GDNF家族及其受体

胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对多巴胺能神经元、运动神经元、感觉神经元等多种神经元均具有营养及损伤后修护作用.GDNF的神经营养作用主要是通过胶质细胞源性神经营养因子受体-α(glial cell line-derived neurotrophic factor receptors-α,GFRα)亚基和受体酪氨酸激酶Ret亚基两类受体亚基介导.     

急性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内GDNF表达的影响

目的：探讨急性应激对小鼠空间学习记忆功能的影响及其机制。方法：采用足底电击的方法建立急性应激模型小鼠,通过Morris水迷宫实验观察小鼠空间学习记忆功能的变化;并且测定小鼠海马和前脑皮层胶质细胞源性神经营养因子的表达。结果：与对照组小鼠相比,在水迷宫实验中,急性应激组小鼠空间学习记忆显著提高（P〈0.05）;脑内海马CA1区、CA3区、齿状回和前脑皮层GDNF的表达明显增强（P〈0.01）。结论：急性应激使小鼠空间学习记忆功能的提高可能与GDNF表达的上调密切相关。     

GDNF对睾丸功能的调节

在睾丸中,Sertoli’s细胞等细胞表达胶质细胞源神经营养因子（Glial cell line—derived neuotrophic factor,GDNF）,通过旁分泌或自分泌方式作用于生精细胞和Sertoli’s细胞等,调节精原干细胞（Spermatogonial stem cells,SSCs）的自我更新和分化,并促进Sertoli’s细胞的增殖以及血睾屏障的形成等。     

GFP标记的GDNF重组腺病毒载体的构建和体内外表达

通过构建绿色荧光蛋白(GFP)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)共表达的腺病毒载体,讨论其在治疗脊髓和脑有关神经系统疾病的潜在应用价值,了解腺病毒载体在大鼠体内的分布及在体外分泌外源基因产物能力,并对其生物安全性作了初步考察,为GDNF重组腺病毒载体在临床和基础研究中的应用作了一定准备．     

慢性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内GDNF的影响

探讨慢性应激对小鼠空间学习记忆功能的影响及其机制.通过Morris水迷宫试验测试小鼠的空间学习记忆能力;检测胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在海马和前脑皮层的表达.结果显示,应激组小鼠慢性应激后,与对照组相比,空间学习与记忆能力明显降低(P＜0.01),海马CA1、CA3区、齿状回和前脑皮层GDNF表达明显下降(P＜0.01);应激停止后一周,应激组小鼠空间学习与记忆能力有所恢复但仍弱于对照组小鼠,且有显著性差异(P＜0.05);GDNF在各脑区的表达有所恢复,但与对照组相比,仍有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结果提示,慢性应激导致小鼠空间学习记忆功能的损伤可能与GDNF表达的变化密切相关.     

针刺对卒中后抑郁患者tPA/BDNF通路相关神经调节因子的影响

为观察针刺对卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)患者组织纤溶酶激活因子(tPA)/脑源性神经营养因子(BD-NF)通路相关神经调节因子的影响.随机选取40例PSD患者分为对照组和研究组,对照组采用度洛西汀胶囊口服治疗,服用方法一日1次,每次1片.研究组在度洛西汀胶囊口服治疗基础上予针刺治疗.疗程均为14 d.观察治疗前后临床疗效,汉密尔顿抑郁量表(HAMD)积分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)积分变化.采用ELISA法检测患者血清tPA、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、BDNF、酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白表达.qPCR检测外周血tPA、PAI-1、BDNF、TrkB mRNA表达.结果 表明:针药组总有效率高于对照组(P＜0.05).与治疗前比较,对照组、针药组治疗后HAMD、NIHSS评分降低(P＜0.05或P＜0.01).与对照组治疗后比较,针药组治疗后HAMD评分降低(P＜0.01).与治疗前比较,对照组、针药组治疗后BDNF、TrkB、tPA、PAI-1表达升高,BDNF、TrkB、tPA、PAI-1 mRNA升高(P＜0.01).与对照组比较,针药组治疗后BDNF、TrkB、tPA、PAI-1表达升高,BDNF、TrkB、tPA、PAI-1 mRNA表达升高(P＜0.05或P＜0.01).可见针刺可以调节tPA/BDNF通路相关神经因子表达,改善PSD患者神经功能.     

慢性应激对小鼠空间学习记忆功能及海马和前额叶皮层BDNF表达的影响

采用多因素慢性应激动物模型,通过Morris水迷宫测试小鼠空间学习记忆能力;采用免疫组织化学方法检测脑源性神经营养因子（BDNF）在海马和前额叶皮层的表达．结果显示,与对照组相比,应激组小鼠的空间学习记忆能力明显下降（P〈0．01）;应激组小鼠海马CA1区、齿状回和前额叶皮层BDNF表达明显下降（P〈0．01）;停止应激后一周,应激组小鼠BDNF在各脑区的表达有一定恢复,但与对照组相比,仍有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）．结果表明,慢性应激导致小鼠空间学习记忆功能的损伤可能与BDNF表达的下调密切相关．     

