木聚糖酶分级对高温降解木聚糖酶水解的影响

为提高酶解液中聚合度为2～5的低聚木糖含量,采用超滤的方法对木聚糖酶进行分级,用于高温降解木聚糖的酶水解。结果表明：木聚糖酶原酶液经超滤分级后,得到的木聚糖酶A组分（分子质量为30～50 ku）、B组分（分子质量为10～30 ku）和C组分（分子质量小于10 ku）,均能使木聚糖中聚合度较高的糖降解为聚合度为2～5的低聚木糖。木聚糖酶B组分由于富含内切木聚糖酶XYN I和XYNⅡ,1 mg酶蛋白可以产生263 g木二糖、185 g木三糖、115g木四糖和046 g木五糖,明显高于木聚糖酶A和C组分高温降解木聚糖的水解能力。     

柑橘皮果胶的系统分级

柑橘皮果胶具有重要的药用价值。本文利用现代生物化学分离纯化技术对柑橘皮果胶进行了系统的分级,根据其电荷和分子量不同用离子交换和凝胶层析将其分成一个中性级分CPN和三个酸性级分CPA-0.2、CPA-0.3和CPA-0.4。单糖组成分析表明CPN为聚半乳糖;酸性糖级分CPA-0.2、CPA-0.3和CPA-0.4主要为聚半乳糖醛酸。高温高压处理对柑橘皮果胶各级分有不同程度的结构改变。     

大米草半纤维素选择性酶解研究

采用由东方肉座菌EU7-22表达的重组木聚糖酶HoXyn11A、黑曲霉BE-2表达的重组木聚糖酶AnXyn10C和商品木聚糖酶分别降解大米草半纤维素,探索其降解的最佳工艺条件,结果发现该3种木聚糖酶最适pH值为4.5～5.5,最佳反应温度为45～55 ℃,酶用量为200～300 IU·g^-1底物,反应时间为12～24 h.对比结果表明:通过黑曲霉BE-2表达的重组木聚糖AnXyn10C能够在24 h内基本将大米草半纤维素降解为低聚木糖,效率远高于商品酶和东方肉座菌EU7-22表达的重组木聚糖酶HoXyn11A.黑曲霉BE-2表达的重组木聚糖AnXyn10C是大米草半纤维素降解酶的良好来源.     

镍锍试金测定铂族元素中捕集剂镍试剂的纯化

镍锍试金铂元素的本底值主要来源于捕集剂镍试剂． 通过对国内外数种高纯镍粉或氧化镍的分析发现其铂族元素含量太高,不能用于亚ｐｐｂ 级铂族元素含量的岩石样品的分析． 我们采用ＹＰＡ４ 螯合树脂来纯化氧化镍． 纯化后的氧化镍铂族元素空白值大大降低（ｎｇ／ｇ）：Ｒｕ＜ ０．０５０,Ｒｈ＜ ０．０５０,Ｐｄ＜ ０．２５０,Ｐｔ＜ ０．０５０,Ｉｒ＝ ０．０１５,Ｏｓ＜ ０．０１０,可以满足地球化学样品中痕量铂族元素的准确测定     

从猪胸腺提取胸腺素α1的工艺

为了提高猪胸腺的利用价值,探索猪胸腺素活性物质的提取工艺.选取猪胸腺为原料,采用匀浆、凝胶过滤、离子交换层析和丙酮分级沉淀的方法纯化胸腺素α1, 并用Bradford法检测蛋白含量,用SDS-PAGE电泳测定蛋白纯度.将猪胸腺组织匀浆、三次冻融和80 ℃热变性纯化后,上清采用Sephadex G-50柱填料凝胶过滤,然后进行阴离子交换树脂DEAE-C32离子交换层析和丙酮分级沉淀,通过真空冷冻干燥,最后得到胸腺素α1, 纯度为95%以上, 得率为3.84×10 -5.最终得到提取胸腺素α1的有效工艺.     

