猪链球菌2型毒力相关因子研究进展

猪链球菌2型是在世界范围内影响养猪业和人类健康的一种重要的人兽共患传染病。猪链球菌2型毒力因子在致病过程中发挥了重要的作用。但是对猪链球菌2型的致病机制和关键毒力因子仍然不确定,使有效的防治该病成为一个难题。本研究对猪链球菌2型已发现的毒力因子和新发现的毒力因子进行综述,为防治该病提供科学依据和参考。     

猪链球菌病与猪链球菌2型

猪链球菌2型引发猪链球菌病,不仅可致猪患败血症突然死亡,还可感染与猪密切接触皮肤有伤口的人群,并可致人死亡。2005年7月,我国四川爆发了猪链球菌病,经对疫区采取封锁、隔离、消毒以及及时确诊病人等措施,并紧急生产、迅速使用猪链球菌2型灭活疫苗后,该病的流行得到了有效的控制。介绍了猪链球菌病的病原、流行特点等,以及相应的防控措施。     

浅析猪链球菌病

猪链球菌病是由链球菌引起的一种人畜共患细菌性传染病,是我国规定的二类动物疫病.链球菌种类很多,在自然界分布很广,水、尘埃,动物体表、消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜、乳汁等都有存在.本文对猪链球菌病的病因、临床症状与防治进行了归纳与论述.     

猪链球菌病的综合防治

链球菌病是一种人畜共患疫病，近年来生猪发生较多，且传播迅速，死亡率高，对养猪业危害甚大。近日，发生在四川资阳、内江等地的猪链球菌病已感染到人，目前已造成100多人发病、30多人死亡的严重后果。     

猪链球菌的分离与鉴定

猪链球菌（Streptococcosis suis）是由链球菌C、D、E及L、R、S等群引起的多种疾病的总称，是一种重要的人畜共患病病原，危害养猪业的发展和从业人员及消费者的安全，养猪业发达同家如美、英、荷及爱尔兰等常有本病发生。     

猪链球菌的分离与鉴定

对来自河南许昌、开封、新乡、周口、郑州等地的疑似猪链球菌病的送检病料进行分离、纯化,结合培养特性和生化特性鉴定为猪链球菌,并对分离的14个典型菌株进行了系统的生化分群.结果表明,猪链球菌病主要由C群(3/14),D群(5/14),E群(3/14)和L群(2/14)链球菌引起,一些菌株对小白鼠具有致病性.药敏试验结果表明链球菌对阿米卡星、强力霉素和利福平敏感,对链霉素、四环素、头孢氨苄、杆菌肽低敏.     

2型猪链球菌毒力因子

2型猪链球菌感染已成为影响全世界养猪业的重要问题之一.它主要引起猪脑膜炎、肺炎、心内膜炎、关节炎、败血症等,并可感染人.2型猪链球菌致病机理尚不太清楚,迄今为止,已知的毒力因子有荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、胞外蛋白因子、溶血素、粘附素等.     

猪链球菌病的防控措施

链球菌病是猪的常发传染病。根据临床经验,论述了猪链球菌病的传染源与流行、临床症状和诊断方法,提出了加强饲养管理,严格免疫接种,加强圈舍消毒,定时通风和消除外伤感染等防控措施。     

猪链球菌病的有效防治措施

2005年七月中下旬，四川省资阳、内江等地相继发生猪链球菌病疫情，并有多人感染发病，引起社会各界的密切关注。许多人“谈猪色变”，甚至不敢吃猪肉，但对猪链球菌病及其防治措施却知之甚少，本文就猪链球菌病及其有效防治措施作以浅论，供大家参考。     

猪链球菌灭活苗的实验研究

猪链球菌病在一些地区经常发生。菌株主要有C、D、L、E、R等多群血清型。目前多采用C群疫苗对猪群进行防疫，但不能完全控制本病的发生．通过在发病猪场从经诊断为链球菌病的病猪体内分离出链球菌菌株，并自制链球菌灭活苗，再应用于发病猪场进行防疫，实验证明此方法免疫效果良好。     

