凤尾草乙醇提取物舒张小鼠气管平滑肌作用机理

为探究凤尾草乙醇提取物(ethanol extract of Pteris multifda Poir,EEPM)舒张高钾与乙酰胆碱(ACh)预收缩的小鼠气管平滑肌的作用机理,利用张力换能器探究了EEPM对高钾和ACh预收缩的离体小鼠气管环中相关离子通道的影响,并利用肺功能仪检测了活体水平上EEPM对小鼠呼吸气道阻力(...     

萝芙木乙醇提取物舒张小鼠气管平滑肌的作用机理

为探究萝芙木乙醇提取物(EERV)舒张小鼠气管平滑肌的作用机理,使用80 mmol·L-1 KCl或100μmol·L-1乙酰胆碱(ACh)作为激动剂预刺激小鼠离体气管环,用生物机能实验系统检测了EERV对气管环张力的影响.用肺功能仪在活体水平上检测了EERV对小鼠呼吸系统阻力(Rrs)的影响.结果表明:EERV可通过...     

鸡骨香乙醇提取物舒张小鼠气道平滑肌的作用机理研究

为研究鸡骨香乙醇提取物(EECC)舒张小鼠气道平滑肌的作用机理.在组织水平上,利用生物机能系统,检测EECC对气管张力的影响.在细胞水平上,利用膜片钳系统,记录EECC对L型电压依赖性钙通道(VDLCCs)电流的影响.在活体水平上,利用肺功能仪,检测EECC对小鼠呼吸系统阻力(Rrs)的影响.实验发现在组织水平上,EE...     

白鲜碱对气管平滑肌的舒张作用及机理研究

目的:探讨白鲜碱对异常收缩的气管平滑肌的舒张作用.方法:以80 mmol·L~(-1) KCl或100μmol·L~(-1) ACh预刺激气管,用生物机能系统检测气管的张力,用膜片钳技术检测离子通道电流,观察白鲜碱对气管平滑肌的影响.结果:白鲜碱能呈剂量依赖性地抑制高钾和ACh诱导的预收缩,而对静息状态下的气管无影响.且白鲜碱能阻断VDCCs电流,抑制细胞外Ca~(2+)内流.除VDCCs通道外,它还抑制ACh激活的其他离子通道,并抑制肌质网中的内Ca~(2+)释放.结论:白鲜碱具有舒张气管平滑肌异常收缩的作用,有望作为一种钙离子拮抗剂抑制气道高反应,缓解哮喘.     

千里光石油醚提取物舒张气道平滑肌的作用机制研究

目的:为研究千里光石油醚提取物(PEESS)对小鼠气管平滑肌(ASM)的舒张作用及机理.方法:使用80 mmol·L-1 KCl或100μmol·L-1 Ach刺激小鼠离体气管环、小鼠气管平滑肌细胞(ASMCs)、肺部支气管以及在体小鼠气管,进行了气管环张力、细胞内Ca2+浓度、气管环面积及小鼠呼吸系统阻力检测.结果:...     

马棘根乙醇提取物舒张小鼠气道平滑肌

为研究马棘根乙醇提取物(EEIP)逆转小鼠气道平滑肌(ASM)的收缩及其机制,利用张力测量系统测量小鼠气管环张力,MTT法检测EEIP对16HBE细胞存活率的影响,肺切片技术测量肺内支气管的收缩与舒张,钙成像系统测量ASM细胞内Ca2+水平,动物肺功能仪测量活体小鼠呼吸系统阻力(Rrs).结果表明:EEIP能够完全逆转...     

豚鼠气管平滑肌细胞培养

目的 建立一种简便、快捷的豚鼠气管平滑肌细胞培养方法。方法 幼年豚鼠气管平滑肌组织块原代培养 法。结果 豚鼠气管平滑肌组织块贴壁5～8d后可见细胞自组织块周围长出,细胞长梭形,核位于中央,呈辐射状 向四周生长。两周后细胞长满瓶壁。经α-平滑肌肌动蛋白单克隆抗体(α-smooth muscle actin monoclonal antibody, α-SMA)免疫组化染色鉴定,获得的细胞为平滑肌细胞。结论 豚鼠气管平滑肌组织块培养法可快速获得数量充足 的气管平滑肌细胞。     

银杏叶提取物对肠道平滑肌收缩幅度的影响

用ＡＥ、Ａｃｈ、ＮａＣｌ、ＢａＣｌ２作用定免消化道的十二指肠、小肠上部、小肠中部，小肠下部及大肠始端的平滑肌，发现平滑肌收缩幅度改变，在此条件下，观察记录了两种不同浓度的银杏提取物对肠道平滑肌收缩幅度的影响。结果表明银杏提取物具有解除上述物质对肠道平滑肌的影响，特别对于由ＡＥ、Ａｃｈ形成的肠道平滑肌收缩幅度的变化，具有较明显的恢复作用，说明银杏提取物具有一定的解痉作用。     