卷烟加工工艺重要工序及储叶条件对烟草中碳水化合物的影响研究

研究了卷烟加工工艺过程中几个重要工序对烟草中碳水化合物含量的影响,并在实验室用人工气候箱模拟卷烟加工工艺过程中储叶的温湿度条件,进一步研究了润叶后不同储叶温度以及不同烟叶水分对烟草中碳水化合物含量的影响.实验结果表明:随着卷烟加工工艺环节的依次推进,样品中细胞壁物质、淀粉、果胶、木质素和纤维素的含量呈下降趋势,而糖类化合物的含量变化规律性不明显;不同碳水化合物在不同工艺环节前后其含量变化也有所不同;在烟叶水分相同的条件下,淀粉、总糖的含量随着储叶温度的升高而降低;在储叶温度相同的条件下,淀粉、纤维素、细胞壁物质含量随着烟叶水分的增加而降低.     

草苁蓉根、茎水溶性多糖BRT的分离与鉴定

从长白山区野生植物草苁蓉的根、茎中分离水溶性多糖。粗多糖经乙醇分级、Sevage法脱蛋白、H2O2脱色、反复冻融、高速离心等方法分离纯化得级分BRT。经Sepharose CL-4B柱层析、DEAE－Sephadex A-25柱层析等方法证明BRT为均一组分。气相色谱分析多糖的组成表明，粗多糖的单糖组成为Ara，Xyl,Gal,Man,Glc，摩尔比依次为0.98:1.00:2.38:1.28:10.00。BRT的单糖组成为Xyl,Gal,Man和Glc，摩尔比依次为0.61:3.12:1.00:3.97。以上结果说明，多糖BRT是以葡萄糖、半乳糖为主，兼有木糖和甘露糖的中性杂多糖。     

近50年来安徽杭埠河上游地球化学沉积与区域环境变化

2003年在安徽杭埠河上游的龙河口水库采得的沉积物ALE柱样及上游三条主要河流的流域表层样品,在利用SCP记录确定沉积年份的基础上,对其粒度、有机碳、氮、磷含量等气候代用指标进行了分析.研究发现晓天河流域样品有机碳、氮含量最高,柱样中各元素含量随深度增加缓慢变小,但在50 cm深度有明显峰值出现.同时对近50年以来沉积物中粒度变化、碳-氮和氮-磷耦合关系进行了讨论,推断其物质来源以河流携带陆源植物输入为主,其含量变化受物质来源、本身生物化学作用、气候变化、人类活动等影响,并进一步揭示该区域环境变化的不同阶段,发现降雨和人类活动是影响本流域沉积的主要因素.     

不同优势度马尾松的生物量及根系分布特征

对重庆酸雨区不同优势等级马尾松单木的生物量及根系分布特征进行了系统调查.结果表明:马尾松个体生物量中地上部分占90%以上,根系不足10%,各器官生物量所占比例顺序从大到小依次为:干、枝、根、皮、叶.不同优势等级马尾松林木的根系分布深度与幅度有很大区别.优势木垂直根系深度可达130 cm,水平根系集中在半径为3 m的范围内;而非优势木垂直根系一般不超过80 cm,水平根系集中在1.5 m为半径的范围内.不同径级根系在根系生物量中所占比例顺序从大到小依次为:粗根、大根、中根、小根、细根,其中粗根和大根占总根量的90%以上.中、小、细根不足10%.通过根钻法调查酸化土壤中生长的马尾松林木细根的分布特征,发现在40 cm深度范围内有大量马尾松细根存在,并在表层土壤较为集中;细根量随距样木距离的加大而不断减少,一般在距样木2.0 m的位置减至最低.     

