植物抗病基因工程研究现状及展望

近年来,随着植物抗病基因的分离,植物抗病机制的分了生物滂和植物抗病基因工程的研究轰轰烈烈地展开并取得重大突破。利用抗病基因进行遗传转化已相继取得成功,基于抗病反应内在机制的基因工程也开始启努,并将越来越广泛地应用于作物抗病品种选育和农业生产实践。     

植物转脂蛋白的抗病机制研究进展

植物受病原菌侵染后会诱导病程相关蛋白的表达，抑制病原菌的生长和蔓延，并产生系统性获得抗性.目前已确定的病程相关蛋白有14种，植物转脂蛋白被列入其中.关于转脂蛋白的作用尽管已争论多年，但其准确的生理功能及作用机制至今仍不十分明确.近年来人们将焦点集中在转脂蛋白抗性功能与机制的研究上.文中介绍了目前这一领域的研究进展，并根据该室的研究结果，提出钙调素可能参与植物转脂蛋白抗性功能的调节，为全面阐明转脂蛋白的抗病机制提供了新的研究线索.     

植物抗病基因的几个结构域

研究抗病基因的结构对于植物抗病工程的发展具有很重要的价值。对已克隆出的植物抗病基因研究表明,大多数的抗病基因都具有高度保守的结构域,本文对在植物抗病反应中起主要作用的几个结构域(LRR域、TIR域、CC域、Kinase域和NBD域)做了简要阐述。     

玉米候选抗病相关基因片段的克隆

根据已经克隆的植物抗病基因和候选抗病基因的保守序列P-loop、Kinase-2及GLPLAL设计一系列简并引物，利用同源序列扩增法，对玉米的基因组DNA进行PCR扩增，并对5个扩增产物的克隆进行测序，测序结果在GenBank内进行BLAST检索，发现A9克隆序列与玉米BAC库中的206C17克隆的部分序列有很高的相似性，并且距离GenBank内注册的玉米抗锈病基因rpl位点中的rpl-3基因、rpl-4基因分别约有66Kb、20Kb，且A9克隆序列在玉米基因组中是单拷贝的，这为玉米抗锈病性状的分子标记辅助选择和抗锈病基因的克隆奠定了良好的基础．     

玉米候选抗病相关基因片段的克隆

根据已经克隆的植物抗病基因和候选抗病基因的保守序列P-loop、Kinase-2及GLPLAL设计一系列简并引物，利用同源序列扩增法，对玉米的基因组DNA进行PCR扩增，并对5个扩增产物的克隆进行测序．测序结果在Gen—Bank内进行BLAST检索，发现A9克隆序列与玉米BAC库中的206C17克隆的部分序列有很高的相似性，并且距离GenBank内注册的玉米抗锈病基因rpl位点中的rpl-3基因、rpl-4基因分别约有66Kb、20Kb，且A9克隆序列在玉米基因组中是单拷贝的．这为玉米抗锈病性状的分子标记辅助选择和抗锈病基因的克隆奠定了良好的基础。     

国内外水稻抗病转基因研究进展

随着水稻遗传转化技术的发展,通过基因工程手段获得抗病水稻品种成为可能。综述了近年来国内外水稻抗病转基因的技术、方法,对水稻抗病转基因在水稻育种上的应用也作了评价。     

植物抗病反应中的蛋白磷酸化

在植物抗病反应中,发现有蛋白磷酸化现象发生,已经证明的有关因子包括MBP蛋白激酶、大雄疫霉激发子、丁香霉素、pp29和pp51蛋白激酶以及双链RNA。蛋白磷酸化是细胞信号传递系统的组成部分,与植物抗病反应有关的蛋白磷酸化研究将会发现新的植物病害防治途径。     

异戊烯基转移酶基因克隆及植物表达载体构建

根据已知的异戊烯基转移酶基因保守序列设计引物,以根癌农杆菌C58的Ti质粒为模板,采用PCR方法扩增获得了异戊烯基转移酶基因723bp的片段.将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序,测序片段经酶切回收后克隆到植物表达载体pBI121中,转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α.将阳性质粒转化农杆菌感受态细胞EHA105,经菌液和质粒PCR分析,获得了真核表达载体pBI121-ipt,这为异戊烯基转移酶基因功能的进一步研究提供了基础.     

桃抗病基因同源序列的克隆与分析

根据已克隆的STK类抗病基因的保守区设计简并引物对4个不同桃的基因组DNA进行PCR扩增,将获得的扩增片段的回收产物,应用pGEM-T easy裁体试剂盒进行了目的基因片段的克隆.随机挑取若干单克隆经PCR鉴定确认后,进行测序,共获得11个各不相同的片段序列.氨基酸序列分析中,有6个片段能推导出完整的氨基酸序列.除了两侧都基本具有STK类抗病基因产物的保守结构域.     

