中华眼镜蛇毒神经生长因子的研究

采用ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ和ＳｅｐｈｏｓｉｌＣ８以及ＨＰＬＣ层析方法，自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子（ＮＧＦ），此ＮＧＦ经８ｄ鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经ＨＰＬＣ及聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组成，经ＳＤＳＰＡＧＥ及ＨＰＬＣ测定分子量分别为２４．１ＫＤ和２４．９ＫＤ，等电聚焦电泳测得ｐＩ为８．２，氨基酸组分分析表明ＮＧＦ含酸性氨基酸较少，通过１２５｜标记ＮＧＦ测定出ＮＧＦ在生物体内主要分布于肾、肺、及周围神经     

中华眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对人肺腺癌细胞株的影响

目的：了解中华眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对人肺腺癌细胞的影响。方法：采用体外细胞培养的方法,观察蛇毒灌胃后的兔血清对人肺腺癌细胞及人胚肺成纤维细胞的细胞毒作用,对细胞生长及分裂数的影响。结果：蛇毒灌胃后的兔血清能够明显抑制肺腺癌细胞的生长,且其抑制效应随剂量的增加而增加,但该血清对正常人胚肺成纤维细胞的生长却没有明显影响。结论：中华眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对肺腺癌细胞的生长有明显的抑制作用,且有高度的选择性。     

牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性的抑制作用

【目的】考察牛奶菜(Marsdenia sinensis)水提物对中华眼镜蛇(Naja atra)毒神经毒性的抑制作用。【方法】利用四通道离体组织灌流系统和昆明小鼠(Mus musculus)离体回肠标本检测牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性的抑制、即时中和与恢复作用。【结果】牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性有一定抑制作用。【结论】研究结果揭示了牛奶菜用于治疗中华眼镜蛇咬伤的有效性,为后续开发抗蛇毒药物奠定了基础。     

蛇毒组学与抗毒素组学:蛋白质组学技术在抗蛇毒血清效价评估中的应用

蛇毒组学以蛋白组学研究方法为基础,实现了大规模解析蛇毒全蛋白组构成特征,为深度探讨蛇毒功能与进化提供了有力支持.为探索更为优化的抗蛇毒血清效价评估方法,以蛇毒组学为基础的抗毒素组学策略应运而生,极大地提高了评估结果的精准度与可靠性.文章主要介绍了蛇毒组学研究与相关策略的发展以及抗蛇毒血清效价评估方法的迭代,旨在为蛇毒组...     

眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对人鼻咽癌CNE-2细胞株的影响

目的：了解眼镜蛇毒灌胃后的兔血清(serum of rabbit taking orally cobra venom,SRCV)对人鼻咽癌CNE-2细胞的影响。方法：采用体外细胞培养的方法,观察SRCV对人鼻咽癌CNE-2细胞及人胚肺成纤维细胞的细胞毒作用,及对细胞生长和分裂指数的影响。结果：发现SRCV能够明显抑制鼻咽癌CNE-2细胞的生长,且其抑制效应随剂量的增加而增加,但该血清对正常人胚肺成纤维细胞的生长却没有明显影响。结论：SRCV对鼻咽癌CNE-2细胞的生长有明显的抑制作用,并且有高度的选择性。     

中华眼镜蛇心脏毒素对疼痛及记忆的影响

通过热板法及醋酸扭体法观察中华眼镜蛇心脏毒素(CTX)对成年昆明种小鼠疼痛的影响,通过Y一型电迷宫及穿梭箱法研究CTX对东蓖若碱诱发成年昆明种小鼠学习记忆障碍的影响,利用跳台法研究CTX对东蓑若碱诱发成年BABL/C小鼠学习记忆障碍的影响,利用Morris水迷宫法研究CTX对对东蓖若碱诱发成年C57BL/6J小鼠学习记忆障碍的影响。实验发现,CTX能明显增加热刺激引起的疼痛闭值,明显减少醋酸引起的扭体次数,并能显著增加小鼠在Y型迷宫实验中的正确反应次数,减少在穿梭箱实验中小鼠重新训练至学会标准的训练次数及小鼠的反应时间,能增加小鼠在跳台法中的潜伏期,减少错误反应次数,减少小鼠在Morris水迷宫实验中的寻台时间和游泳路程,以上效果均表现出明显的剂量依赖性。以上结果提示,CTX有良好的镇痛作用以及对东莫若碱诱发的小鼠学习记忆障碍的改善作用,这可能是由于CTX与眼镜蛇神经毒素(NT)三维结构相似而导致了相似的生物学效应。     

