鲍曼不动杆菌分子流行病学研究进展

介绍了鲍曼不动杆菌的分子流行病学特征,并比较了鲍曼不动杆菌几种分子分型方法的优缺点。     

多重耐药鲍曼不动杆菌携带金属酶与整合酶基因特征及同源性分析

目的了解吉林地区多重耐药鲍曼不动杆菌(Multidrug-resistant Acinetobacter baumanni,MDRAB)金属酶与整合酶基因的类型,并对菌株进行同源性分析.方法收集吉林地区2所三级甲等医院临床标本分离鉴定的鲍曼不动杆菌38株.多重耐药株携带金属酶的初筛实验-双纸片协同试验:金属酶与整合酶基因的检测-聚合酶链反应(PCR),并对其进行同源性分析.结果在所有MDRAB菌株亚胺培南-EDTA协同试验中,15株(39.4%)阳性,16株(42.1%)携带整合酶基因Ⅰ,2株(5.2%)携带整合酶基因Ⅱ,2株(5.2%)携带blaVIM型金属酶基因,1株(2.6%)携带blaNDM-1型金属酶基因,未检测出金属酶基因blaIMP,blaSIM-1和整合酶基因Ⅲ.结论该地区临床分离的MDRAB耐药率高,可能与其携带金属酶基因和整合酶基因有关,A型MDRAB为医院感染主要流行株.     

鲍曼不动杆菌肺部感染63例临床分析

目的 :探讨鲍曼不动杆菌肺部感染的临床特点及感染的危险因素。方法 :对楚雄州医院2002年1月—2003年12月发生肺部鲍曼不动杆菌肺部感染的63例患者临床症状、感染的危险因素、细菌培养结果进行分析。结果 :鲍曼不动杆菌肺部感染均为院内感染 ,与基础疾病 ,使用抗菌素、激素 ,介入治疗有关。结论 :合理应用抗菌素 ,严格无菌操作 ,加强基础病的治疗 ,早期诊断 ,及时治疗是减少鲍曼不动杆菌感染的关键。     

主动外排系统作为鲍曼不动杆菌耐环丙沙星重要机制的研究

目的探讨耐环丙沙星鲍曼不动杆菌的主动外排机制。方法试管稀释法检测56株临床鲍曼不动杆菌对环丙沙星的敏感性;用直接荧光法检测耐药株在有无外排泵抑制剂时鲍曼不动杆菌胞内药物聚集浓度;结合药敏和直接荧光法两项结果筛选出6株外排抑制剂存在时胞内药物聚集浓度明显升高的环丙沙星耐药株,对该耐药组及对照敏感组做胞内环丙沙星聚集浓度的线性测定;RT—PCR法检测两组菌株主动外排泵基因adeABC的表达水平;对adeABC自身启动子区域相关基因片段进行PCR扩增并测序。结果（1）56株鲍曼不动杆菌中,48株对环丙沙星耐药（MIC〉4rag／1）;0株对环丙沙星中介（1mg／1≤MIC≤≤4mg／1）;8株对环丙沙星敏感（MIC〈1mg／1）。（2）耐药组药物积累量不及敏感组,加入外排泵抑制剂叠氮化钠后积累量上升并接近敏感组。（3）耐药组主动外排基因adeB的表达水平（2．372±0．032）明显高于敏感组（1．654±0．040）（P〈0．01）。（4）自身启动子区域相关基因片段没有发现突变。结论鲍曼不动杆菌对环丙沙星的耐药现象非常严峻;外排泵基因adeABC的过度表迭是鲍曼不动杆菌对环丙沙星耐药的重要原因;adeABC基因自身启动子区域无导致adeABC过度表达的基因突变。     

下呼吸道感染鲍曼不动杆菌的分布特点及耐药性分析

目的:了解下呼吸道感染鲍曼不动杆菌的临床分布特点及其耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:对武威凉州医院(以下简称该院)2010年1月至2012年12月下呼吸道标本中分离出的鲍曼不动杆菌进行回顾性研究。结果:172株鲍曼不动杆菌中,2010年44株(25.58%),2011年57株(33.14%),2012年71株(41.28%);科室分布:以重症医学科(33.72%)、呼吸科(26.74%)、神经外科(16.87%)为主;药敏试验:对头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素耐药性较低,对其他抗生素耐药性较高,表现为多重耐药,并呈逐年上升趋势。结论:下呼吸道感染鲍曼不动杆菌主要来自重症医学科、呼吸科、神经外科,对头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素较敏感,存在多重耐药现象,且耐药性呈逐年上升趋势。     

