、计算机和网络技术,研制开发了人参生产专家系统。该系统将数据库、人工智能、管理信息系统、决策支持系统、网络技术以及信息集成技术应用到人参生产领域,给传统的人参栽培管理注入了新的生机和活力,降低成本投入,减少环境污染,在吉林省靖宇西洋参集团、吉林省抚松参场、吉林省敦化市黄泥河参场等进行示范面积1 735 900 m2,增加收入4 963.6万元。     

人参三肽的序列分析

采用Sephadex LH₂₀色谱柱, 以体积分数10%的甲醇为流动相分离人参中具有增强记忆活性的肽类成分, 通过高效液相色谱系统将其纯化, 并用蛋白质测序仪分析其氨基酸序列. 结果表明,  所得序列为Gln-Thr-Ser的新三肽.