蛇毒抗肿瘤活性成分的研究进展

癌症严重威胁人类健康,寻找有效的抗癌药物与方法,彻底攻克癌症,是世界医学界重要的研究课题.目前治疗癌症常用的药物一般为合成药物,但合成药物在治疗中可能会出现明显的毒副作用,天然药物越来越受到人们的重视.天然毒素在生物学、医学及药学等许多领域有广阔的应用前景,其中蛇毒的研究最为广泛.蛇毒的成分复杂且毒性较大,但研究发现蛇毒的许多组分可以抑制肿瘤生长,对肿瘤的治疗有很好的临床效果.概述了近年来关于蛇毒抗肿瘤的活性成分及机制的研究进展.     

中华眼镜蛇毒抑制豚鼠至大鼠异种肾移植超急性排斥反应的实验研究

目的：探讨中华眼镜蛇毒对异种移植超急性排斥反应的影响。方法观察质量分数为0．1％中华眼镜蛇毒（0．4mg／kg)腹腔注射豚鼠到大鼠异种移植肾存活时间、病理及血清补体C3的影响。结果中华眼蛇毒能延长移植肾存活时间、降低受体血清C3水平,减轻移植肾病理损害,结论：补体抑制剂中华眼镜蛇毒能有效抑制效制豚鼠到大鼠的异种超急性排斥反应。     

木贼活性成分对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

以木贼为材料,研究木贼的提取物对蘑菇酪氨酸酶的效应.结果表明,木贼的乙醇提取物对蘑菇酪氨酸酶有较强的抑制作用,其IC50值为0.375 mg/mL,抑制机理为可逆混合型.DPPH实验显示木贼的乙醇提取物具有较强的抗氧化作用,说明木贼乙醇提取物通过清除氧自由基来抑致黑色素生长的作用.     

氨基酸对中华仓鼠卵巢（CHO）细胞在无血清培养基中的作用

研究了１５种氨基酸对中华仓鼠卵巢细胞在无血清培养基中的作用。实验表明，添加的精氨酸，亮氨酸，脯氨酸及蛋氨酸对细胞生长有明显的促进作用；而高浓度的丝氨酸，色氨酸则对细胞生长有明显的抑制作用；其它几种氨基酸在细胞不同生长时期所起的作用为不同。     

中华眼镜蛇毒组份Ⅲ的碘化标记物制备及质量鉴定

目的：研究对眼镜蛇毒(Naja naja atra venom)组份Ⅲ进行^125I放射性标记的方法及其质量评价．方法：用氯胺-T法碘化标记眼镜蛇毒组份Ⅲ．结果：用氯胺-T法按^125I标记组份Ⅲ，标记物放化纯为98．38％，比活度为0．945mCi／mg，RF值为0．76，每个组份Ⅲ分子上带0．56个^125I原子，与非标记组份Ⅲ有相同的生物学活性和理化性质．结论：所标记的眼镜蛇毒组份Ⅲ符合放射结合分析的要求．     

眼镜蛇毒神经生长因子对成年猫坐骨神经损伤治疗效果的实验室观察

目的 :探讨从眼镜蛇毒分离纯化出的神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)对成年猫坐骨经损伤后的影响。方法 :本实验制成成年猫坐骨神经损伤模型 ,损伤局部注射蛇毒NGF(2μg/kg/d) ,分别治疗10d和30d ,并与对照组(损伤坐骨神经 ,不给药物)比较。结果 :眼镜蛇毒NGF在神经损伤早期应用能减轻神经纤维发生的溃变 ,促进神经纤维再生。结论 :损伤局部长时间注射NGF会导致神经纤维增生过度 ,丧失传导功能     

福建连江产眼镜蛇（Naja naja atra）核型及等臂染色体研究

本文较详细地分析了福建连江产眼镜蛇的核型,绘出其染色体组型模式图。它与浙江产眼镜蛇的核型相比,有一对大染色体着丝点位置差异显著。文中首次报道了眼镜蛇的等臂染色体,并初步探讨了用双线期染色体进行蛇类染色体组型分析的方法。     

