中药复方板蓝根颗粒抗柯萨奇B_4病毒作用的实验研究

采用中药复方板蓝根颗粒进行了体外抗柯萨奇病毒B4(CVB4)的研究,通过观察病毒引起的细胞病变效应(CPE)、MTT法检测细胞活性,作为考核药物抗病毒作用.结果表明:中药复方板蓝根颗粒对CVB4无直接灭活作用,但能抑制CVB4在Hep-2细胞内的的生物合成和阻止CVB4的吸附,其半数抑制浓度(IC50)分别为1129.00和1130.44μg/mL,治疗指数(TI)均为2.78.在100～1600μg/mL范围内复方板蓝根颗粒与CVB4抑制率呈明显的量效关系(P<0.01),在1600μg/mL时能抑制CVB4在Hep-2细胞内的增殖>50%.研究表明中药复方板蓝根颗粒能有效地抑制CVB4在Hep-2细胞中的增殖,其抗病毒作用发生在阻断病毒吸附细胞和抑制病毒进入细胞之后的复制增殖.     

野西瓜水溶性生物碱抑制HepG-2增殖作用

研究野西瓜生物碱的抗肿瘤作用.采用MTT实验观察野西瓜水溶性生物碱的体外抗肿瘤作用,采用流式细胞仪测定野西瓜水溶性生物碱对肿瘤细胞凋亡及细胞周期的影响. 10、50、100、150、200、300 μg/mL的野西瓜水溶性生物碱作用于HepG-2细胞72 h后均可不同程度的抑制HepG-2细胞的增殖,其中野西瓜水溶性生物碱IC50为171.5 μg/mL;作用48 h后出现凋亡形态;180 μg/mL、360 μg/mL的野西瓜水溶性生物碱作用48 h时出现细胞凋亡;周期分布发生改变.结果表明,野西瓜水溶性生物碱具有抗肿瘤作用.     

连花清瘟胶囊抗柯萨奇B_4病毒作用的实验研究

采用中药连花清瘟胶囊进行了体外抗柯萨奇病毒B4（CVB4）的研究.通过观察病毒引起的细胞病变效应（CPE）、MTT法检测细胞活性,作为考核药物抗病毒作用.结果表明：中药连花清瘟胶囊对CVB4有直接灭活作用,并能阻止CVB4的吸附细胞和抑制CVB4在Hep-2细胞内的的生物合成,其半数抑制浓度（IC50）分别为410.00,343.13和410.32μg/mL,治疗指数（TI）分别为2.67,3.20和2.66.其中抗病毒吸附作用最强（P〈0.01）.在100～1600μg/mL范围内连花清瘟胶囊与CVB4抑制率呈明显的量效关系（P〈0.05）,在500μg/mL时能抑制CVB4在Hep-2细胞内的增殖大于50%.研究表明中药连花清瘟胶囊能有效地抑制CVB4在Hep-2细胞中的增殖,其抗病毒作用表现为直接灭活病毒,阻断病毒吸附细胞和抑制病毒进入细胞之后的复制增殖.     

黒参粗多糖抑制人胃和肝癌细胞增殖作用的研究

目的:研究黒参粗多糖对肿瘤细胞SCG-7901和SMMC-7721的增殖抑制作用。方法:采用MTT法(噻唑蓝比色法),以人参粗多糖为阳性对照药物,在490nm波长,检测不同剂量的黒参粗多糖提取液,对肿瘤细胞抑制作用的OD值,考察提取液对肿瘤细胞的24h抑制作用。结果:黒参粗多糖对SGC-7901和SMMC-7721的IC50(半抑制浓度)分别为014475mg/mL和015789mg/mL,黒参粗多糖对肿瘤细胞SCG-7901和SMMC-7721的增殖具有明显的抑制作用,且具有量效关系。     

