建立小鼠学习记忆损伤模型的方法学研究

目的 通过避暗和Morris水迷宫实验研究建立小鼠学习记忆损伤模型的有效方法。方法 分别在小鼠避暗电击训练之前20 min腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg体质量,电击训练结束之后立即皮下注射亚硝酸钠90 mg/kg和下次电击测试之前15 min给小鼠灌服35%乙醇0.1 mL/10 g,建立记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍模型,测定各组小鼠在电击训练后6 h、24 h、30 h、48 h后的避暗潜伏期、错误次数和探头次数等多项指标,评价三种记忆障碍模型方法各指标的敏感性和最适测试时间。小鼠分别腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg和灌服35%乙醇0.1 mL/10 g造成学习记忆损伤,通过Morris水迷宫定位航行试验和空间探索试验用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力,建立空间学习记忆障碍小鼠模型的评价方法。结果 避暗实验显示：和空白组比较,东莨菪碱造成记忆获得障碍模型小鼠在电击训练之后6 h、24 h避暗潜伏期明显缩短,错误次数也明显增多(P0.05)。结论 避暗实验中使用东莨菪碱、亚硝酸钠构建小鼠记忆获得障碍和记忆巩固模型时应在造模后24 h和30 h检测相应指标;乙醇造成的记忆再现障碍模型,应在电击训练24 h后,在下次测试之前15 min给小鼠灌服乙醇后检测,指标以避暗潜伏期、错误次数和探头次数为宜。Morris水迷宫实验提示东莨菪碱能够损害小鼠空间学习记忆,可以作为构建小鼠空间学习记忆障碍模型的药物,乙醇并不能建立小鼠的空间记忆障碍模型。     

电针对APP /PS1 转基因AD 小鼠Morris 水迷宫学习记忆行为的影响

摘要:目的探讨电针对5 月龄APP /PS1 转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠学习记忆行为学 的影响。方法将16 只APP /PS1 转基因阳性雄鼠随机分为模型组、电针组,每组各8 只,8 只APP /PS1 转基因阴 性雄小鼠为对照组,电针组针刺“百会”、“涌泉”穴位后接电针仪,疏密波,每次针刺持续15 min,隔日1 次,对照组、 模型组以相同方法用鼠袋束缚15 min,隔日1 次,3 组都持续5 周,以Morris 水迷宫检测小鼠学习记忆能力。结果 3 组间的鼠逃避潜伏期的差异均有统计学意义(P ＜ 0. 05),电针组与模型组小鼠之间的差异有统计学意义( P ＜ 0. 05)。结论电针能提高APP /PS1 转基因AD 模型小鼠的学习记忆能力。     

绿茶多酚预防老龄C57 B L/6J小鼠学习记忆功能衰退实验研究

为了研究绿茶多酚对自然衰老的C57BU6J小鼠学习记忆衰退的预防作用,将14月龄的C57BU6J小鼠60只随机分为老年对照组和绿茶多酚低、中、高剂量干预组。绿茶多酚掺入小鼠饮水中,剂量分别为0．025％、0．05％和0．1％（My）,另设1月龄青年对照组。干预6个月后。运用Morris水迷宫、跳台实验检测小鼠的空间学习记忆能力和被动回避记忆能力。结果发现,在Morris水迷宫实验中．0．05％和0．1％剂量的绿茶多酚干预能够明显缩短老年小鼠定位航行实验的逃避潜伏期和游泳距离,显著提高老年小鼠空间探索实验的目标象限持续时间和穿越平台区次数。达到青年对照组水平,并且能够明显提高跳台实验中老年小鼠的跳台记忆潜伏期。同时该两个剂量的绿茶多酚能够提高小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的活性,增加海马脑区突触后致密物-95（PSD95）和钙离子／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）的蛋白表达。以上结果表明0．05％、0．1％剂量的绿茶多酚能够预防老年C57BU6J小鼠学习记忆功能的减退。其抗氧化作用和调节神经突触相关蛋白的表达为其可能的作用机制。     

Morris水迷宫训练诱导大鼠海马轴突重塑

目的:观察Morris水迷宫训练后大鼠海马苔藓纤维分布的变化,探讨海马神经元轴突的可塑性.方法:2月龄雄性SD大鼠40只,随机分为水迷宫训练模型组20只,游水对照组20只.用Neo-Timm染色观察海马苔藓纤维的分布;免疫荧光组织化学方法检测海马微管相关蛋白tau-1的定位;Western blotting方法检测tau-1表达.结果:SD大鼠经6 d学习训练,其逃避潜伏期逐日缩短.与对照组大鼠相比,Neo-Timm染色显示模型组大鼠海马CA3区苔藓纤维延伸至锥体细胞层和起始层,tau-1免疫表达阳性产物除分布在透明层以外,锥体细胞层或起始层内有明显颗粒分布.Western blotting显示tau-1表达量增加.结论:结果表明Morris水迷宫训练可以诱导大鼠海马CA3区轴突的重塑,提示苔藓纤维系统可作为一个研究轴突重塑和认知关系的理想区域.     