脯氨酸羟化酶抑制剂对缺氧环境下大鼠视网膜神经胶质细胞中脯氨酸羟化酶2表达的影响研究

观察在脯氨酸羟化酶抑制剂(PHI)干预下,脯氨酸羟化酶2(PHD 2)在缺氧环境下大鼠视网膜神经胶质细胞中的表达变化,探讨其与眼内相关增生因子表达的关系。原代培养大鼠视网膜神经胶质细胞,鉴定后传代培养,并分为3组:正常对照组(control)、缺氧组(hypoxia)、干预组(intervention)。正常对照组不做特殊处理;缺氧组加入200μmol/L缺氧诱导剂氯化钴(CoCl_2);干预组加入500μmol/L的脯氨酸羟化酶抑制剂。免疫荧光化学染色法观察各组PHD 2和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达,RT-PCR检测PHD 2、VEGF mRNA水平,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测各组细胞增殖活性,Annexin V-FITC鉴定各组细胞凋亡情况。对照组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF的表达比较弱,呈弱荧光染色;缺氧组视网膜神经胶质细胞中PHD 2及VEGF的表达明显增强,呈强红色荧光及强绿色荧光;干预组PHD 2及VEGF的表达明显低于缺氧组。RT-PCR分析结果表明:对照组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF mRNA都呈弱表达;缺氧组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF mRNA表达量明显增多;干预组中PHD 2、VEGF mRNA表达量较对照组轻度增多,但较缺氧组明显减少。缺氧组视网膜神经胶质细胞的增殖活性明显高于正常对照组(P0.001);干预组视网膜神经胶质细胞的增殖活性高于正常对照组(P=0.001);但是干预组视网膜神经胶质细胞增殖活性明显低于缺氧组(P=0.001)。干预组和对照组视网膜神经胶质细胞的凋亡明显高于缺氧组(P0.001);干预组视网膜神经胶质细胞的凋亡高于正常对照组(P0.001)。缺氧环境可诱导视网膜神经胶质细胞中PHD 2、VEGF mRNA的表达增高,刺激神经胶质细胞的增殖,减缓细胞凋亡;脯氨酸羟化酶抑制剂可有效抑制缺氧环境下PHD 2增高引起的神经胶质细胞的增殖和VEGF mRNA的表达。     

慢性应激性抑郁发生中海马糖皮质激素对BDNF的影响

为证明慢性应激性抑郁的发生与应激引起的糖皮质激素(Glucocorticoids,GCs)分泌增加,导致海马脑源性神经营养因子(Brain Derived Neurothrophic Factor,BDNF)表达抑制有关.实验用大鼠通过建立慢性不可预见性温和应激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)抑郁模型,通过海马微量注射皮质酮及糖皮质激素受体拮抗剂米司非酮,然后测量体重,观测行为学表现,并用酶联免疫吸附法检测海马内GCs和BNDF含量.结果显示:CUMS明显诱发大鼠抑郁样行为,海马组织中皮质酮明显升高,BDNF水平明显下降.海马微量注射米司非酮,使CUMS诱发的大鼠抑郁样行为明显改善,且BDNF水平明显升高.正常大鼠海马微量注射皮质酮后,表现出与CUMS组相似的抑郁样行为,且海马组织中BDNF明显下降.以上结果表明,慢性应激引起大鼠海马皮质酮明显升高,使海马BDNF表达明显减少,导致抑郁发生.糖皮质激素Ⅱ型受体(Glucocorticoids Receptor,GR)起着重要作用.     

大鼠皮层运动中枢出血模型的制备

目的研究大鼠皮层运动中枢出血模型制备的可行性.方法立体定位下向皮层运动中枢区注入自体动脉血,连续观察术后10 d内模型的肢体运动情况及组织形态学变化.结果所有实验动物均成活,单肢瘫痪明显,组织形态学改变显著.结论立体定向术回输自体动脉血于皮层运动中枢制成的模型成活率高,症状明显,操作方便.     

尼莫地平对蛛网膜下腔出血大鼠脑功能的改善作用

目的探讨尼莫地平对SAH大鼠脑功能改善作用,并分析相关机制.方法采用枕大池二次注血法建立大鼠SAH模型,通过神经行为学评分,经颅多普勒超声检测基底动脉的平均血流速度,HE染色法观察脑形态学改变,脑含水量检测分析尼莫地平对SAH的治疗机制.结果与假手术组相比,SAH组大鼠出现明显的神经运动功能障碍体征,其神经行为学评分明显降低;与SAH组相比,尼莫地平组大鼠神经运动功能障碍体征明显减轻,神经行为评分明显高于SAH组.颅超声多普勒检测结果表明:SAH组大脑基底动脉血流速度明显加快,而经过尼莫地平治疗后,其血流速度明显降低;HE染色发现:SAH组大鼠脑中可见明显的出血灶,神经元数目减少,神经元及神经胶质出现肿胀,尼莫地平能够明显减轻SAH后的脑损伤;大鼠SAH时,脑水含量明显增加,尼莫地平既能减轻血管源性脑水肿症状,又减轻细胞毒性脑水肿症状.结论尼莫地平能改善神经运动功能障碍,其机制与降低基底动脉血流速度、减轻神经细胞、胶质细胞肿胀及减轻脑水肿有关.     

