性病淋球菌PCR基因扩增检测方法及应用

本文介绍性病淋球菌ＰＣＲ基因检测方法的研究过程．笔者设计一对对淋球菌隐蔽性质粒ｃｐｐＢ基因有专一性的引物，应用该引物进行ＰＣＲ体外基因扩增．对淋病患者的泌尿生殖道标本可检出３８０ｂＰ特异片段应用该试剂盒检测１２５例性混乱患者与细菌培养法比较，前者检出率２５．６％（３２／１２５），后者仅６．４％（８／１２５）．     

聚合酶链反应诊断男性淋菌性尿道炎

用淋球菌聚合酶链反应诊断男性淋菌性尿道炎，６１例患者中９例作分泌物培养和ＰＣＲ，培养阳性２例，ＰＣＲ阳性５例；５２例先取尿道拭子作培养，后取始段晨尿作ＰＣＲ，培养阳性１例，ＰＣＲ阳性１８例．培养总阳性率４．９２％，ＰＣＲ总阳性率３７．８％，两者有显著性差异．笔者认为晨尿淋菌ＰＣＲ可作为一种敏感方法用于本病的诊断．     

机器人自动装配线监控系统的通信与动态监测

本文系对我院１０７８名职工进行ＨＢＶＭ的检测，男性３５７人，占３３．１１％，女性７２１人，占６６．８９％。发现ＨＢＶ感染者２８３例，感染率为２６．２５％。其中ＨＢｅＡｇ阳性者１６例（１．４８％，ＨＢｓＡｇ阳性者５１例，ＨＢｃＡｂ阳性者６６例。     

应用PCR技术检测结核菌的临床研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对２４４例呼吸疾病患者临床标本进行结核菌ＤＮＡ检测，并同时与涂片抗酸染色结果进行比较。结果显示：１１２例结核标本涂片和ＰＣＲ检测阳性率分别为１６．１％和５２．７％，两者差别有显著性（Ｐ＜０．０１）。９４例涂阴结核标本ＰＣＲ阳性达４５．７％。结果表明应用ＰＣＲ技术检测结核杆菌ＤＮＡ具有快速敏感、特异性较高等优点，尤其对涂阴病人具有较大诊断价值     

应用PCR技术检测单纯疱疹病毒

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测２０５例样本，其中单纯疱疹病毒阳性６５例，阳性率３１．７％．ＰＣＲ技术具有高度的敏感性和特异性，为疱疹病毒感染的临床早期准确诊断、判定药物疗效和流行病学研究等提供了有效的手段     

PCR检测结核杆菌343例

ＰＣＲ检测结核杆菌３４３例．阳性６９例，阳性率２０．１１％．ＰＣＲ技术具有高度的敏感性和特异性．能检测结核杆菌培养阴性及涂片阴性的结核病患者．对ｘ线检查阴性患者也有一定的阳性率．     

PCR和原杂交技术检测鼻咽癌石蜡组织中HHV-6DNA

为了解人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）与鼻咽癌（ＮＰＣ）的可能关系，检测了ＮＰＣ发生不同阶段的石蜡组织中ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。方法：采用ＰＣＲ、斑点杂交和原位杂交技术，共检测了４２例鼻咽癌石蜡组织、２１例鼻咽癌前病变石蜡组织和２７例正常鼻咽石蜡组织ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。结果：通过ＰＣＲ扩增，在４２例ＮＰＣ组织中检出１３例存在ＨＨＶ－６ＤＮＡ，占３１％；２１例鼻咽癌前病变组织中１例阳性（４７％），而２７例正常鼻咽组织中无一例阳性。斑点杂交的结果表明ＰＣＲ扩增是ＨＨＶ－６特异的。原位杂交发现，在１３例ＰＣＲＨＨＶ－６阳性的ＮＰＣ组织中１１例ＨＨＶ－６ＤＮＡ阳性。ＨＨＶ－６ＤＮＡ主要分布于癌巢的肿瘤细胞核内，少数亦可见于癌旁的异型细胞，但在淋巴细胞及正常上皮细胞内未发现阳性信号。结论：本实验用分子生物学技术首次证明，在中国ＮＰＣ患者的鼻咽石蜡组织中存在ＨＨＶ－６。ＨＨＶ－６与ＮＰ相关，并有可能在ＮＰＣ的癌变过程中起一定的作用     