白凤菜总黄酮对肝癌HepG2细胞生长、增殖和凋亡的影响

研究了白凤菜(Gynura formosana Kitam.)总黄酮(TFG)对肝癌HepG2细胞的生长、增殖和凋亡的影响.噻唑兰(MTT)实验结果表明TFG对HepG2细胞体外增殖的抑制作用有浓度和时间依赖效应:处理24h后130和260μg/mL TFG实验组的HepG2细胞凋亡率均显著升高,分别达到(47.00±1.31)%和(76.39±1.39)%(p0.05);24h的半抑制质量浓度(IC50)为190.80μg/mL.实验组HepG2细胞周期阻滞在S期,细胞迁移率随TFG质量浓度的升高而下降,细胞内活性氧(ROS)水平最终显著下降至对照组的6.9%(p0.05),细胞中Bax表达量略微上调而Bcl-2表达量明显下调.综上,TFG抑制肝癌HepG2细胞增殖和诱导HepG2细胞凋亡的机制可能与下调细胞ROS水平、重构细胞内还原体系、上调促凋亡蛋白Bax以及下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达相关.     

野西瓜挥发油对人胃癌SGC-7901细胞的抑制

探讨野西瓜挥发油对人胃癌SGC-7901细胞生长的作用.采用MTT、SRB和肿瘤细胞集落形成能力实验观察野西瓜挥发油对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V和PI双染法检测野西瓜挥发油作用于SGC-7901细胞后细胞凋亡的形态特征.结果显示,野西瓜挥发油可抑制SGC-7901细胞的生长,MTT与SRB法测得其IC50为145.5μg/mL,GI50为121.32μg/mL,LC50为900.96μg/mL,TGI为240.55μg/mL;野西瓜挥发油对SGC-7901细胞集落形成的IC50为160.04μg/mL.Annexin V/PI双染激光共聚焦显微镜观察到75、150、300μg/mL的野西瓜挥发油可诱导SGC-7901细胞出现凋亡早、中、晚期的细胞形态.提示野西瓜挥发油具有明显的抗肿瘤作用,其抑瘤机制可能为诱导肿瘤细胞凋亡.     

核桃楸皮甲醇提取液对SMMC-7721和SCG-7901抑制作用研究

目的：研究核桃楸皮的甲醇提取液对肿瘤细胞SMMC-7721（人肝癌）和SCG-7901（人胃癌）的增殖抑制作用。方法：MTT（噻唑蓝比色法）和紫外分光光度法相结合,以5-Fu（五氟尿嘧啶）为阳性对照药物,在560nm波长,紫外分光光度计,检测不同剂量的核桃楸甲醇提取液,对肿瘤细胞抑制作用的OD值,考察甲醇提取液对肿瘤细胞的24h抑制作用。结果：SMMC-7721,IC50=0.09977mg/mL;SCG-7901,IC50=0.12656mg/mL。     

龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的观察

观察龙葵碱对3种消化系统肿瘤细胞株人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞SGC-7901、人大肠癌细胞Ls-174的细胞毒作用.并从细胞凋亡角度揭示龙葵碱对敏感细胞株的作用机制.采用MTT法观察龙葵碱对3种肿瘤细胞株的细胞毒作用;采用AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微术(confocal)观察龙葵碱对HepG2肿瘤细胞形态的影响;PI单染,流式细胞仪测定龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响.龙葵碱作用于HepG2、SGC-7901、LS-174的IC50分别为14.47μg/mL、(50μg/mL、(50μg/mL;在形态学观察实验中,阴性对照组细胞形态正常,0.003 2μg/mL、0.016μg/mL龙葵碱使细胞外周呈微弱皱缩状改变,0.08、0.4、2μg/mL龙葵碱使HepG2细胞出现大量碎片及凋亡小体等典型的细胞凋亡形态.凋亡率测定结果表明5个剂量龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡率分别为6.0%、14.4%、17.3%、18.9%、32.2%,0.08μg/mL喜树碱诱导HepG2细胞的凋亡率为21.9%.细胞周期观察发现龙葵碱各组G2/M期均消失,S期明显升高.龙葵碱对HepG2人肝癌细胞株比较敏感,能够诱导HepG2细胞凋亡,并将HepG2细胞阻止在S期,影响肿瘤细胞DNA合成.     

