龙葵碱对HepG2细胞内[Ca2+]i的影响

探讨龙葵碱对HepG2细胞形态及细胞内[Ca~(2 )]i的影响,揭示龙葵碱诱导细胞凋亡的机制.以人肝癌细胞HepG2为研究对象,采用AO/EB双染HepG2细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察细胞形态学改变,Fluo-3/AM单染HepG2细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察细胞内[Ca~(2 )]i的改变.结果发现龙葵碱作用于HepG2 48h后,细胞形态出现典型的细胞凋亡形态;细胞内[Ca~(2 )]i浓度明显升高.表明龙葵碱升高细胞内Ca~(2 )浓度启动细胞凋亡机制.     

纸浆纤维对钙离子吸附行为及机理

以去金属离子处理后的漂白硫酸盐桉木浆及针叶木浆为原料,研究纸浆纤维对Ca2+的吸附动力学及影响吸附的因素。结果表明:Ca2+初始浓度较低时,漂白化学木浆对Ca2+的吸附能力随着Ca2+初始浓度的增加而快速提高。Ca2+初始浓度0.471 7 mmol/L时,阔叶木浆达到饱和吸附,吸附量为0.016 0 mmol/g;针叶木浆在Ca2+初始浓度为0.220 1 mmol/L时就达到饱和吸附,吸附量为0.008 4 mmol/g,吸附能力与针阔叶浆各自所带羧基量一致。在pH 7.5、温度25℃条件下,符合Langmuir方程等温吸附线,且纸浆对Ca2+的吸附为单分子吸附。Ca2+浓度和pH的升高将使纸浆纤维对Ca2+的吸附能力提高,阔叶木浆和针叶木浆中Ca2+加入量为0.035 6和0.016 5 mmol/g时,木浆达到饱和吸附。pH超过7,纸浆表面游离羧基将完全被Ca2+吸附;纸浆纤维对Ca2+的吸附属放热吸附,提高温度将会降低纸浆纤维对Ca2+的吸附量。     

心肌细胞兴奋-收缩耦联过程中钙离子调控的研究进展

Ca^2＋作为细胞内重要的信使在心肌细胞兴奋-收缩耦联过程中起到重要作用,我们将钙离子对心肌细胞兴奋-收缩耦联过程的调控分为三个阶段：上游调控（胞浆中Ca^2＋升高）,中枢调控（Ca^2＋与肌钙蛋白C结合）,下游调控（粗细肌丝结合,形成横桥循环）。本文将对近几年发现的Ca^2＋在兴奋-收缩耦联过程中的调控作用进行介绍。     

甜菜碱通过钙通道升高鼠脾淋巴细胞内[Ca^2＋]i研究

研究甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度的变化及相关钙通道的研究．应用激光共聚焦显微镜（LSCM）测小鼠脾淋巴细胞内钙浓度的变化，应用不同钙通道阻滞剂研究甜菜碱影响细胞内钙浓度变化途径．对终浓度4mmol／L甜菜碱作用淋巴细胞不同时间的细胞内钙离子浓度值分析表明：甜菜碱可以使淋巴细胞内Ca^2＋浓度升高，6h后效果最明显；对加入不同阻滞剂细胞内钙离子浓度变化分析表明：钙通道及蛋白阻滞剂硝苯地平、地尔硫卓、咪贝地尔、金雀异黄素对甜菜碱升高淋巴细胞内钙离子浓度没有影响；维拉帕米、新霉素、肝素、普鲁卡因能阻断甜菜碱对淋巴细胞内钙离子浓度的升高作用．由此可知：细胞内钙离子浓度升高主要通过以下途径：在G蛋白介导下通过影响L-型电压门控钙通道的仅。亚单位而引起外钙内流；通过影响胞内钙库的ILR钙通道和RyR钙通道而引起内钙外排．其共同引起胞质钙离子浓度增加．     

荧光分析技术在细胞内Ca~(2+)研究中的应用及钙离子比率荧光测量方法

Ca2 作为重要的细胞信号,在细胞信息传递中发挥着广泛而重要的作用,对活细胞内Ca2 进行准确、实时、原位的测量,是对其定量分析的关键.由于胞内Ca2 的浓度很低,并呈现复杂的时 空特异性等特点,因此,灵敏度较高的荧光分析技术在活细胞内Ca2 研究中的应用越来越广泛.综 述了这一方法的原理、应用价值、研究意义,并重点介绍了其中一种先进的技术方法--Ca2 比率 荧光测量方法.     

