CycIin B1、CDK1在肺癌中过表达及其意义

采用免疫组化ABC法检测12例肺癌组织、11例癌旁组织及3例正常肺组织中cyclin B1、CDK1蛋白的表达情况,以探讨细胞周期蛋白cyclin Bl及细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1在不同肺癌组织中的异常表达及其临床意义.结果显示cyclin B1在正常肺组织、癌旁组织、癌组织中阳性率分别为0%、9.1%和50.0%,CDK1的阳性率则为0%、18.2%和75.0%,cyclin Bl、CDK1在小细胞肺癌和鳞癌中存在广泛的过表达,而在大细胞肺癌中没有表达,并且在不同肿瘤亚型中表达也有差异性.     

CDK2在非小细胞肺癌组织中的表达

探讨CDK2在非小细胞肺癌组织中的表达与肺癌转移关系。将50例非小细胞肺癌组织分为转移组和非转移组,采用免疫组织化学和Western blot检测癌组织中CDK2蛋白的表达。结果表明:CDK2蛋白在肺癌细胞中主要位于细胞核。CDK2蛋白在肺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P0.05)。CDK2蛋白高水平表达与肺癌淋巴结转移呈正相关(P0.05),但与肿瘤类型无关(P0.05)。CDK2的过表达可能与肺癌的形成有关,并与淋巴转移有关。     

Cyclin D1与p21WAF1在鼻咽癌中的表达

目的探讨鼻咽上皮癌变过程中周期蛋白CyclinD1与抑癌基因p21（wild—type p53 activated fragment 1,p21wAF1）蛋白的表达及其意义。方法应用免疫组化方法检测47例鼻咽癌组织、21例癌旁上皮组织和14例正常鼻咽粘膜中Cyclin D1与p21WAF1蛋白表达。结果从鼻咽正常粘膜、癌旁粘膜上皮组织到癌组织,Cyclin D1表达阳性率逐渐增加,并且差异有显著意义（均为P〈0．05）。p21WAF1蛋白在以上组织中阳性率较高,且各组间差异无显著性。结论Cyclin D1、p21WAF1蛋白与鼻咽部上皮细胞恶性增生密切相关,p21wA兀蛋白表达可能与细胞周期调控的反馈机制有关。     

应用基因表达谱芯片研究人肺鳞癌相关基因

应用基因表达谱芯片检测人肺鳞癌与正常肺组织间差异表达基因,并对其进行初步分析。提取5例人肺鳞组织及其癌旁正常肺组织的RNA,混合后分别逆转录合成标记有荧光分子的cDNA探针,与联合基因BiostarH-1×1型基因芯片杂交。计算机分析扫描芯片荧光信号图像,比较两种组织中差异表达基因,对筛选的肿瘤相关基因进行初步分析。结果:两种组织间存在大量差异表达基因,其中113条基因在肺癌组织中较正常肺组织表达上调,112条基因在肺癌组织中较正常肺组织表达下调。分析这些差异表达基因发现,肺鳞组织及其癌旁正常肺组织的基因表达谱差异主要集中在原癌基因和抑癌基因、免疫相关基因、代谢相关基因、蛋白翻译合成相关基因、细胞信号和传递蛋白、细胞凋亡相关基因等方面;而在细胞周期蛋白、细胞骨架和运动、细胞受体、DNA合成和修复及结合和转录等方面则关联甚少。说明基因芯片在筛选疾病相关基因的改变时,具有快速、高效、高灵敏度等特点,人肺鳞癌基因差异表达谱的分析为阐明肺癌的发病分子机制提供了新线索。     

Twist、E-cadherin和Vimentin在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:研究转录因子Twist、上皮性钙黏附素(E-Cadherin)和波形蛋白(Vimention)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨其与非小细胞肺癌浸润转移及预后之间的关系.方法:采用SP免疫组织化学、Western blot和RT-PCR方法检测80例非小细胞肺癌组织Twist、E-Cadherin和vimention蛋白和mRNA,20例癌旁正常组织作对照.另采用免疫细胞化学法检测68例非小细胞肺癌所致胸腔积液中肿瘤细胞的表达.结果:Twist和Vimentin在NSCLC组织及NSCLC胸水标本中的表达显著高于癌旁正常肺组织(P<0.01);E-cadherin在NSCLC组织及NSCLC胸水标本中表达显著低于癌旁正常肺组织(P<0.01);NSCLC组织中Twist及E-cadherin表达均与组织分化,临床分期及淋巴结转移情况密切相关(P<0.01);并且Twist表达与E-cadherin表达降低(P<0.01)和Vimentin的表达上调(P<0.01)之间都存在相关性.结论:Twist蛋白在非小细胞肺癌组织及胸腔转移灶中过度表达,可能通过分别上调和下调Vimentin、E-ead-h...     