香菇多糖分离纯化及结构表征

采用水体醇沉法得香菇多糖粗品，再通过分级醇沉及Sephadex G-200葡聚糖凝胶进一步分离纯化得到香菇多糖；用硫酸苯酚法测定香菇多糖含量，采用分子排阻色谱法测定香菇多糖分子量，用糖腈乙酸酯柱前衍生化-气相色谱法测定单糖组成，红外光谱(IR)测定多糖结构，结果显示：香菇多糖初次提取纯化的两个组分由β糖苷键岩藻聚糖构成，相对分子量分别为9.5×10⁴和1.7×10⁴.二次提取纯化多糖组分1由岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成(3.6∶1.3∶1.2∶9.2∶63.3∶21.4),相对分子量4.2×10⁴,以α糖苷键链接；组分2由岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成(10.7∶1.5∶0.6∶14.2∶25.4∶47.5),相对分子量1.5×10⁴,以β糖苷键链接.香菇多糖结构复杂，其化学结构与生物活性密切相关，通过对香菇多糖的分离纯化和结构表征，可为获取高活性多糖、提升多糖在食品和药品中的应用价值提供科学依据.     

“甘茶蔓”飲料中絞股蓝总皂甙含量的测定

采用树脂法富集及纯化总皂甙,通过薄层色谱检测,确定大孔树脂吸附和解吸“甘茶蔓”饮料中绞股蓝总皂甙的条件:饮料通过装有树脂的色谱柱,吸附后,依次用水、10％、20％、30％乙醇溶液洗涤,最后用95％乙醇洗脱。收集洗脱液,蒸去溶剂,残渣用无水乙醇溶解、过滤,滤液供重量法及比色法测定含量,结果分别为19.8和20.2mg/100ml。     

热解温度与碱金属对生物质热解碳烟氧化活性的影响

为研究生物质碳烟的氧化反应活性,在沉降炉反应器中于1 000、1 100、1 200、1 300℃温度下对麦秆和木屑2种生物质进行了热解,获得了生物质热解碳烟样品。采用热重分析法测试了不同热解温度下产生的碳烟的氧化活性,研究了热解温度、生物质中碱金属对碳烟氧化活性的影响。结果表明:随着热解温度的升高,2种生物质碳烟的氧化活性表现出不同趋势,即木屑碳烟的氧化活性提高,而麦秆碳烟的氧化活性降低;麦秆相对木屑具有显著高的碱金属(主要为KCl)含量;水洗碳烟的氧化活性明显降低,表明KCl颗粒可以显著促进碳烟的氧化;X射线衍射(XRD)及粒径分析显示,随着热解温度的提高,2种生物质碳烟的石墨化程度提高,单个颗粒的几何平均粒径变小。因此认为,木屑碳烟的活性主要受碳烟粒径的影响,而麦秆碳烟由于其中含有明显多的碱金属颗粒(绝大部分为KCl),其活性受碱金属盐和粒径、内部结构等的综合作用。     

生化出水中各类有机污染物的特性及在混凝处理过程中的行为

以城市生活污水厂二级生化出水为研究对象,考察了生化出水中有机污染物中各组分含量、分子量分布特点等特性,以及各类有机物在三氯化铁混凝处理过程中的行为.实验结果表明:当生化出水中有机物浓度以DOC表征时,水中疏水性物质与亲水性物质各占50%,其中疏水酸浓度最高,约为42%,其次为亲水酸和非酸亲水物质,分别占26%和24%,非酸疏水物质仅为8%.其中疏水酸中的不饱和双键或芳香环有机物的含量较高.二级生化出水中的DOC主要集中在分子量大于10 000 D的有机物,占48.8%.在三氯化铁混凝过程中,能去除几乎所有的大分子量有机物以及大部分芳香族有机物(61%的UV254),对小分子、亲水性有机物基本没有去除效果.因此,混凝法需与其他能去除亲水性、小分子量有机物(＜3 000 D)的处理工艺结合,以进一步提高有机物的去除效率.     