大黄酸对IL-2诱发T淋巴细胞增殖和细胞[Ca2+]i变化的作用

研究大黄酸对IL-2引起大鼠T淋巴细胞增殖和细胞内[Ca2+]i变化的影响.采用MTT法检测细胞增殖,用单细胞钙成像系统记录胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i).结果表明,大黄酸对IL-2引起的细胞增殖有显著抑制作用,且抑制效果与剂量有关;IL-2引起[Ca2+]i升高,并持续维持高[Ca2+]i水平,[Ca2+]i升高的机制包括胞内Ca2+释放和胞外Ca2+内流;大黄酸显著抑制IL-2引起的[Ca2+]i升高.结果提示大黄酸可抑制T淋巴细胞增殖,作用机制可能与抑制细胞内[Ca2+]i升高相关.     

科罗索酸诱导细胞内ROS及Ca2+超载抗人结肠癌的研究

为了研究科罗索酸对人结肠癌SW480细胞的抗增殖、促凋亡作用及其机制,分别采用不同浓度的科罗索酸干预SW480细胞24和48 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力并计算半数抑制浓度(IC_(50));使用4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)染色以及Annexin V-FITC/PI双染检测科罗索酸诱导细胞凋亡的作用;通过单克隆实验考察科罗索酸对SW480细胞增殖能力的影响;采用2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法和二氢乙啶(DHE)超氧化合物阴离子荧光探针法检测科罗索酸对SW480细胞内的活性氧(ROS)浓度的影响;荧光探针(JC-1)检测细胞线粒体膜电位;Ca~(2+)荧光探针Fluo-4AM检测细胞内Ca~(2+)浓度;蛋白质免疫印迹法检测科罗索酸对线粒体凋亡通路相关蛋白Cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2和Cleaved PARP表达的影响。结果表明:科罗索酸干预细胞24和48 h的半数抑制浓度分别为12.13和7.79μmol/L;低于半数抑制浓度的科罗索酸可以显著抑制SW480细胞的增殖;与空白对照组相比,科罗索酸(3.75、7.5和15μmol/L)干预SW480细胞后,其细胞凋亡率分别为20.05%、20.95%和31.60%,线粒体膜电位显著下降;同时,Cleaved Caspase-3、Bax和Cleaved PARP蛋白表达水平显著上升,Bcl-2表达水平显著降低,科罗索酸激活线粒体凋亡通路诱导SW480细胞凋亡。科罗索酸可以明显抑制SW480细胞的增殖并激活线粒体凋亡通路发挥抗肿瘤作用,其机制与上调细胞内活性氧浓度和Ca~(2+)超载有关。     

15 － KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响

摘要: 目的探讨15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞内Ca2 + 的作用及其来源。方法以酶法( 胶原酶Ⅰ型和弹性 酶) 分离培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞,将细胞稀释所需密度( 2 × 105 个/mL) ,加样于6 孔板中的盖玻片上,放 入37℃孵箱中培养12 h,细胞贴壁后,取出6 孔板中的盖玻片,放入特制的小槽内,D-Hanks 液冲洗细胞3 次,加入 1 × 10 － 5mol /L 的Flou-3 /AM,置37℃孵箱中避光孵育约30 min,用D-Hanks 液洗去细胞外残留染料,应用激光扫描 共聚焦显微镜技术,测定了15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞游离钙离子浓度的影响。结果1) 15-KETE ( 1 × 10 － 8-1 × 10 － 6 ) mol /L 可依赖性引起肺动脉平滑肌细胞内钙离子浓度( ［Ca2 +］i) 增加; 2) 1 × 10 － 6 mol /L 维拉米( L-型钙离子通道阻断剂) 和无钙离子细胞外液显著阻抑了1 × 10 － 6 mol /L 15-KETE 引起肺动脉平滑肌［Ca2 +］i 增 加。结论15-KETE 可引起大鼠肺动脉平滑肌［Ca2 +］i 增加,并且此钙来源于细胞外液钙离子。     