中药大黄抗柯萨奇病毒作用的实验研究

采用大黄1～4#有效提取部位进行了体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的研究.通过观察病毒引起的细胞病变效应(CPE)、MTT法检测细胞活性,作为考核药物抗病毒作用.结果表明:大黄1～4#有效提取部位对CVB3无直接灭活作用,也不能阻止CVB3的吸附,而能抑制CVB3在Hep-2细胞内的的生物合成,其半数抑制浓度(IC50)分别为34.7、33.0、33.9、34.3 mg/L,治疗指数(TI)分别为7.2、7.6、7.6、7.2.与病毒唑(IC50=30.6 mg/L,TI=6.6,P＞0.01)相当,优于大黄提取液(IC50=48.5 mg/L,TI=4.7,P＜0.01).在2.5～120 mg/L范围内1～4#部位与CVB3抑制率呈明显的量效关系(P＜0.01),120 mg/L时能完全抑制CVB3在Hep-2细胞内的增殖.所以大黄1～4#有效提取部位安全高效地抑制CVB3在Hep-2细胞中的增殖.     

野西瓜挥发油抑制人肝癌HepG-2细胞增殖作用

探讨野西瓜挥发油对人肝癌HepG-2细胞生长的作用.采用MTT和SRB法观察野西瓜挥发油对HepG-2细胞增殖的抑制作用;FITC-Annexin V/PI双染流式细胞仪检测野西瓜挥发油作用于HepG-2细胞后细胞凋亡的形态特征.结果显示,野西瓜挥发油对HepG-2细胞生长具有明显的抑制作用,并且有剂量依赖性,MTT与SRB法测得其IC50为127.5μg/mL,GI50为131.98μg/mL,LC50为168.24μg/mL,TGI为301.91μg/mL;Annexin V/PI双染发现随着野西瓜挥发油剂量的增加,HepG-2细胞中活细胞数减少,早期凋亡细胞数增加,300μg/mL的挥发油作用于HepG-2细胞24 h后出现13.7%的早期凋亡细胞.提示野西瓜挥发油具有明显的抗肿瘤作用,其抑瘤机制可能为诱导肿瘤细胞凋亡.     

白果提取物抗肿瘤作用的研究

为研究白果是否具有抗肿瘤作用,实验通过体外培养肝癌BEL7402细胞和胰腺癌PANC-1细胞,采用5-氟尿嘧啶(5-Fu)作为阳性对照药,评价白果提取物不同组分对肿瘤细胞生长的作用.在实验中,阳性对照药5-Fu具有较好的抗肿瘤作用,对肝癌BEL7402的IC50值为65.77μg/mL,对胰腺癌PANC-1细胞的IC50值为77.87μg/mL;白果提取物的正丁醇和水相组分能够抑制BEL7402细胞和PANC-1细胞生长,而多糖组分和乙酸乙酯组分有较弱的促进两种细胞生长作用.因此,银杏提取物水相和正丁醇组分对肝癌BEL7402细胞和胰腺癌PANC-1细胞具有抑制作用.     