水合物低场核磁共振弛豫响应

水合物核磁共振表征对于海上水合物储层勘探以及地层描述具有重大意义。设计实验探究了溴化四丁基铵(TBAB)水溶液在分级降温与升温过程中的低场核磁共振弛豫响应特征。实验数据结果表明,变温过程中横向弛豫时间(T₂)分布存在3个区间,即小峰区间(小于4 ms)、中峰区间(4～100 ms)和大峰区间(100～3 000 ms),核磁共振弛豫信号分别来源于水合物、TBAB分子和水中的氢原子核。测试样品的温度以及T₂分布演化规律能够识别样品中所包含物质,即固态水合物、TBAB水溶液、水、冰。小峰信号由水合物提供,依此建立了水合物核磁共振信号(幅值和T₂)与温度的关系,可以作为量化分析水合物含量的温度校准依据。     

五叶山小橘叶化学成分的研究

为研究五叶山小橘叶的化学成分,采用溶剂提取法,正、反相硅胶柱色谱及半制备高效液相色谱等多种分离技术对其化学成分进行分离纯化,并运用现代波谱技术对其进行结构鉴定.从五叶山小橘叶乙醇提取物中分离得10个化合物,包含4个木脂素、3个生物碱、2个甾体以及1个萜类化合物,其结构分别鉴定为:山小橘新木脂烷甲素(1)、3,4-二-(4-羟基-3-甲基苯环)四氢呋喃(2)、表松脂醇(3)、松脂醇(4)、3-吲哚甲醛(5)、香草木宁(6)、山小桔碱(7)、pregnenolone(8)、16-dehydropregnenolone(9)、lochmolin E(10).其中化合物1为新的4′,7-环氧-8,3′-新木脂烷类化合物,化合物2～4、8～10是首次从该属植物中分离得到.     

HPLC法测定三种蒙成药中盐酸小檗碱的含量

目的:采用高效液相色谱法测定以黄柏为主要成分的三种蒙成药(协日毛道-8、特木仁-5、协日嘎-4)中盐酸小檗碱的含量.方法:色谱柱为Xterra(5μm×150 mm×3.9 mm)柱;流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸-水-乙腈(10∶30∶30∶30,V/V);检测波长为345 nm.结果:回归方程y=3.408×106x-1.04×105,r=0.9997,CV(%)=1.03(n=5).线性范围0.005 mg/g~5.450 mg/g.协日毛道-8,特木仁-5,协日嘎-4中盐酸小檗碱的含量分别为0.93 mg/g、0.65 mg/g、2.96 mg/g,平均回收率为98.88%.结论:本方法简便、可靠,适合蒙药中盐酸小檗碱的含量测定.     

旱柳嫩枝化学成分研究

采用水煮法对干燥旱柳嫩枝进行提取,提取液浓缩至小体积依次用乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,制得乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物,利用硅胶柱色谱分别对乙酸乙酯和正丁醇萃取物进行分离和纯化,得到了5个化合物,通过理化性质及波谱数据分析鉴定它们的结构分别为:水杨醇(1),水杨苷(2),邻苯二酚(3),对羟基苯甲酸(4),水杨酸(5)。干燥旱柳嫩枝乙酸乙酯萃取物中含量最多的是邻苯二酚(3)。占乙酸乙酯萃取物的质量分数为2.6%。正丁醇萃取物中含量最多的是水杨苷(2),占正丁醇萃取物的质量分数为14.5%。     