植物基因环境效应启动子

植物的生长发育受到光照、温度、水分及氧等环境因素的影响，根据对不同环境的响应，植物基因的启动子主要可以分为光效应启动子，温度效应启动子和水效应启动子。在这些启动子中，除了含有基本启动子外，还存在一些特异的顺式调节元件，这些顺式调节元件在特异表达中发挥重要作用。     

植物细胞工程药物生产的研究进展

通过对植物生产药物几个阶段的概述 ,重点介绍了植物细胞大规模培养进行药物生产的进展、存在问题以及一些新技术的运用。最后介绍了转基因植物生产药物的前景。     

植物基因的克隆与转化研究进展

综述了近２０ａ来植物基因工程、特别是ＤＮＡ重组技术和基因遗传转化技术的发展历程,比较了各种分子克隆和转化方法的优劣,将有助于广大青年学者了解并掌握现代分子生物学的最新动态     

用根癌农杆菌介导法建立抗真菌病害油菜育种体系的研究初报

用含β－１,３－葡聚糖酶和几丁质酶串联基因双价载体质粒ＰＢＬＧＣ的根癌农杆菌侵染甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｉｃａｎａｐｕｓ）带柄子叶和下胚轴的方法,初步建立了抗真菌病害油菜高效基因转化育种体系．研究了不同种类和不同浓度的激素对带柄子叶和下胚轴不定芽诱导的影响,试验结果表明经卡那霉素（ｋａｎ）筛选,含６ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的ＭＳ培养基中带柄子叶的出苗率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２５％;下胚轴在含１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ培养基中出芽率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２３％．绿苗在含５０ｍｇ／Ｌｋａｎ的诱根培养基中培养后移栽于花盆,套袋自交,自交种子所得无菌苗的带下胚轴子叶再经含５０ｍｇ／Ｌｋａｎ的ＭＳ培养基筛选培养,结果小苗全部生根成活,初步证明目的基因已转入油菜植株中,经诱导不定芽阶段和生根阶段两次ｋａｎ筛选是有效的     

植物差异表达基因克隆技术及研究进展

随着分子生物学技术的深入发展,植物基因组研究已经由以全基因组测序为目标的结构基因组学转向以基因功能鉴定为目标的功能基因组学研究,目前分离并克隆差异表达基因已成为生命科学研究的热点.近些年来,国内外学者发展了多种分析差异表达基因的技术来研究植物在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况,掌握了生命活动过程中的重要信息.文章对建立在RNA水平上克隆植物未知差异表达基因的几种关键技术及其研究进展进行了综述,阐述了各技术的原理、技术路线、优缺点及相应的改进方法,并对它们在植物抗逆研究中的应用现状及前景作了展望.     

禽巴氏杆菌抗链霉素耐药基因StrA的克隆及同原性比较

根据巴氏杆菌基因序列设计合成一对引物，以临床分离的动物源性巴氏杆菌抗链霉素耐药菌株为模板，通过PCR技术，扩增出StrA基因350-1153bp序列．PCR产物及表达载体通过粘端连接，将长约804bp的StrA目的基因片段克隆到pGEM—T载体上，构建了克隆载体质粒pGEM—TstrA．StrA基因片段测序结果与文献报道的结果同源性为99．8％．只有一个碱基发生突变，但所编码的氨基酸没有改变．     

杨树锈病抗性遗传特性及基因克隆策略研究进展

杨树全基因组测序工作显示,抗病基因往往呈簇状分布,采用合理的策略克隆出物理上独立的抗病基因,可为抗病育种工作提供捷径。笔者从杨树锈病病原菌生物学特性、寄主对锈菌的抗性、抗锈病基因克隆等几个方面分析了近年来关于杨树抗性遗传位点的确定,抗性基因克隆策略的发展及可能的应用,并对杨树抗病育种工作进行了展望。     

天然植物紫外吸收剂的研究进展

分析和探讨了天然植物紫外吸收剂的研究现状及发展前景,为开发和研究天然植物紫外吸收剂提供一定的参考。     

广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列克隆及序列分析

目的克隆广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列,并与已发表的其它品种猪的生长激素(pGH)基因全序列进行比较,探讨该基因在广西巴马小型猪中可能存在的变异。方法以广西大学巴马小型猪基因组DNA为模板,扩增巴马小型猪生长激素基因的全序列,将该扩增片段亚克隆到pMD18-T载体后测序。再将测序结果在NCBI进行BLAST。结果测序结果证明克隆得到了巴马小型猪GH基因,全长为2 007 bp。同源性比较发现,巴马小型猪GH基因全序列与GenBank中发表的五指山猪、太湖猪及普通猪的GH基因全序列的同源性分别为99.4%、98.3%、93.9%。