细胞周期调控相关蛋白Cyclin D1、CDK 4和pRb在宫颈鳞癌中的表达及意义

应用免疫组化方法检测100 例宫颈鳞状细胞癌及50 例非癌宫颈组织中Cyclin D1、CDK 4表达和pRb磷酸化状态,探讨了细胞周期调控相关蛋白CyclinD1、CDK4和pRb在宫颈鳞癌中表达及其意义.结果表明:Cyclin D1和CDK4在宫颈鳞癌组中阳性率分别为75%、87%,与非癌宫颈组相比,差异有统计学意义(P<0.05);pRb磷酸化在2组中差异有统计学意义(P<0.01).这提示Cyclin D1、CDK4 蛋白的高表达及pRb的高磷酸化可能与宫颈鳞癌的发生发展有关.     

Smad2基因在肺癌组织和细胞中的表达特点

目的 探讨Smad2基因在肺癌组织和细胞中的表达特点.方法 分析Smad2的mRNA和蛋白在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达情况;收集患者的临床病理指标,并进行5 a随访,记录患者生存情况,分析与Smad2基因表达的关系.培养人正常肺上皮细胞BEAS-2B、人肺癌细胞A549,检测Smad2的mRNA和蛋白表达水平;使用10μg/L的3-甲基胆蒽连续染毒培养至第10代、第20代、第30代、第40代,检测Smad2基因表达变化;使用Smad2过表达质粒、Anti-Smad2质粒分别转染A549细胞,比较细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果 肺癌组织中Smad2的mRNA和蛋白表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.01).人肺癌细胞A549中Smad2的mRNA和蛋白表达水平明显高于人正常肺上皮细胞BEAS-2B(P<0.05).随着3-甲基胆蒽诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B恶性转化传代数的增加,Smad2的mRNA和蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05).N2～N3期的肺癌患者Smad2基因低表达率明显高于N0～N1期的患者,肿瘤分期Ⅲ～Ⅳ期的肺癌患者Smad2基因低表达率明...     

TTF-1在肺癌诊断分型中的应用

目的明确甲状腺转录因子-1(TTF-1)在肺鳞癌中的表达情况,探讨TTF-1在肺癌分型中的诊断价值。方法应用免疫组织化学S-P法染色对140例肺活检组织中TTF-1蛋白进行检测,分析临床资料并回顾文献。结果本项研究中,TTF-1在27例肺腺癌中均阳性表达,在54例肺鳞状细胞癌中则无一例表达,它们之间差异有统计学意义(P <0. 01);另外肺小细胞癌TTF-1的阳性率高达95%。结论 TTF-1在肺鳞癌中表达缺失,在肺腺癌的表达率高。其准确判读有助于作出正确的肺癌组织学分型。     

唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中hMSH2、hMLH1蛋白的表达和意义

探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1蛋自在唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中的表达及意义。免疫组织化学SP法检测涎腺多形性腺瘤27例及癌在多形性腺瘤中蜡块标本22例,共49例标本hMSH2、hMLH1蛋白的表达情况。涎腺多形性腺瘤瘤旁正常组织、涎腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中hMSH2、hMLH1蛋白表达的阳、性率分别为28．57％和42．86％、96．3％和85．19％及90．91％和86．36％。hMSH2及hMLH1在涎腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中均表达上调。     

B7-H6影响小细胞肺癌凝血状态的初步研究

目的:探讨B7-H6与凝血状态在小细胞肺癌中的临床意义.方法:搜集江南大学附属医院确诊小细胞肺癌标本41例及癌旁肺组织41例,免疫组化分析B7-H6表达情况,并探讨B7-H6表达与D-二聚体、血小板、凝血酶原时间、脉管内血栓发生率的关系.结果:33例小细胞肺癌发现B7-H6表达,在正常肺组织仅发现3例弱阳性染色,在B7...     

