链霉菌种间原生质体融合的研究(Ⅱ)——融合子56-2菌株的鉴定

通过金霉素链霉菌和龟裂链霉菌原生质体融合选育出的融合子５６－２菌株，其酯酶同工酶谱与双亲有显著差异，产抗生素能力及遗传稳定性均优于金霉素链霉菌３＃，发酵产物四环素符合中国药典的各项指标，并具有抗噬菌体Ｐ５，Ｐ８的能力。     

链霉菌种间融合及融合产物的分析

采用灭活龟裂链霉菌原生质体与金霉素链霉菌原生质体在聚乙二醇诱导下进行原生质体种间融合,利用金霉素链霉菌对链霉素的敏感性,建立选择培养基,提高了融合子的检出率。并采用同工酶谱分析及抗生素效价测定,对融合子进行了初步鉴定     

链霉菌种间原生质体融合的研究

金霉素链霉菌和龟裂链霉菌分别在含０．７５％，甘氨酸１．５０％的液体培养基中培养，对数生长中后期的菌丝体易于制备原生质体，当聚乙二醇（ＰＥＧ６０００）浓度为４０％，在５０℃下保温５ｍｉｎ，有效地诱导了两种原生质体的融合。用表型标记和间接选择的方法检出融合子，种间融合率为３．０５％。融合重组体与亲本在菌落形态，孢子形态，抗生素产量和抗噬菌体特性有显著的差异，不同重组体之间也表现了这些差异．     

金霉素链霉菌发酵培养基的优化

金霉素链霉菌能产生四环素族抗生素,而抗生素是微生物的次级代谢产物,其产量与培养基的组成成份及培养条件密切相关.通过单因素试验考察金霉素链霉菌生长所需要的碳源和氮源,在此基础之上再通过4因素3水平正交试验对金霉素链霉菌发酵培养基进行优化筛选,其4因素分别为玉米淀粉、黄豆粉、硫酸铵、酵母粉的质量分数.试验结果表明,优化后得到的最佳培养基,用管碟法测得的试验菌种发酵液的生物效价达到183.2μg/mL.对正交结果进行极差分析得知,发酵培养基中酵母粉质量分数对试验菌种发酵产抗生素影响最大,其次为玉米淀粉,再次为黄豆粉,硫酸铵对抗生素产量影响最小.筛选得到的最佳发酵培养基组成为:玉米淀粉100.0 g/L,黄豆粉50.0 g/L,硫酸铵6.0 g/L,酵母粉4.0 g/L.     

同工酶技术在金霉素链霉菌鉴别中的应用

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对四环素生产菌──金霉素链霉菌的酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶进行了测定。实验结果表明：①电泳条件不同对测定结果造成不同影响；②４个供试菌株的过氧化物酶同工酶谱基本相同，均有４条酶带，不能将各菌株区分开；③４个供试菌株的酯酶同工酶谱不完全相同。其中金霉素链霉菌１—２７Ｍ２６，７５－Ｓ－２和３￣＃菌株式１－２７Ｍ２６，１５￣＃和３￣＃菌株的酯酶同工酶谱不同，而７５—Ｓ—２和１５￣＃菌株的酶谱相同。１－２７Ｍ２６，７５－Ｓ－２或１５￣＃与３￣＃菌株是不同菌株。其酯酶同工酶谱可作为鉴别菌株的指标。     

卡那霉菌的紫外光致死诱变和光复活效应的研究

Fleming 1929年发现第一个抗生素——青霉素以来,至今人们已发现微生物产生的抗生素有9000多种,其中大部分由链霉菌产生,且卡那霉菌产生的卡那霉素等医用和农用商品抗生素就有70多种。人们以uv等物理因素辐射诱变,化学诱变,杂交,转化,原生质体融合等诸种不同方法提高各种     