蛇毒类凝血酶研究进展

对有关蛇毒类凝血酶(SVTLEs)的分布分类、理化性质、酶学性质、结构特征、基因克隆表达、临床应用等方面的研究资料进行了概括和综述.结果发现:SVTLEs主要分布在蝮亚科和蝰科毒蛇的毒液中;根据SVTLEs水解纤维蛋白原释放FPA和FPB的速度不同,可将其分为SVTLE-AB、SVTLE-A和SVTLE-B等3类;多数SVTLEs的分子量在30~50 kD,含6个二硫键,pI较低,部分SVTLEs的pI较高;SVTLEs可水解TAME和BAEE,其活性可被DFP和PMSF所抑制,但不被胰蛋白酶trypsin及凝血活性中心His的专一抑制剂TLCK和EDTA抑制;对SVTLEs的一级结构和二级结构研究较多,对高级结构研究有待深入;很多SVTLEs基因在大肠杆菌中成功获得了表达,但表达物不能被糖基化和正确折叠,故没有活性或活性不高,而其在真核表达系统中表达活性较高;部分碳水化合物具有稳定SVTLEs结构及提高SVTLEs的酶活力的作用;SVTLEs的临床应用涉及心肌梗塞、缺血性中风、血栓性疾病等疾病的治疗.SVTLEs未来的研究重点将集中于其在真核表达系统的表达和对其高级结构的解析.     

蛇毒神经生长因子的分离纯化及鉴定

采用Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ５０、ＣＭ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ３２柱层析，从中华眼镜蛇中分离出神经生长因子（Ｎｅｒｖｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｅｒ，ＮＧＦ）。经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ法证明所得以的ＮＧＦ为单一组分，相对分子质量约为１．３×１０＾４。经凝胶等电聚焦电泳测得ＮＧＦ等电点ＰＩ约为７．０左右。经ＨＰＬＣ及电泳图像分析系统测得纯度为９８％。此ＮＧＦ等８ｄ鸡胚背     

黑老虎醇提物对尖吻蝮蛇毒主要酶类的抑制作用

【目的】探究中草药黑老虎(Kadsura coccinea)醇提物对尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒中主要酶类的抑制作用。【方法】用体积分数为75%的乙醇溶液浸泡黑老虎后再进行超声波处理得到醇提物;通过体外酶活抑制实验分别检测醇提物对尖吻蝮蛇毒中磷脂酶A2、蛋白水解酶、透明质酸酶、类凝血酶的抑制作用。【结果】黑老虎醇提物对尖吻蝮蛇毒中的蛋白水解酶、磷脂酶A2和透明质酸酶具有明显的抑制作用。当蛇毒与醇提物的质量比分别为1∶100,1∶10和 1∶5时,后者能抑制蛇毒中98%磷脂酶A2活性、79%蛋白水解酶活性和65.14%透明质酸酶活性。同时,醇提物能够明显抑制尖吻蝮蛇毒水解纤维蛋白原和类凝血酶的活性。【结论】研究结果证实了黑老虎醇提物能有效抑制尖吻蝮蛇毒中的主要酶类,为深入研究黑老虎药材的抗蛇毒机制提供了理论依据。     

蛇莓乙醇提取物抑制尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶活性初探

【目的】初步探究蛇莓(Duchesnea indica)对尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒蛋白水解酶的抑制作用。【方法】采用不同极性有机溶剂对蛇莓乙醇提取物进行分级萃取,结合硅胶薄层层析(TLC)进行分离,再利用气相色谱-质谱法(GCMS)对抑制蛋白水解酶作用最强的活性部位进行组分分析。【结果】乙酸乙酯萃取相具有较强的抑制尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶活性;经硅胶TLC分离从中获得条带1、条带2、条带3和条带4共4个条带,且条带4的尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶抑制活性最强。通过GC-MS分析检测出条带4中存在15种成分,其中2,4-二叔丁基苯酚、正十六烷酸、十八烷酸、十六烷酸,2-羟基-1-(羟甲基)乙酯、硬脂酸-2-羟基-1-(羟甲基)乙酯和10,13-十八碳二炔酸甲酯可能与抑制蛇毒活性相关。【结论】蛇莓中存在抑制尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶的功效组分,可以作为蛇伤药物开发的资源。     

蟾酥对蟾蜍心电活动的影响

利用生物机能实验系统对用不同浓度的蟾酥溶液处理后的蟾蜍的心率和心电图各项指标进行测定和分析,结果表明:在一定范围内,随着蟾酥浓度的增大,蟾蜍的心率加快;心电图中R波的电压峰值降低、Q-T间期的时值缩短;而P-R间期、QRS期的时值延长.并且这些变化在给药后1~1.5 h达到最大,在2 h时,各指标均有所恢复.由此可见,蟾酥对蟾蜍的心电活动有一定的影响.