突变型P53和肿瘤易感基因101在肺癌组织中的表达及意义

探讨了P53基因突变对肺癌组织中TSG101基因的影响,结果是:TSG101在正常组织中呈强阳性表达100%(30/30),在高分化肺癌(包括肺鳞癌和肺腺癌)组织、低分化肺癌组织、淋巴结转移组织的表达分别为77.97%(92/118)、25.37%(17/67)、18.95%(18/95);P53的表达则相反,在正常组织、高分化肺癌组织、低分化肺癌组织、淋巴结转移组织的表达分别为6.67%(2/30)、67.80%(80/118)、86.57%(58/67)、94.63%(90/95);P53基因PCR-SSCP分析谱检测P53第5~8外显子阴性56例占30.27%,阳性129例占69.73%,总突变率为69.73%(127/180);P53与TSG101呈现负相关.这些结果提示P53和TSG101可能共同参与了肺癌的发生、发展和转移.     

CDK16在食管鳞癌中的表达及其对肿瘤发生发展的影响

目的研究发现,细胞周期素依赖性激酶(cyclin dependent kinases,CDKs)家族成员与食管鳞癌的发病密切相关,但细胞周期素依赖性激酶16(CDK16)对食管鳞癌发病的影响尚不清楚.本研究旨在探讨CDK16在人食管鳞癌组织中的表达及生物学意义.方法应用组织芯片技术结合免疫组织化学技术检测45例食管鳞癌组织、45例癌旁组织中CDK16蛋白的表达情况,并使用统计分析软件研究CDK16蛋白的表达与食管鳞癌临床病理特征之间的关系.结果 CDK16在食管鳞癌组织中呈阳性表达,且表达强度与肿瘤分化程度呈负相关.另外,CDK16在食管鳞癌细胞中的表达位置与肿瘤的分化程度紧密相关.CDK16的表达与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移及TNM临床分期均具有显著的相关性(P<0.05),而与患者的年龄、性别以及肿瘤的部位、最大径、病理形态没有显著的相关性(P>0.05).结论 CDK16在食管鳞癌中的高表达与食管鳞癌的发生发展及转移密切相关.检测CDK16的表达有助于食管鳞癌的临床诊断和预后评估.     

Ras /MAPK / ERK 通过协同 NF- KB 促进肝癌细胞中 cyclinD1 的表达

摘要: 目的 探讨 Ras 癌基因在体内诱导肝肿瘤发生过程中促进 cyclin D1 表达的分子机制。方法 利用 H-ras12V 转基因雄鼠肝肿瘤组织、肿瘤周围组织以及非转基因雄鼠肝组织进行病理分析和总 RNA 及蛋白质的提取。应用 qRT-PCR 和 Western blot 方法检测 cyclin D1 的表达以及调控 cyclin D1 表达的相关信号通路激活状态。采用 miRNA 测序、生物信息学分析和 qRT-PCR 验证方法检测 miR-5102 基因的表达水平。结果 与非转基因雄鼠肝组 织和肿瘤周围组织相比,肿瘤组织中 cyclin D1 基因的 mRNA 和蛋白表达水平显著升高。与非转基因雄鼠肝组织 和肿瘤周围组织相比,在肿瘤组织中 MAPK 信号转导通路中的 ERK 信号分子的蛋白表达水平和磷酸化水平都显 著升高,在肿瘤组织中成高激活状态,NF-KB 信号通路中的抑制因子 IKB 蛋白水平显著降低。miR-5102 的表达水 平没有显著变化。结论 在 Ras 癌基因诱导的肝肿瘤发生过程中,主要通过激活 MAPK/ERK 和 NF-KB 信号通路促进 cyclin D1 的表达。     