呋喃二烯的体内外抗肿瘤作用研究

探讨了呋喃二烯的体内外抗肿瘤作用及作用机理．采用MTT法检测呋喃二烯对10种人肿瘤细胞的体外增殖抑制作用,研究发现呋喃二烯对体外培养的多种肿瘤细胞具有很强的抑制和杀伤效应,其IC50在0．98-4．81μg/mL．并对敏感的白血病细胞HL-60进行初步的作用机制研究,其形态学和流式细胞分析试验均表明它能有效诱导细胞调亡．整体动物试验结果可证实呋喃二烯乳注射液能明显延长荷腹水癌S180小鼠的生存期,生命延长率分别为80mg／kg（91．2％）,30mg／kg（82．4％）,10mg／kg（70．59％）．     

大蒜素对人肺腺癌细胞SLC-89增殖的影响

目的:观察大蒜素对人肺腺癌细胞SLC-89增殖的影响。方法:不同浓度的大蒜素与SLC-89细胞共培养72 h,运用MTT法测定大蒜素的IC50。将IC50、IC50/2、IC50/4剂量的大蒜素与SLC-89细胞共培养72 h后,运用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法分别测定细胞端粒酶活性,运用流式细胞技术测定细胞PCNA的表达率。加入等量生理盐水共培养作为对照组。结果:大蒜素能抑制SLC-89细胞的增殖,其IC50为79.8μg/mL,IC50和IC50/2剂量的大蒜素能显著抑制SLC-89细胞端粒酶的活性,IC50、IC50/2、IC50/4剂量的大蒜素都能显著抑制SLC-89细胞PCNA的表达。结论:大蒜素能抑制SLC-89细胞的增殖,其PCNA的表达比端粒酶活性更容易受到下调。     

海洋真菌抗肿瘤活性菌株的筛选

采用MTT法,对从厦门海域红树植物、晒盐场土壤、海藻和海洋沉积物样品中分离到的231株海洋真菌的体外抗肿瘤活性进行筛选. 结果显示,有24株菌具有体外抗肿瘤活性,占总供测菌株的10.4%,其中对HeLa细胞有抑制作用的有15株,对HepG-2细胞有抑制作用的菌株有8株,对BGC细胞有抑制作用的菌株有12株. 选择对肿瘤细胞具有较强抑制作用的10株菌株进一步测定其培养物提取物对HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50),发现JSSa-2,JQGa-6f和hzl02a-1株菌的活性很强, IC50分别为0.38,0.18,0.29 μg/mL. 实验结果表明,海洋真菌是潜在的抗肿瘤药物资源.     

佛甲草中细胞毒活性成分的研究

采用中压柱色谱和制备高效液相色谱法对中国传统民族药佛甲草(Sedum lineare Thunb)的甲醇提取物化学成分进行分离,从中分离得到6个化合物.首次对化合物山奈酚7-O-6″-O-丙二酸单酰-D-吡喃葡萄糖苷(1)的波谱数据进行了归属,用MTT法测试6个单体成分对人肝癌细胞株HepG2和Hep3B的抑制作用.结果显示6个化合物均对HepG2和Hep3B细胞表现出抗肿瘤活性,并且IC50值在22.6～91.5 μg/mL之间,在浓度大于100 μg/mL时也没有表现出对人正常肝细胞L－02的抑制作用.相比于黄酮类化合物1、2,苯丙酸类化合物3～6(IC50＝22.6～44.3 μg/mL)对HepG2和Hep3B细胞表现出更强的抑制作用.其中,顺式苯丙酸类化合物5对HepG2和Hep3B细胞的抑制作用最明显.其IC50值范围在22.6～28.2 μg/mL,能明显抑制人肝癌细胞的增殖,诱导其凋亡.     

化合物MDPE的抗肿瘤活性

探讨化合物1-(3R,3aR)-8-甲基-3-(p-甲苯基)-3a,4-二氢硫色并[4,3-c]-1-乙酰基吡唑啉(MDPE)的体外和体内抗肿瘤生物活性.体外实验采用MTT法,研究MDPE对SGC7901,A549,Hela,HepG2,H22和S180细胞的生长抑制作用;体内实验研究MDPE对H22肝癌细胞皮下移植瘤和S180腹水瘤的抑制作用.结果显示:在体外实验中,MDPE对SGC7901,A549,Hela,HepG2,H22和S180细胞的生长抑制作用高于同浓度的顺铂,半致死质量浓度(IC5o)分别为8.44,8.91,7.30,11.04,7.08和6.93 μg/mL;在体内实验中,MDPE以每天给药1,5和10 mg/kg的剂量灌胃给药,连续给药10 d,对H22肝癌细胞小鼠皮下移植瘤的抑制率分别为45.33％,50.16％和51.73％,对S180腹水瘤小鼠的生命延长率分别为29.16％,56.66％和79.75％,此外,还考察MDPE对免疫系统和骨髓的影响.结果证实,MDPE是一种潜在的抗肿瘤药物,其作用机制等值得今后进一步深入研究.     