我国四川地区爆发猪链球菌病

2005年6月下旬以来,四川省部分地区爆发重大突发公共卫生事件,相继大量出现不明原因的死亡病例。该病以急性起病、高热、伴有头痛等全身中毒症状,重者出现中毒性休克、脑膜炎为主要临床表现。之后,广东、香港两地也相继发现了该病例个案。疫情发生后,农业部组织专家联合攻关,确     

猪链球菌分离株的病原学特性

从病死猪体内分离到3株链球菌,并进行了病原学鉴定。细菌在形态上呈链球菌的特征,β或α溶血,分离株的生化试验结果相似,且都不与A~G链球菌群特异性血清发生凝集。经PCR鉴定,结果表明,3株均为猪链球菌2型。动物试验结果表明,3分离株对小鼠的毒力较低,但能在接种细菌12~15 d后使小鼠发病致死。     

猪链球菌病诊断与免疫防治

论述了猪链球菌病的发生与传播,包括传染源、传播途径、流行特点,危害和疫情现状,病原及致病机理,流行病学特点和诊断要点,包括了解流行病学史、疑似病例、临床诊断和纯培养确诊,提出了预防免疫措施：加强饲养管理、幽舍定期消毒、隔离病猪、定期接种疫苗,防控措施：病死猪焚烧深埋、封锁疫区、全面普查,治疗方法：早发现、早治疗,采用大剂量抗生素药物、补充能量。     

猪链球菌病的病原分离与鉴定

对来自某猪场的疑似链球菌病病料进行病原分离、纯化，并对分离出的典型菌株做进一步生化及血清学等鉴定，结果表明，该病原是Ⅱ型猪链球菌。     

通辽地区猪链球菌的分离及鉴定

为了弄清通辽市地区屠宰猪携带猪链球菌的情况,随机抽取30个猪胴体采集咽喉部扁桃体组织,进行细菌分离及鉴定.结果表明,有4分检样猪链球菌检测阳性,链球菌携带率为13.3%.     

猪链球菌的分离鉴定与生物学特征研究

从河南洛阳和甘肃兰州的某屠宰场采集猪鼻液和颌下淋巴结等样品共791份,分离出13株链球菌.经细菌分离培养、生化试验、兰氏分群A-G诊断试剂鉴定,其中发现C群链球菌5株,D群链球菌7株,F群链球菌1株.药敏试验结果表明,分离菌对氨苄西林、万古霉素、氯霉素和菌必治高度敏感;对庆大霉素、丁胺卡那霉素、红霉素、奥复星、丙氟哌酸中度敏感;对青霉素、复方新诺明、链霉素、氟哌酸、氯洁霉素、四环素等药物有耐药性.     

石家庄市猪链球菌分离鉴定及快速诊断方法研究

从石家庄市地区各县市猪场送检的疑似病例中分离得到72株猪源链球菌,选择其中具有一定区域、特定致病类型的代表性菌株18株,进行了病原分离和分群鉴定,并与标准株进行了对比试验.初步证实本地区流行菌株仍以兰氏分群C群及D群居多,以C群链球菌为主占50%,但D群有上升趋势占33.3%,此外还出现1株G群占5.6%,另有2株未定群的猪链球菌,其分布无明显的地域性.为检测石家庄地区SS分离株的毒力因子,选取了猪链球菌8种主要毒力因子基因,设计并合成8对引物,用PCR方法进行检测.结果显示:已知21株SS2菌株中90.5%表现为cps2/gdh+/gapdh+/ef+/mrp+/sly+/fbps+/orf2+;送检的疑似SS2的病例中,仅有10%左右表现为cps2/gdh+/gapdh+/ef+/mrp+/sly+/fbps+/orf2+.可见,石家庄地区的猪链球菌与国内其他地区SS2分离株的基因型不同,表明石家庄目前SS2的主要流行菌株是具有部分毒力因子的弱毒菌株.     