HSP70在肺癌组织中表达水平的研究

采用免疫组织化学ＳＡＢＣ法检测３９例肺部组织中ＨＳＰ７０的表达。结果显示：ＨＳＰ７０在高度分化的肺鳞癌和肺腺癌细胞中的阳性表达率与癌旁正常肺组织之间具有高度显著性差异（Ｐ〈０．０１）,ＨＳＰ７０的表达在高分化的肺鳞癌与肺腺癌之间则无显著性差异（Ｐ〉０．０５）,在低分化的肺鳞癌和肺腺癌组织中,ＨＳＰ７０呈阴性反应,ＨＳＰ７０在肺癌组织中表达水平的高低与肺癌细胞的分化程度密切相关,而与肺癌的组织学类型     

AP-1及其相关基因uPA、uPAR在肺癌中的表达及其意义

研究AP-1及其相关基因uPA、uPAR在人肺癌中的表达及其与肺癌临床病理特征的关系.通过免疫组织化学方法检测101例肺癌组织及7例正常肺组织中AP-1、uPA、uPAR的表达情况,利用CMIAS2000型多功能真彩病理图像分析系统测量计算各病例中c-jun、c-fos、uPA、uPAR蛋白阳性细胞的平均光密度(DAO)和积分光密度(DIO).c-jun、c-fos在肺癌组织中表达的阳性率及其共表达率均显著高于正常肺组织;二者在NSCLC的表达显著强于SCLC;不同组织学类型肺癌中二者表达具有显著性差异,腺癌中表达最强,小细胞肺癌中表达最弱;c-jun、c-fos与肺癌分级、合并分期、淋巴结转移均呈显著正相关.uPA、uPAR与肺癌淋巴结转移密切相关,与合并分期呈显著正相关;uPAR与肺癌分级呈显著正相关;各指标之间均存在显著正相关关系.研究结果表明uPA、uPAR参与了肺癌侵袭转移,AP-1信号传导通路在该过程中起了重要调节作用.     

肺癌患者血清P53抗体及肺癌组织P53表达对肺癌诊断价值的研究

目的探讨肺癌患者血清P53抗体水平及肺癌组织P53表达对肺癌诊断的价值.方法采用ELISA法检测肺癌患者血清P53抗体水平,并采用免疫组化法检测肺癌组织P53表达情况.结果肺癌患者血清P53抗体（17.84±8.73）ng/L水平比正常对照组（5.43±1.90）ng/L显著升高（P〈0.001）,肺癌患者血清P53抗体水平与肿瘤大小、淋巴转移、远端转移、TNM分期有关.肺癌患者癌组织P53表达的阳性率为61.5%（168/273）,肺癌患者癌组织P53阳性表达率与肿瘤大小、淋巴转移、远端转移、TNM分期、分化程度、病理类型有关.结论血清P53抗体水平与癌组织中的表达有着良好的平行关系,测定血清P53抗体水平或检查肺癌患者癌组织P53的表达可对肺癌的诊断、分期、治疗和预后提供重要依据.     

胃癌组织中Survivin的表达与细胞凋亡的关系研究

目的通过检测Survivin及相关指标在人胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系,探讨Survivin对胃癌组织细胞凋亡的作用.方法采用免疫组织化学SP方法检测60例胃癌组织,7例正常胃黏膜组织Survivin,p53的表达水平.结果Survivin,p53蛋白阳性率分别为56.7%,65%;Survivin蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤直径、TNM分期均无明显相关性(P>0.05),与组织学分级、淋巴结转移具有相关性(P<0.05);Survivin的表达与p53呈正相关.结论Survivin的过表达与胃癌的发生、发展及预后密切相关.Survivin具有抑制凋亡的作用.     

Expression and significance of cyclin D1, p27kip1 protein in bronchioloalveolar carcinoma