龙葵多糖对荷瘤小鼠脾指数和胸腺指数的影响

研究龙葵多糖对荷瘤小鼠脾指数和胸腺指数的影响,从免疫学角度初步探讨龙葵多糖的抗肿瘤药效学作用.实验采用MTT法观察龙葵多糖对Hep G-2和SGC-7901两种人肿瘤细胞的生长抑制作用.测定S180小鼠瘤重,H22荷瘤小鼠生存时间以及胸腺指数、脾指数等.实验结果表明龙葵多糖对Hep G-2细胞和SGC-7901细胞的IC50分别为189.60μg/m L和186.56μg/m L.龙葵多糖能够显著降低S180荷瘤小鼠平均瘤重,与阴性对照组比较具有显著性差异(P0.01),龙葵多糖能明显延长H22荷瘤小鼠的生存时间(P0.05或P0.01),显著提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数(P0.05或P0.01).表明龙葵多糖的肿瘤作用是通过改善机体免疫力实现的,而不是通过细胞毒作用发挥的.     

拟黑多刺蚁体外抑瘤作用研究

目的　通过拟黑多刺蚁对体外S180 ,H2 2 ,YAC 1肿瘤细胞DNA合成影响及细胞毒性作用 ,研究该蚁抑瘤效应及机制 .方法　采用3H TdR掺入法和12 5I UdR释放法 .结果　拟黑多刺蚁对S180 ,H2 2 ,YAC 1肿瘤细胞DNA合成均有明显抑制作用 (P <0 .0 5 ) ,其抑制作用随剂量增加而增强 .以对S180 肿瘤细胞抑制作用最显著 .同时证实 ,该蚁对YAC 1,S180 肿瘤细胞均有毒性作用 .结论　拟黑多刺蚁对肿瘤细胞具有直接杀伤和抑制生长的作用 .     

玉竹中高异黄酮类化合物生物活性研究

采用四唑盐(MTT)比色法、白细胞弹性蛋白酶抑制剂筛选模型及二氢乳清酸脱氢酶抑制剂筛选模型对从玉竹中分离出的4个高异黄酮类化合物进行生物活性评价,探讨化合物结构与其活性之间的构效关系.高异黄酮类化合物1～4对肿瘤细胞K562,A549和HCT-15具有细胞毒性,IC50为7～35μg/mL;化合物1～4对人白细胞弹性蛋白酶有抑制作用,IC50分别为13.1,70.4,13.8,55.2μg/mL;化合物2,4对二氢乳清酸脱氢酶有一定的抑制作用,IC50分别为10.0,11.1μg/mL.高异黄酮类化合物的生物活性与其取代基的类型及位置有关.     

绿茶提取物抑制肿瘤作用的实验观察

本文利用湖北英山绿茶提取物——茶结晶,对S—180实体瘤,EAC实体瘤以及体外培养的肿瘤细胞株Hela细胞,EAC细胞的影响进行了实验观察,结果表明,茶叶提取物对S一180;EAC肿瘤均有抑制作用,抑瘤率达43%(P<0.01).对体外培养的Hela细胞,EAC细胞的生长也具有抑制作用,当浓度为2mg/ml时,2—4小时内瘤细胞死亡率为100%.认为绿茶提取物抑制肿瘤的作用与增强机体免疫力,产生不利于肿瘤生长的内在环境有关.