NaCl对壳寡糖/果胶静电自组装作用的影响

通过测定pH3.5、不同NaCl浓度下壳寡糖与果胶复合溶液的浊度及Zeta-电位,分析复合溶液宏观/微观状态及浊度滴定过程,结合壳寡糖/果胶聚电解质复合物红外光谱分析、扫描电镜及透射电镜超微结构观察,探讨了NaCl及其浓度对壳寡糖/果胶静电自组装行为的影响.结果表明:NaCl加入会阻碍壳寡糖与果胶分子之间的静电自组装作用,使pH_c、pH_Ф及pH_(prep)逐渐降低;pH3.5时,随着NaCl浓度增大,复合溶液浊度分阶段下降,溶液逐渐澄清,所形成的PEC减少,并从网状结构变为微小颗粒,甚至达到纳米级(NaCl浓度30 mmol/L及以上);NaCl低于10 mmol/L时,果胶分子内静电斥力减小,分子链适当软化并弯曲、折叠后与壳寡糖形成大块微粒,而NaCl浓度进一步增加则造成PEC微粒表面Zeta-电位的绝对值增大,微粒间静电斥力加大,果胶分子柔软且易卷曲,包裹壳寡糖形成更小且更分散的微粒;红外光谱分析发现,NaCl添加不改变果胶和壳寡糖之间的作用方式,但可能会影响其强度;推测了不同浓度NaCl下壳寡糖与果胶的自组装作用模式.     

羟基磷灰石-果胶复合纳米粒的制备与表征

羟基磷灰石(HAp)具有良好的生物相容性和骨诱导性,在骨组织工程和药物递送方面具有潜在的应用前景.与传统的HAp粒子相比,纳米级HAp具有高比表面积、高表面能、靶向性等特性,同时其表面粗糙度高、亲水性强,所以更易吸附蛋白,表现出更佳的生物相容性.然而,纯的HAp纳米粒非常不稳定,容易发生团聚,不利于细胞摄取,也可能引发血管堵塞的问题,阻碍了其在体内的应用.果胶(pectin)是来源于高等植物细胞壁的杂多糖,由于其良好的生物相容性和形成凝胶的特性使其在药品研制、食品保护等方面得到大规模的应用,近年来也逐渐成为组织工程的研究热点.本文旨在研究开发HAp与果胶的纳米复合材料,首先通过果胶分子链上的羧基与钙离子反应制得了果胶钙纳米凝胶,然后将磷酸根引入,原位反应制得了HAp@pectin复合纳米粒.利用FT-IR、XRD和TGA等检测手段,详细研究了HAp@pectin复合纳米粒的结构及分子间的相互作用,借助TEM探索复合纳米粒的形貌,使用激光粒度仪测定了纳米粒的尺寸及Zeta电位.研究发现果胶分子结构上的羧酸根与Ca2+的静电作用是HAp@pectin形成的主要驱动力,可以通过调整果胶的含量调控复合纳米粒的形貌,研究结果可为开发基于天然多糖及纳米羟基磷灰石的复合材料提供一条新途径.     

863课题“深海微生物活性物质的挖掘及其利用技术”2013年度进展

2013年为863课题"深海微生物活性物质的挖掘及其利用技术"实施的第二年。该年度该课题进展顺利,完成了预期的研究计划。取得的研究进展主要分为以下5个方面:(1)在深海沉积环境样品中分离、纯化、保藏869株菌株,确定了729个菌株的系统进化地位,在深海海水样品中分离了海洋微生物237株,完成了其中168株的细菌测序工作;其中发现一个潜在的新属级类群。(2)对21株深海微生物进行次生代谢产物的分离和纯化,从中分离鉴定代谢产物186个,其中新结构化合物71个;其中1个对称的环四肽类新骨架化合物;发现具有较好药用活性的化合物25个;对Staurosporine的衍生物HDZ-115和Xanthocillin X进行深入的药理药效研究,确定为下一步成药性评价的先导化合物。(3)从深海来源微生物中发现对植物病原真菌具有良好抗性的脂肽类活性物质;筛选得到一系列抗污损活性的活性物质,其中1个单体化合物在海洋挂板实验中较好抗海洋污损生物活性,具有进一步开发价值。(4)完成了1株深海海洋放线菌SCSIO ZH66的全基因组扫描测序,克隆鉴定了Grincamycin,Lobophorin的生物合成基因簇,完成了Grincamycin,marinacarboline,lobophorin的生物合成途径。(5)从深海微生物中分离纯化两种具有重要经济价值的新蛋白酶,分离得到到新型高温α淀粉酶和生淀粉酶基因,成功实现异源表达,并对酶学性质进行了研究。