雪茶乙醇提取物缓解哮喘症状的作用机理

雪茶（Thamnolia vermicularia）为地茶科植物,生长于我国西南地区.为探究雪茶乙醇提取物（EETV）缓解哮喘症状的作用机理,首先使用不同离子通道激动剂和阻断剂作用于小鼠离体气管环,检测EETV对气管环张力的影响.其次建立了哮喘小鼠模型,检测IL-4、IL-13、TNF-α、Muc5ac、Muc5b及TRPC3的mRNA表达量.之后对哮喘小鼠的支气管及肺组织进行HE染色和PAS染色.最后通过肺功能仪检测Rrs值,以评估小鼠肺功能.实验结果表明：VDLCCs、NSCCs、NCX等离子通道参与EETV舒张气管环的过程;EETV可下调IL-4、IL-13、TNF-α、Muc5ac、Muc5b及TRPC3的mRNA表达量,进而改善气管和肺部炎症;EETV可缓解气管壁及平滑肌增厚;EETV可抑制ACh激发的Rrs升高,改善肺功能.     

克拉霉素分散片舒张小鼠气管的机制

由于空气环境质量的下降,各种气道反应性疾病的发病率呈逐年上升趋势,寻找有效的支气管扩张剂尤为重要.为研究克拉霉素分散片对气管的舒张作用,以小鼠气管环为实验对象,通过离体组织恒温灌流系统和生物机能实验系统检测克拉霉素分散片在不同条件下对收缩气管环的舒张效果.结果表明克拉霉素分散片能引起预收缩的小鼠气管环产生浓度依赖性舒张,并能增强硝苯地平和Y27632对预收缩气管的舒张作用,其主要通过调控L型钙离子通道和钙敏感通道来发挥作用.由此可见,克拉霉素分散片可以作为一种潜在的新型而有效的支气管扩张剂.     

大黄酸抑制气道平滑肌收缩机制研究

目的研究大黄酸是否抑制气道平滑肌收缩及其机制。方法取SPF级BALB/c♂小鼠气管环,将气管环置于恒温灌流系统中,通过JH-2型张力换能器记录气管环张力值。使用80 mmol/L钾(K+)收缩气管环,待气管环张力达到稳定后,分别加入终浓度为1. 00、3. 16、10.00、31. 60、100.00、177. 80、200. 00μmol/L的大黄酸,加入等量的溶剂作为对照。用膜片钳记录L-型电压依赖性钙通道(L-type voltage-dependent calcium channel,LVDCC)电流,大黄酸可以抑制LVDCC电流。用TILL钙成像系统测量平滑肌细胞内钙浓度变化。结果当加入177. 80μmol/L大黄酸时,气管环舒张比率达到最大,为(92. 7±8. 0)%,抑制LVDCC介导的电流、LVDCC介导的钙内流,以及钙内流引起的收缩。结论大黄酸可通过抑制LVDCC抑制气道平滑肌收缩。     

小鼠子宫平滑肌细胞的分离培养及鉴定

为寻找研究子宫平滑肌细胞生理和病理的实验研究模型,试建立一种新的简易机械分离培养小鼠子宫平滑肌细胞的方法。先采用机械分离方法分离子宫平滑肌,再用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶混合消化法消化,可获得90%以上具有正常代谢活性的小鼠子宫平滑肌细胞,存活的细胞经倒置显微镜观察和免疫荧光染色进行鉴定。原代培养3d后细胞贴壁生长,约2周后细胞汇合成片,所培养的细胞在倒置显微镜下呈梭形和典型"峰-谷"样生长,平滑肌细胞肌动蛋白(α-Actin)免疫荧光染色强阳性。采用本法体外培养的小鼠子宫平滑肌细胞生长良好,纯度高,可用于小鼠子宫平滑肌细胞生理和病理等方面的研究。     

猪冠状动脉平滑肌细胞的分离、培养及鉴定

目的:建立体外分离培养猪冠状动脉血平滑肌细胞(PCASMC)的技术方法并观察其生长特征.方法:酶联合消化法原代分离猪冠状动脉来源的CASMC,利用倒置显微镜观察细胞生长情况;免疫荧光染色法鉴定细胞;台盼蓝法、绘制生长曲线法测定冠状动脉PCASMC传代细胞的成活率和生长特征.结果:分离培养的细胞3d后呈梭形生长,7~8d后生长迅速可传代;第2代细胞在显微镜下观察3~5d即可见典型"峰-谷"状生长;免疫荧光染色显示胞浆内α-平滑肌肌动蛋白表达阳性,细胞成活率为97.5%;细胞生长曲线近似"S"形.结论:本研究建立了高效分离和培养PCASMC的方法,细胞均稳定地表达α-平滑肌肌动蛋白,为血管疾病的研究提供了理想的细胞模型.     