PCR技术在基因突变检测中的应用

ＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术以其具有高特异性、高效率、高灵敏度而广泛地应用于基因突变研究中，近年来，ＰＣＲ技术不仅推动了以往基因突变检测技术的发展，而且建立于ＰＣＲ技术之上的新技术设计先进、操作方便省时，具有更广阔的实用性。文中对这些基因突变检测技术的原理、特点及应用给以综述。     

小儿支原体肺炎应用聚合酶链反应快速诊断及临床分析

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测１０４例临床诊断为支气管肺炎的患儿咽拭子标本，结果有３４例阳性，占３２．７％，其中最小患儿４７天，３岁以内的婴幼儿感染率较高，联合应用大环内酯类与先锋霉素类抗生素疗效好，提出咽拭子ＰＣＲ方法检测支原体是临床上一项快速、具有高度特异性方法，对提高临床诊治水平很有帮助     

PCR和原要交技术检测鼻咽癌石蜡组织中HHV—6DNA

目的：为了解人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）与鼻咽癌（ＮＰＣ）的可能关系，检测了ＮＰＣ发生不同阶段的石蜡组织中ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。方法：采用ＰＣＲ、斑点杂交和原位杂交技术，共检测了４２例鼻咽癌石蜡组织、２１例鼻咽癌前病变石蜡组织和２７例正常鼻咽石蜡组织ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。结果：通过ＰＣＲ扩增，在４２全ＮＰＣ组织中检出１３例存在ＨＨＶ－６ＤＮＡ，占３１％；２１例鼻咽癌前病变组织中１例阳性     

TTV感染的检测及意义

目的：探讨本地区不同型别肝炎患者血清中TTV感染状况。方法：采用巢式PCR对97例不同型别肝炎患者血清中TTVDNA进行检测。结果：对97例不同肝炎患者血清中TTV检测,其阳性率慢性乙型肝炎为6.0%,慢性丙型肝炎为24.0%,非甲-庚型肝炎为18.1%。结论：采用巢式PCR对不同型别肝炎患者血清中TTVDNA进行检测。为本地区TTV肝炎的诊断和治疗提供实验诊断方法,具有一定的指导意义。     

32例肿瘤组织中p53基因突变的PCR-SSCP、银染色检测

目的　检测肿瘤组织中 p5 3基因的突变率 ,探索其在肿瘤发展过程中的作用 .建立PCR SSCP检测 p5 3突变的常规方法 .方法　检测 32例癌组织和癌旁组织 .用盐沉淀制备样品DNA ,以p5 3基因exon7设计引物 ,用PCR SSCP结合银染色显示结果 .结果　 32例肿瘤标本检出阳性 9例 ,阳性率 2 8.1% .4例癌组织和癌旁组织均为阳性 .其中 2 2例胃癌 ,检出 4例阳性 (占 18.2 % ) ,双阳性者 2例 .结论　p5 3基因突变在肿瘤中具有普遍性 ,癌组织和癌旁组织双阳性者 ,与肿瘤的扩散有关 .该检测方法简便易行 ,有助于对 p5 3基因突变的扫描检测 .     

王锦蛇(Elaphe carinata)Sox基因保守区的克隆及测序

参照人SRY基因HMG-box保守区序列设计一对兼并引物,PCR扩增了王锦蛇的Sox基因,采用SSCP技术筛选阳性克隆,并对其进行了测序.结果在雌雄个体中共筛选出4个Sox基因,其中一个为雌性独有,显示出性别差异性;4个Sox基因DNA序列及编码的氨基酸序列与人相应SOX基因的相似性分别为91%、91%、92%、91%和96%、98%、96%、96%,显示出高度的保守性.实验结果为王锦蛇的性别决定机制研究提供了分子资料.     