自拟方“通痹祛风汤”对大鼠急性痛风性关节炎抗炎作用研究

目的:观察"通痹祛风汤"对急性痛风性关节炎模型大鼠不同时相的影响,探讨其治疗急性痛风性关节炎的作用机制.方法:注射尿酸钠建立大鼠痛风性关节炎模型,大鼠灌胃给药,观察对大鼠关节肿胀率及关节滑膜囊表达IL-1 mRNA和TNF-mRNA(RT-PCR)的影响.结果:"通痹祛风汤"可有效抑制大鼠踝关节肿胀程度;关节滑膜囊TNF-mRNA和IL-1 mRNAr的表达明显减低.结论:"通痹祛风汤"可抑制痛风性关节炎TNF-和IL-1的产生而发挥抗炎作用,明显减轻关节的病理性损伤,有效抑制关节炎的临床进程.     

自拟方"通痹祛风汾"对大鼠急性痛风性关节炎抗炎作用研究

目的:观察"通痹祛风汤"对急性痛风性关节炎模型大鼠不同时相的影响,探讨其治疗急性痛风性关节炎的作用机制.方法:注射尿酸钠建立大鼠痛风性关节炎模型,大鼠灌胃给药,观察对大鼠关节肿胀率及关节滑膜囊表达IL-1β mRNA和TNF-α mRNA(RT-PCR)的影响.结果:"通痹祛风汤"可有效抑制大鼠踝关节肿胀程度;关节滑膜囊TNF-αmRNA和IL-1βmRNAr的表达明显减低.结论:"通痹祛风汤"可抑制痛风性关节炎TNF-α和IL-1的产生而发挥抗炎作用,明显减轻关节的病理性损伤,有效抑制关节炎的临床进程.     

立体定向微创血肿清除术治疗脑内小血肿的疗效观察

目的探讨应用立体定向微创血肿清除术治疗有严重神经功能障碍的脑内小血肿.方法选择有严重神经功能障碍(CSS≥18)的脑内小血肿病例71例,随机分成2组,分别采用立体定向微创血肿清除术进行治疗(38例)及内科保守治疗(33例).结果立体定向微创血肿清除术在血肿清除速度上明显快于内科保守治疗,1周内血肿减少量分别是74.11%及16.61%,同时神经功能恢复速度亦明显优于内科保守治疗,在1周内CSS下降分别是30.02%及7.32%.结论立体定向微创血肿清除术对脑内小血肿的治疗,在血肿清除速度、神经功能恢复速度上均明显优于内科保守治疗.     

盐酸甲氯芬酯在急性脑出血中的临床应用疗效观察

目的观察盐酸甲氯芬酯治疗急性脑出血临床病例疗效。方法将62例脑出血患者进行随机均分治疗组和对照组。对照组用常规治疗方法,治疗组在常规治疗的基础上,加用盐酸甲氯芬酯0．5g,静脉滴注,每日1次,共4周。于治疗前及治疗后第4周后分别进行神经功能缺损评分及疗效评定。结果治疗4周后,治疗组神经功能缺损评为（9．6±6．3）分,明显低于对照组的（14．4±7．6）分（P〈0．05）;治疗组的显效率和有效率分别为61．29％和87．10％,显著高于对照组的38．71％和54．85％（P〈0．05）。结论盐酸甲氯芬酯可促进脑出血患者的神经功能保护和康复作用。     

磁共振快速场梯度回波技术在急性期脑出血中的应用价值探讨

目的：探讨磁共振快速场梯度场回波技术（FFE）在急性期脑出血中的应用价值．方法：对30例临床怀疑急性期脑出血的患者在行CT及常规MR头颅平扫序列后均加做FFE序列检查,比较其诊断价值．结果：30例临床怀疑急性期脑出血的病例中,21例在CT上清晰显示的24个血肿在FFE序列均能清晰显示,而另外3例脑干小血肿显示较CT清晰,有6例在FFE发现的多个直径2-5mm的圆形或斑点状的低信号在CT及常规T2WI上均未显示．结论：FFE序列在急性期脑出血中以及微量出血中有明确的应用价值．     

自体动脉注射法制备大鼠脑尾状核出血动物模型

目的 通过立体定向法制备大鼠自体动脉血脑出血动物模型,观察模型制备后大鼠的行为学改变及病理学变化的规律.方法 取SD大鼠20只,随机分成实验组15只和对照组5只.实验组用肝素化100μL微量进样器抽取尾动脉血55 μL,用立体定向仪将微量注射器针进至尾状核中心,将血液分两次缓慢注入尾状核内(注射速度8 μL/min).假手术组完成立体定向术及尾动脉抽血,但不注血.结果 所有动物均成活,出血6 h后出现行为异常,组织形态学改变显著.结论 此方法成本低,成活率高,操作简单,对肢体运动功能损伤小,与临床脑出血相似.