PURPOSE: To investigate the relationship between expression of cell cycle-related protein cyclin D1, p27kip1 and the pathogenesis of bronchioloalveolar carcinoma (BAC) and the value of prediction of prognosis. METHODS: Cyclin D1 and p27kip1 protein were detected by immunohistochemical En Vision method in 43 BACs. RESULTS: The positivity of cyclin D1 in BAC was 65.1% (28/43), which was significantly higher than that in normal pulmonary tissue (0/13), P<0.01. No statistically significant association was found between cyclin D1 expression data and sex, age, tobacco-use history, histologic subtype (mucinous vs nonmucinous), stromal fibrosis, lymph node metastasis, clinical stage or postoperative survival period (P>0.05), while cyclin D1 expression was found to be negatively correlated with tumor size (P<0.05). The positivity of p27kip1 in BACs was 51.2% (22/43), significantly lower than that in normal pulmonary tissue (12/13), P<0.01. p27kip1 expression level was not associated with sex, age, tobacco-use history, tumor size or histologic subtype (P>0.05), but was negatively correlated with stromal fibrosis, lymph node metastasis and clinical stage (P<0.05); and positively associated with postoperative survival period (P<0.01). The survival rate of p27kip1 positive group was significantly higher than that of p27kip1 negative group (P<0.01). No statistically significant correlation was found between cyclin D1 and p27kip1 expression. CONCLUSIONS: Increased cyclin D1 expression and decreased p27kip1 expression are related to the pathogenesis of BAC; decreased p27kip1 expression is associated with metastasis progression; immunodetection of p27kip1 is useful for assessment of prognosis.     

乙型肝炎病毒蛋白及COX-2在乙肝相关性肝细胞癌发展与转移中的作用机制

目的探讨乙型肝炎病毒蛋白及环氧合酶-2(COX-2)在乙肝相关性肝细胞癌发展与转移中的作用机制.方法取42例慢性乙肝患者行穿刺活检时乙型肝炎病毒ccc DNA为阳性乙肝相关性肝细胞癌组织;另取同期手术切除的11例ccc DNA为阴性的非乙型肝炎相关性肝癌组织.免疫组化法检测乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2、CD34的表达水平,Werdner法计算微血管密度;分析上述因子与乙肝相关性肝细胞癌组织微血管生成的相关性.RT-PCR和Western blot检测人肝癌细胞系(HepG2)和稳定转染乙型肝炎病毒X蛋白(HepG2-X)细胞中COX-2mRNA和蛋白表达情况;ELISA法检测细胞上清液中PGE2表达水平和不同浓度COX-2抑制剂塞来昔布作用后PGE2水平.结果乙型肝炎病毒X蛋白阳性表达组织中COX-2阳性率明显高于乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织和非乙型肝炎相关性肝癌组织(P0.01).乙型肝炎病毒X蛋白阳性表达组织中早期癌症微血管密度明显低于进展期癌症组织,乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织中微血管密度明显低于阳性表达组织(P0.01);COX-2阳性表达组织中微血管密度明显高于COX-2阴性表达组织(P0.01);非乙型肝炎相关性肝癌组织中微血管密度明显低于乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2阳性表达组织(P0.01),与乙型肝炎病毒X蛋白阴性表达组织和COX-2阴性表达组织之间差异无统计学意义(P0.05);乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2在乙型肝炎相关性人肝细胞癌组织微血管生成呈正相关.HepG2-X细胞中COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显高于空载体对照HepG2细胞,并且细胞培养上清液中PGE2水平明显增加;与HepG2细胞相比,塞来昔布对HepG2-X细胞分泌PGE2具有更强的抑制作用.结论乙型肝炎病毒X蛋白、COX-2在乙肝相关性肝细胞癌组织中高表达,促进了癌组织微血管生成;乙型肝炎病毒X蛋白可通过COX-2/PEG2信号通路促进了肝癌的发生和发展.     

肺癌组织中P~(53)和ras-P~(21)癌基因蛋白的免疫组织化学研究

目的：为探讨肺癌组织中P53和P21癌基因蛋白的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化方法（S－P法）检测69例肺癌组织标本中P53和P21癌基因蛋白表达,结果采用卡方检验。结果：P53和P21在肺癌组织中的阳性表达率分别为49.3％、68．1％;肺癌癌旁支气管粘膜和腺体中的阳性表达率分别为0和17.6％,与肿瘤区相比较差异均非常显著（P＜0．01）。P53蛋白表达与肺癌病人术后生存期有一定关系,P53阳性率越高,其存活期越短。P21蛋白表达肺腺癌高于肺鳞癌（P＞0．05）。P53和P21蛋白表达与肺癌病人性别、年龄、肿瘤分期和分化程度无关。结论：肺癌患者术后预后不良与P53蛋白积累有关,P53蛋白蓄积是判定肺癌预后的指标之一,ras基因突变是肺癌发生的早期事件,与肺腺癌发生更有密切关系。