同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR的建立及应用

目的 建立同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR方法,并进行初步应用。方法 比对NCBI上发表的MVM和MPV基因组序列,设计1对引物和探针,可同时检测MVM和MPV。考察MVM-MPV引物探针的特异性和灵敏度,并对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测。结果 MVM-MPV荧光定量PCR方法最佳线性范围为109～104拷贝/μL,标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99,灵敏度为101拷贝/μL,特异性强。应用MVM-MPV探针对178份小鼠粪便DNA检测,结果为2份阳性样本,经MVM、MPV特异性探针鉴定,2份阳性样本均为MPV感染。阳性样本经全基因组测序后与NCBI网站上MPV(NC_001630.1)序列比对,一致率为96%。结论 建立的MVM-MPV荧光定量PCR方法,能够有效快速地同时检出小鼠细小病毒和小鼠微小病毒。     

支原体种属特异性PCR引物的设计及对细胞培养物支原体的检测

目的快速全面检测感染细胞、疫苗等多种生物制品中的支原体.方法从多种支原体的16SrRNA核酸序列中选择了两段高度保守的核酸序列,作为支原体种属特异性引物,对标本进行检测.结果用这对种属特异性引物对已知阳性的50份标本进行检测,检测结果显示全部为阳性.应用于实践,检测了89份疫苗标本,阳性率为31.4%,而用常规培养法检测阳性率为12.3%.结论用该种属特异性引物检测支原体具有检测速度快、检测灵敏度高、特异性强等优点.     

广州地区早孕妇女HCMV感染及其垂直传播

用聚合酶链反应技术检测１１０例早孕妇女尿液及其胚胎绒毛的ＨＣＭＶＤＮＡ。结果孕母尿液与胚胎绒毛的ＨＣＭＶＤＮＡ阳性率分别为１５．５％和７．３％，宫内感染率为４１．２％，孕母尿液与胚胎绒毛的ＨＣＭＶ阳性数密切相关，提示孕母尿路排毒系全身性活动性感染；孕母尿液ＨＣＭＶ阳性与阴性者其胚胎绒毛ＨＣＭＶ阳性数具显著差异，表明孕母尿液阳性者较阴性者处于垂感染胚胎的高危状态，建立采用ＰＣＲ法普查早孕妇女尿液ＨＣ     

聚合酶链反应检测石蜡切片中金黄色葡萄球菌DNA的研究

目的　探讨聚合酶链反应技术 (PCR)在检测石蜡包埋组织中金黄色葡萄球菌DNA的应用及价值。方法　利用PCR技术 ,对 55例福尔马林固定、石蜡包埋小鼠组织中SA DNA进行了检测。结果　 55例石蜡包埋的小鼠组织中均检测到SA DNA ,这与临床病理诊断为金黄色葡萄球菌 (S .aureus)感染相一致。结论　PCR技术可用于检测石蜡包埋组织中的SA DNA片段 ,为鼠S .aureus感染的回顾性分析提供了有效手段     

The study on BCR/ABL fusion gene in adult acute lymphoblastic leukemia

In order to assess the significance of BCR/ABC fusion gene in adult acute lymphoblastic Leukemia (ALL), 28 patients who were diagnosed as ALL were enrolled to detect BCR/ABC gene using nested-RT-PCR. The results showed that 9 cases (31.25%) were BCR/ABL positive, and expressed P210 subtype. Among them 7 cases were B-ALL, and one was T-ALL. The diagnosis was proved by monoclonal antibodies recognition by indirect immunofluorescence. Adult patients with BCR/ABL positive ALL were significantly older (p<0.01) and had higher WBC count (p<0.01) as compared with BCR/ABL-negative patients. There was no significant difference in sex, hemoglobin and splenomegaly between two group (p>0.05). The induction failure rate was high in BCR/ABL positive patients and those who achieved complete remission usually relapsed earlier. In conclusion, adult ALL patients with BCR/ABL-positive have poorer prognosis. Biography: Li Hui-yu(1960-), female, M.S., research direction: hematology melucular