Ca2+和Co2+对百合切花保鲜效果的影响

探讨了不同浓度处理的无机盐CaCl2和CoNO32溶液对瓶插百合切花保鲜效果的影响.结果表明:CaCl2和CoNO32配合使用可以使百合切花花枝硬挺,花径增大,改善切花的观赏品质,延长瓶插寿命;同时,还具有保持百合切花花枝鲜重、维护花瓣细胞膜透性的稳定、维持瓶插溶液pH值保持在适合的浓度范围之间、缓解叶绿素的降解等作用.通过对各处理的各项指标的综合观测与分析可知,以0.1%CaCl2和0.05‰CoNO32溶液的配合使用对百合切花的保鲜效果最好.     

Zn2+、Ca2+及其相互作用对大蒜根尖生长和细胞分裂的影响

用不同浓度的Zn2+、Ca2+和Zn2++Ca2+溶液处理大蒜鳞茎发现;Ca2+能抑制Zn2+的毒害,明显提高细胞分裂比率,促进根尖生长,降低异常细胞比率.基本趋势为根的长度和细胞分裂比率为Ca2+>Zn2++Ca2+>Zn2+,异常细胞比率为Ca2+>Zn2+>Ca2++Zn2+.     

生物细胞内游离阳离子的核磁共振检测

细胞内游离阳离子在生物生理过程中起着非常重要的作用。核磁共振(NMR)作为一种无创伤研究生物样品的测试方法,可以实时、动态地检测细胞内阳离子浓度,对研究阳离子在生理病理过程的作用有重要意义。综述了NMR技术在生物细胞内阳离子检测中的应用并展望了其发展方向。     

不同质量浓度的Ca^2＋溶液浸种对黄瓜种子萌发的影响

以黄瓜种子为试材,研究了不同质量浓度的Ca2+溶液浸种对其萌发的影响,结果表明,用ρ=0.01～0.5 g·L-1的Ca2+溶液处理后,黄瓜种子的发芽率、发芽势、苗高、发芽指数、活力指数均提高,但外渗电导率降低,其中以ρ(Ca2+)=0.05 g·L-1的处理效果最好.当Ca2+质量浓度≥1 g·L-1时,反而不利于种子萌发.     

四种木本植物叶芽不同生长期SOD的检测研究

对枫藤等植物叶芽不同生长期的SOD使用连苯三酚自氧化法进行了检测,以确定SOD含量较高的植物材料及其所在生长阶段,并研究了Mg2+及Ca2+对雪松SOD活力的影响。实验表明,枫藤叶芽在开始取样后第9天SOD活力达到最大值,为159.24 u?g-1;辽东冷杉与雪松在第一次取样时SOD活力达到最大值,分别为83.57,190.71 u?g-1; Mg2+,Ca2+加入均在0.1mL(4mg/mL)时,对雪松SOD活力的增强作用达到最大,分别为148 %,138 %。     

钙离子对钙调神经磷酸酶B亚基结构和功能的影响

应用原紫外CD光谱、内源荧光光谱以及ANS荧光光谱探究了Ca~(2+)对钙调神经磷酸酶(CN)调节亚基(CNB)结构和功能的影响.结果显示:Ca~(2+)能够激活CN磷酸酶活性提高到约1.5倍;CD谱显示结合Ca~(2+)后CNB出现α-螺旋含量上升、无卷曲含量下降、分子有序性升高等现象;!源荧光光谱显示结合Ca~(2+)导致CNB结构更加紧凑;ANS荧光光谱显示Ca~(2+)结合导致其疏水性增强.结合Ca~(2+)后,CNB分子有序性升高,结构更加紧凑,疏水表面暴露.这些结构变化促进了其与CNA的结合并激活了CNA的磷酸酶活性.     