卡那霉菌的紫外光致死诱变和光复活效应的研究

Fleming 1929年发现第一个抗生素——青霉素以来,至今人们已发现微生物产生的抗生素有9000多种田,其中大部分由链霉菌产生,且卡那霉菌产生的卡那霉素等医用和农用商品抗生素就有70多种.人们以uv等物理因素辐射诱变,化学诱变,杂交,转化,原生质体融合等诸种不同方法提高各种抗生素产生菌的产量与质量. uv诱变育种与重组频率高,重组范围大的其他几种方法相比,虽有不足之处,但由于该方法具有辐     

农用拮抗链霉菌9311的分离与鉴定

从我国山东省寿光市蔬菜土壤中分离到一株吸水链霉菌，编号为９３１１，经鉴定，该变吸水链霉菌属中的一个新菌株，室人和田间试验结果表明，该菌株产生的抗生素－－青草霉素对蔬菜灰霉病，早疫病表现出较为理想的拮抗作用，具有潜在的开发应用价值。     

从链霉菌中发现新抗生素的趋势分析

到目前为止，链霉菌是微生物中产生抗生素最多的菌种，据报道，从20世纪40年代后期到70年代，每年由链霉菌产生的抗生素几乎呈现指数增长，并在20世纪70年代达到最高峰，20世纪80年代后期到90年代增加幅度下降。收集到的数据显示一条S形曲线，比对数方程预测的曲线要平缓得多，在不断优化参数后为这条曲线建立1个较好的数学模型，根据这一模型可以估计链霉菌中还有多少没有被发现的抗生素，同时也便于预测不远的将来新抗生素产生的趋势。此模型估计在这类菌种中能产生的抗菌化合物的总数量约100000多种，而这只是迄今为止未发现抗生素中很微小的一部分。曲线中斜率的减少是由于筛选方法的减少，而不是由于新抗生素的枯竭，如果这种趋势任其发展下去，在近10～20年内斜率将会趋近于零，但如果不断地探索新的筛选方法，在未来的几十年里发现新抗生素的速度是不会下降的。     

抗生素S—921菌株的特性研究

通过对抗苹果树皮腐烂病抗生素S—921菌株特性的研究,发现其特性基本属于不吸水链霉菌类群但与不吸水链霉菌又不完全相同,因此,我们认为它是一个新的变种。     

抗生素80—7—A的分离与鉴别

从普拉特链霉菌８０－７发酵液中分离到抗生素８０－７－Ａ。该抗生素引起柑桔贮藏病害的指状青霉和白边青霉有较强的抑制作用，经鉴别，抗生素８０－７－Ａ很可能与已知核苷类抗生素杀结核菌素同质。     

五氯硝基苯的放线菌降解活性研究

从施用过五氯硝基苯(Pentachloronitrobenzene，PCNB)的土壤中分离得到高效放线菌菌株——金霉素链霉菌(Streptomyces aureofacients)，它能够依靠共代谢作用还原五氯硝基苯．实验确定了该菌株的适宜生长条件：温度25℃-30℃，pH值为7．0．在该菌株的作用下，PCNB的降解加速，半衰期低于27d．     

抗生素80－7－A的分离与鉴别

从普拉特链霉菌８０－７发酵液中分离到抗生素８０－７－Ａ．该抗生素对引起柑桔贮藏病害的指状青霉和白边青霉有较强的抑制作用．经鉴别，抗生素８０－７－Ａ很可能与已知核苷类抗生素杀结核菌素同质     

灰色链霉菌快中子诱变育种

快中子诱变抗生素菌种,应用于点青霉、红霉素链霉菌等已有报导。链霉素是个已生产了二十多年的老抗生素,生产水平已经很高,而且很不容易再提高。该菌种已经过常用的各种理化因子处理,但至今尚未见到快中子诱变灰色链霉菌的报导。我们用静电加速器产生的快中子辐照灰色链霉菌(Streptomyces griseus),作过十多批处理,经过两年多的菌种选育,证明适当剂量的快中子辐照能诱发灰色链霉菌的菌落形态、色素、生理特性、营养缺陷和产量等的突变,选育到年平均增产26.7％的高产菌株。     

阿维菌素的生物合成研究进展与展望

阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)由于可以产生杀虫抗生素---阿维菌素而备受研究者的青睐.多年来该菌得到了全面系统的研究,其基因组序列也已测定.文中综述了阿维链霉菌中阿维菌素生物合成代谢途径方面的研究,并对后续研究进行展望.     