N—烯丙基—N—(对苯磺酸钠)硫脲在Ba~(2 )和Zn~(2 )鉴定中的掩蔽作用

本文提出了铬酸钾试法鉴定Ｂａ２＋和双硫腙试法鉴定Ｚｎ２＋时，用Ｎ—烯丙基—Ｎ—（对苯磺酸钠）硫脲消除Ａｇ＋、Ｈｇ２＋对Ｂａ２＋的干扰和Ａｕ３＋、Ｈｇ２＋对Ｚｎ２＋的干扰的方法。     

青蒿活性成分中GPX4激动剂的虚拟筛选研究

谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)是一种能够特异性催化谷胱甘肽将脂质过氧化物转化为类脂醇的硒蛋白,其表达量上调在抑制细胞铁死亡以及相关炎症反应中发挥着重要的作用。为了在青蒿成分中筛选出激动GPX4的潜在活性小分子,首先在“中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)”检索得到126个青蒿活性小分子;然后,通过类药性筛选出50个青蒿活性小分子;其次,采用GPX4-配体对接模拟和GPX4-配体互作模式对比筛选出8个青蒿活性小分子;继而通过GPX4-配体结合自由能计算分析筛选,发现artemisinin(ARS)、patuletin、kaempferol与阳性对照物1d4(PKUMDL-LC-101-D03)的作用方式相似;最后,进行分子动力学模拟。结果显示:ARS、patuletin、kaempferol、阳性对照物1d4可与GPX4形成稳定性较强的复合物。     

青蒿药用成分提取方法及检测技术研究进展

介绍了青蒿药用成分提取方法--冷浸提取、回流提取、索氏提取、超声波提取、温浸提取、超临界CO2萃取、水蒸气蒸馏法提取等方法及检测技术,综述了以上技术在青蒿药用成分提取和检测中的研究现状,并展望了青蒿素的应用前景.     

藜蒿茶浸提液抑菌效果研究

以藜蒿茶为材料,运用正交设计研究了藜蒿茶不同溶剂浸提液在不同条件下对6种供试菌种(大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气杆菌)抑菌效果的影响。结果表明:用90%乙醇溶液在95℃温度下浸提75 min所得浸提液对大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、产气杆菌与普通变形杆菌的抑菌环分别达到最大,且对金黄色葡萄球菌与铜绿假单胞菌的抑菌环具有较高值,因此该条件抑菌效果较佳;水提试验显示,蒸馏水在85℃的温度下浸提2 h,所得浸提液抑菌效果最好。分析表明藜蒿茶浸提液对不同细菌均具有抑制作用,但对不同细菌的抑制效果差异并不显著,说明其具有广谱抑菌效果。在6种供试菌中,藜蒿茶浸提液对大肠埃希菌的最小抑菌浓度最小,说明其对大肠埃希菌有较好的抑制作用。     

加热对血管平滑肌细胞的影响实验研究

 为支架磁感应热疗预防和治疗PTCA术后血管再狭窄提供基础研究数据,对临床常用的316L型不锈钢冠脉支架进行磁感应诱导升温,探讨加热对兔血管平滑肌细胞（VSMCs）的增殖、迁移、凋亡及周期的影响。将平滑肌细胞置于恒温水浴槽中,待其达到预定温度（43、47℃）后持续10min,观察细胞形态变化,采用MTT法检测加热对血管平滑肌细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测VSMC细胞周期和细胞凋亡,划痕实验检测加热对细胞迁移能力的影响,免疫细胞化学法检测不同温度作用后血管平滑肌细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果发现,支架在交变磁场下可以升温至热疗所需温度,加热后细胞增殖受到了显著抑制,43℃组细胞存活率为（83.23±2.87）%,47℃组细胞存活率仅为（37.58±0.78）%。细胞的凋亡率显著增加,47℃组细胞凋亡率为（87.37±2.95）%,与对照组相比具有极显著差异,而43℃组的凋亡率为（6.00±0.26）%,与对照组相比无统计学差异。细胞周期也受到抑制,被阻滞在S期。加热后随着时间的推移,47℃组细胞的迁移能力受到显著抑制,而加热对43℃组细胞的迁移能力无显著影响。免疫细胞化学检测显示,随着温度的升高,PCNA的表达受到明显抑制。研究表明,临床常用冠脉支架在交变磁场下升温可行。加热显著抑制了细胞的增殖并促进了细胞凋亡,使细胞周期阻滞在S期,且抑制了细胞的迁移。加热能显著抑制细胞PCNA的表达,这些可能是加热抑制细胞增殖和迁移、促进凋亡的机制之一。     

艾蒿化学成分研究

将干燥艾蒿用无水乙醇浸泡提取,提取液浓缩后依次用石油醚、乙酸乙酯萃取,制得石油醚和乙酸乙酯萃取物,从两种萃取物中分离得到7种单一化合物,分别鉴定为:正十八酸(1),α-菠甾醇(2),β-谷甾醇(3)、水杨酸(4),7-羟基香豆素(5),对羟基苯丙醇(6),3α-羟基-1(10),4(5),11(13)-吉马三烯-12,6-内酯(7),其中化合物1,4,6,7为首次从该植物中分离得到。     

RP—HPLC测定青蒿中青蒿素的含量

采用反相高效液相色谱法，以对羟基苯甲酸乙酯为内标，测定了青蒿中青蒿素的合量。Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ柱，甲醇－醋酸盐缓冲液（０．０１ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ５．８）为流动相，ＵＶ２６０ｕｍ波长处检测。实验结果平均回收率为１０２．２％，相对标准偏差为１．０７％。方法快速、简便、准确。