一种快速的重组农杆菌PCR鉴定方法

建立一种快速的重组农杆菌PCR扩增鉴定方法,采用煮沸法处理重组农杆菌,使农杆菌高温裂解,释放质粒DNA,直接进行PCR扩增反应,检测目的基因片段.结果表明,重组质粒PCR扩增效果较好,目标条带较为明显.通过煮沸重组农杆菌,进行PCR扩增反应鉴定质粒DNA,不仅实验操作简单安全,缩短实验时间,并且避免了酚、氯仿试剂在提取质粒DNA过程中的残留对后续分子鉴定质量的影响.     

奶牛乳房炎病原菌的分离和PCR方法快速鉴定

奶牛乳房炎是奶牛养殖场中最严重的疾病之一.为了确定奶牛乳房炎主要致病菌,本实验对采自养殖场临床乳房炎40个病例的乳样,用传统细菌培养方法分离奶牛乳房炎病原菌进行形态学鉴定;用纯化培养后细菌单菌落提取DNA作为模板,利用已报道的细菌通用引物,采用PCR方法进行分子鉴定.结果共分离得到10种主要致病菌,它们是嗜酸氧化硫硫杆菌,琼氏不动杆菌,农杆菌,蜡状芽孢杆菌,地衣芽胞杆菌,芽孢杆菌,大肠杆菌,克雷伯菌,假单胞菌,金黄色葡萄球菌.本研究成功建立了一种快速、特异性强的奶牛乳房炎致病菌的鉴定方法.     

猪多杀性巴氏杆菌(PM)PCR诊断技术的建立

参照文献报道的猪多杀性巴氏杆菌（PM）基因组的部分序列,设计合成引物,建立了PM的PCR诊断技术,并对各反应条件进行优化.本实验建立的PM的PCR扩增片段大小为457 bp.以建立的PCR方法对临床送检的可疑病猪的肺部病料进行了特异性检测和敏感性试验及生化鉴定.结果表明PCR检测阳性结果与猪多杀性巴氏杆菌的形态染色、培养特性和生化鉴定结果一致,该PCR方法在临床诊断中具有应用价值.     

鲍曼不动杆菌耐药率与抗菌药物使用相关性分析

目的为了解鲍曼不动杆菌耐药率与抗菌药物使用之间的关系,为指导临床合理用药提供依据。方法回顾性调查我院2011-2017年住院患者送检标本中分离的鲍曼不动杆菌的耐药率及同期不同种类抗菌药物的使用情况,通过简单相关与偏相关分析二者之间的关系。结果 2011-2017年我院鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药率总体上呈现上升趋势(P0.05)。简单相关结果显示,鲍曼不动杆菌对亚胺培南/西司他丁、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、左氧氟沙星和阿米卡星的耐药率与碳青霉烯类的使用量呈高度正相关,相关系数分别为0.814、0.977、0.872、0.966、0.893(P0.05);鲍曼不动杆菌对美罗培南的耐药率与头孢菌素类、喹诺酮类和氨基糖苷类的使用量呈高度负相关,相关系数分别为-0.889、-0.964、-0.857(P0.05)。偏相关结果显示,鲍曼不动杆菌对常用7种抗菌药物的耐药率与不同种类抗菌药物的使用量均无相关性(P0.05)。结论我院鲍曼不动杆菌耐药情况严重,细菌耐药性的升高可能与抗菌药物的不合理使用有关,控制细菌耐药还需加强抗菌药物的规范化管理。     

三种不同磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆、表达及其对宿主菌生长的影响

应用PCR技术分别克隆了集胞藻6803、鲍曼不动杆菌和大肠杆菌的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）基因,构建重组大肠杆菌。SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,来自集胞藻6803和大肠杆菌的PEPC实现了高效表达,而来自鲍曼不动杆菌的PEPC表达较弱,提示密码子偏好性的影响。前两菌提前进入对数生长期,来自鲍曼不动杆菌PEPC工程菌却延迟生长,但这3种重组菌发酵24h后的生物量与对照菌几乎相同。如果排除质粒复制造成的代谢负荷,过表达PEPC促进了宿主菌的生长,推测是因为重排了代谢流量。