Sanglifehrin A产生菌Streptomyces flaveolus DSM 9954遗传转化系统的建立

Sanglifehrin A的产生菌淡黄色链霉菌Streptomyces flaveolus DSM 9954,通过筛选,得到其菌丝培养基为TSB, 生孢培养基为ISP-4,抗性实验显示淡黄色链霉菌Streptomyces flaveolus DSM 9954对所选抗生素都较敏感. 利用原生质体转化和接合转移都成功地构建了两种遗传转移系统,并且从接合转移成功的链霉菌转化子中回收质粒pKC 1139,经EcoR Ⅰ单酶切电泳,验证了质粒确实通过接合转移从大肠杆菌转移至宿主链霉菌, 这为研究Sangl     

抗生素AGPM高产菌株选育及其蛋白差异分析

从土壤中分离得到一株能产生新型抗生素AGPM的藤黄灰链霉菌菌株,利用紫外线和硫酸二乙酯对新型抗生素AGPM产生菌藤黄灰链霉菌099菌株进行了联合诱变处理,最终得到了一株高产菌株TD0551,其抗生素AGPM产量可达到16．45mg/L,为出发菌株的2．1倍,应用蛋白质二维凝胶电泳技术分析了藤黄灰链霉菌的蛋白质组,比较了高产菌株与低产菌株在分泌AGPM过程中的蛋白质组差异。结果表明,在高产菌株的蛋白样品中有11个特异点,而在低产菌株的蛋白样品中有3个特异点,这些蛋白特异点可能与新型抗生素AGPM的合成有关。     

链霉菌NG-715抗真菌活性物质提取工艺的初步研究

为了探讨链霉菌NG-715所产抗真菌活性物质的存在部位,以及溶媒萃取法对活性物质进行分离的效果,以链霉菌NG-715发酵液为材料,那他霉素为对照抗生素,黑曲霉为指示菌进行生物活性测定.结果表明,链霉菌NG-715所产抗真菌活性物质主要存在于菌丝体中,酯类和醇类对其萃取效果较好.用乙酸乙酯对抗真菌活性物质进行两次萃取后,得率为94%.     

一株耐盐性链霉菌的鉴定及其抗菌活性

从厦门海岸潮间带红树林根系海泥分离到一株链霉菌S-111-9,能在含6～8％NaCl的高氏合成一号琼脂上生长;产生对革兰氏阳性、阴性细菌、酵母菌及霉菌有较强抑制作用的抗生素,其孢子丝直至波曲,偶而有螺旋,孢子圆柱形,表面有皱折;气生菌丝浅粉红色;基内菌丝褐色,无可溶性色素,该菌应归入链霉菌属(Streptomyces)粉红孢(Roseosporus)类群,而形态和生理特征与该类?的相近种华美链霉菌、玫瑰褐链霉菌和烟薰链霉菌有显著差别,可认为是一新种,?定名为厦海链霉菌(Streptomyces xia-baiensis n.sp.Zhou)。     

妥布霉素产生菌黑暗链霉菌F_(-211)发酵特性研究

从黑暗链霉菌Ｆ－２１１合成妥布霉素（Ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ）的发酵原理出发,研究黑暗链霉菌产生抗生素的特性,考察与生产妥布霉素紧密相关的种龄、周期、关键原料—油,和影响生物合成抗生素的各种主要因素,绘制出合理的发酵工艺控制图,优化发酵条件,使发酵单位提高了近一倍．