Ca2+促进丝瓜离体生根（英）

Ca2+信使系统是植物体内重要的信号通路,它将许多细胞外信号转化为细胞内的信号以影响许多蛋白激酶活性,从而引起植物生长发育的多种反应.在正常Ca2+浓度下,仅激素处理不能生根的丝瓜外植体,处以不同Ca2+浓度处理时,随Ca2+浓度升高,外植体生根数明显加快并增多,且有少量植株叶腋处异化生根,在一定程度上改变了腋芽的发育方向,这说明Ca2+改变了卷须芽或花芽的发育方向,使其发育为根.但Ca2+超过一定浓度后会影响外植体的正常营养生长.     

Ca2+、琼脂及其协同效应对噬菌体分离的影响

为提高噬菌体的分离效率和保留分离噬菌体的生物多样性,试验以大肠杆菌为指示菌和噬菌体P1为模型,顶层培养基分为4个处理组,每组3个重复,采用2×2(Ca²⁺×琼脂)试验设计,研究顶层培养基不同水平的Ca²⁺和琼脂对菌斑生成量和形态特征的影响。顶层培养基Ca²⁺的添加量分别为0、2m M,琼脂的添加量分别为0.35%、7.0%。结果表明：培养基中添加Ca²⁺对菌斑生成量影响显著提高(P<0.01),而菌斑目测直径最大;培养基中琼脂浓度对菌斑生成量影响显著(P<0.01),琼脂浓度对菌斑生成量呈负效应,与生成量相同,菌斑目测直径也呈负效应;Ca²⁺和琼脂的协同作用对菌斑生成量影响显著(P<0.01),也对菌斑目测直径具有影响。说明Ca²⁺、琼脂及其协同对噬菌体P1的成斑状态具有显著的影响,可为今后噬菌体分离提供理论参考。     

Ca~(2+)对普通念珠藻(Nostoc commune Vanch.)生长影响的试验

对普通念珠藻(NostoccommuneVanch.)进行了生长条件的探索研究。初步研究结果表明:普通念珠藻的生长需要最适光照强度为2200lux左右,最适温度25℃,生长最适点pH=8;在0.02%的Ca2+浓度下的生长状况最好。     

外源Ca2+对南林895杨扦插苗 光合作用及生长的影响

以南林895杨扦插苗为试验材料,用不同浓度的CaCl2溶液叶面喷施处理20 d后,研究扦插苗光合作用参数的变化及其生长情况。结果表明：(1)不同浓度外源Ca2+处理下扦插 苗净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、细胞间CO2浓度(Ci)均呈现先升高后下降的趋势。随着Ca2+浓度的升高,20 mg/L Ca2+处理下Ci值最大;但Pn、Tr、Gs在200 mg/L Ca2+处理下才达到最大值,且与对照差异性显著,分别比对照高22.34 %、57.76 %、105 %。(2)外源Ca2+处理可显著提高扦插苗株高和地径的生长量,与对照相比其差异性达 到显著或极显著水平,其中200 mg/L Ca2+处理对株高、地径的促进作用最为明显,分别比对照高25.74 %和70.15 %。说明适宜浓度的外源Ca2+可以改善杨树扦插苗光合作用状况, 从而有效地促进扦插苗的生长。     

镉对油菜花粉细胞内钙离子浓度的影响

应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和fluo-3 AM荧光探针标记技术,观察了不同浓度Cd2+对油菜花粉细胞内游离Ca2+的影响。发现油菜花粉经水合培养后,胞内Ca2+呈极性分布,萌发沟附近浓度较高,花粉管萌生部位浓度最高;胞外环境中Cd2+可使细胞内游离Ca2+的浓度升高,表明油菜花粉受重金属Cd2+毒害后,可通过调动胞质内游离Ca2+的变化而做出对外界刺激的应答。这一实验结果为探索重金属对植物的毒害机理提供了新的证据。     

心肌细胞原代培养系统的建立及比率荧光技术对细胞内游离钙离子浓度的测定

以Fura-2/AM为指示剂,应用比率荧光测试技术,分别测定心肌细胞和B16细胞单个细胞 内游离钙离子浓度的变化.通过实验,建立了新生大鼠心肌细胞的原代培养系统,并将其应用于 [Ca2 ]i的比率荧光测量.结果显示,心肌细胞在滴加了NE之后,相对荧光强度有明显变化,肯定 了测试系统的有效性,并进一步筛选出适于B16细胞比率荧光测量[Ca2 ]i的各项参数.