2型猪链球菌RevS基因敲除突变株生物学特征及致病性研究

比较2型猪链球菌(S.suis 2)ΔRevS突变株和05ZY/H33野生株生物学特性及致病性的差异.首先,通过吸光值测定和革兰染色比较△RevS突变株和05ZY/H33野生株的生长速度和菌体形态.分别对Balb/c及ICR(CD1)小鼠腹腔注射109 CFU·mL~(-1)的05ZY/H33菌液,评估两种品系小鼠对S.suis 2的易感性.分别对Balb/c小鼠腹腔注射2.5×10~9,5.0×10~8,1.0×108,2.0×10~7,4.0×10~6 CFU·mL~(-1)的05ZY/H33菌液,采用Reed法计算半数致死量.对Balb/c小鼠腹腔注射5.0×108 CFU·mL~(-1)的ΔRevS突变株和05ZY/H33野生株菌液,观察野生株和突变株对小鼠的影响.对仔猪耳缘静脉注射10~9 CFU·mL~(-1)的05ZY/H33野生株和ΔRevS突变株菌液,观察野生株和突变株对仔猪的影响.体外生物学特征分析表明,与野生株相比,突变株的生长速率和形态染色并未发现显著变化;Balb/c小鼠对S.suis 2 05ZY/H33的敏感性高于ICR(CD1)小鼠,05ZY/H33对Balb/c小鼠的LD50为4.2×10~7 CFU·mL~(-1).Balb/c小鼠攻毒试验结果显示,ΔRevS对小鼠的致病性明显减弱.仔猪攻毒试验结果显示,野生株和突变株都引发仔猪全部死亡,但ΔRevS引发仔猪死亡时间较晚.△RevS突变株保持了菌株的基本生物学特征,但对小鼠和仔猪两种动物模型的致病作用差异较大.     

猪链球菌2型98HAH33株脂蛋白的in silico方法鉴定

为鉴别已公布基因组序列的SS2 98HAH33株的脂蛋白,以研究脂蛋白在SS2致病过程中的作用,首先利用PrositeScan和DOLOP脂蛋白预测软件预测98HAH33株的脂蛋白,采用SignalP 3.0 HMM,PrediSi,Phobius和LipoP-HMM分析预测的脂蛋白的信号肽,然后经"多数票决法"鉴定脂蛋白,最后利用InterProScan和BlastP服务器对鉴定的脂蛋白进行功能分析.结果鉴定出31种脂蛋白,占SS2致病株98HAH33蛋白质组的1.465%.功能分析结果表明,共有16种脂蛋白是ABC转运体的底物结合蛋白(SBP),9种SBP基因与其相应通透酶和ATPase基因组成完整ABC转运体的操纵子,参与氨基酸、金属离子、核苷、无机盐等的运输;7种具有与数据库酶域相匹配或经BlastP比对与其他酶有一致性;5种为假定的蛋白;3种脂蛋白具有其他功能.这些资料提示脂蛋白在SS2的生理和致病性方面具有重要作用.     

猪链球菌乳酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的反应原性研究

为了验证双向电泳筛选出的7型猪链球菌WH分离株免疫相关蛋白乳酸脱氢酶的反应原性,本实验采用克隆表达的方法对其进行研究。根据质谱鉴定的NCBI登录号查找乳酸脱氢酶基因序列,并设计特异性引物,对乳酸脱氢酶基因进行扩增,克隆入p ET30a载体,构建重组质粒p ET30a-LDH,测序后转化入大肠埃希氏菌中。用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。SDS-PAGE分析结果显示表达的重组融合蛋白相对分子量为41ku;Western blot分析结果显示该重组蛋白可与7型猪链球菌WH分离株多克隆抗体发生特异性血清学反应。这表明表达的重组LDH蛋白具有良好的反应原性,为预防和控制猪链球菌病提供有效的疫苗候选分子奠定基础。