不同垫料对SPF级KM小鼠学习记忆能力的影响

目的 探讨非专业加工制作的麦秸垫料、玉米芯垫料、刨花垫料和纸质垫料对SPF级昆明小鼠(KM)学习记忆能力的影响差异,以及不同垫料对小鼠行为学的影响。方法 选用SPF级KM小鼠24只,分别使用麦秸垫料、刨花、玉米芯和纸质垫料饲养8周后,开展MORRIS水迷宫行为学实验,考察其行为学的变化和学习记忆能力的差异。结果 麦秸组学习记忆能力增加明显高于刨花组(P<0.05);水迷宫实验期间,各组增重差异不显著。定位航行实验结果显示,麦秸组第5 d的逃避潜伏期显著低于其余三组(P<0.05),其余时间段差异无显著性;空间探索实验结果显示麦秸组小鼠穿过原平台位置的次数、游泳时间均多于其余三组。结论 不同垫料对水迷宫实验中KM小鼠的体质量影响较小,麦秸垫料对KM小鼠学习记忆能力的影响优于刨花垫料和玉米芯垫料,建议将麦秸垫料作为实验动物接触性垫料推广使用。     

白藜芦醇对Aβ致大鼠学习记忆损伤的修复作用

通过观察白藜芦醇对淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的空间学习记忆功能损伤的影响,探讨白藜芦醇对老年痴呆的治疗作用.方法是采用侧脑室注射Aβ25-35和腹腔注射白藜芦醇2周后进行Morris水迷宫测试,比较不同处理后的大鼠逃避潜伏期、到达平台游过距离以及目标象限内游泳所占的时间百分比.得到以下结果(1) Aβ25-35引起大鼠学习记忆的下降；(2)白藜芦醇有效地逆转Aβ25-35导致的学习记忆的损伤.因此,腹腔注射白藜芦醇有效地阻止了Aβ25-35对学习记忆的损伤.这些结果提示白藜芦醇是治疗AD学习记忆功能损伤的有效策略.     

异黑颗粒对APP/PS1双转基因模型小鼠学习记忆和抗氧化能力的影响

 为了观察异黑颗粒对小鼠行为学习及抗氧化能力的影响,选用APP/PS1双转基因模型小鼠,将其随机分成5组,另取同窝阴性小鼠作为正常对照组,每组8只,3个月龄后开始给药.给药6个月后,通过行为学实验测试小鼠学习记忆能力的变化,采用分光光度法测定脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性.Morris水迷宫实验结果表明,APP/PS1双转基因模型小鼠逃避潜伏期较正常组明显延长,在原象限停留时间明显缩短;异黑颗粒组小鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短,在原象限停留时间明显延长.APP/PS1双转基因模型小鼠脑组织GSH-Px、SOD活力下降;异黑颗粒治疗组学习和记忆能力升高,脑组织GSH-Px、SOD活力升高,与阿尔茨海默病模型组比较有显著性差异.研究表明,APP/PS1双转基因模型小鼠9个月后发现有明显学习记忆功能障碍伴有抗氧化能力下降,异黑颗粒对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆障碍具有明显改善作用并且可剂量依赖性的提高阿尔茨海默病模型小鼠的抗氧化能力.     

酸樱桃汁对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆功能的影响

目的 检测酸樱桃汁对D-半乳糖致衰老小鼠模型学习记忆功能的影响.方法 颈背部皮下注射 D-半乳糖120mg/(kg·d-1)连续56d建立亚急性衰老模型,同时灌胃给予不同剂量的酸樱桃汁进行治疗,治疗8周后,分别采用跳台实验、Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力.结果 跳台法检测结果显示:酸樱桃汁能延长D-半乳糖致衰老模型小鼠的潜伏期,减少错误次数;Morris 水迷宫实验结果显示:酸樱桃汁能使D-半乳糖致衰老模型小鼠平均潜伏期明显缩短,跨过平台次数显著增加.结论 酸樱桃汁能有效提高D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆能力.     

βCaMKII蛋白修饰转基因小鼠工作记忆的研究

利用前额叶脑区过量表达β钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶II(βCaMKII)的蛋白修饰转基因小鼠,研究βCaMKII对小鼠工作记忆的影响.Western Blot结果显示,转基因小鼠前额叶脑区的βCaMKII过量表达.在修饰的水迷宫实验中,与对照组相比,转基因小鼠的逃避潜伏期没有发生明显变化.此外,在T迷宫实验中,转基因小鼠的正确率与对照组的正确率也基本相同.由此推测,βCaMKII的过量表达对于前额叶皮层依赖的工作记忆没有明显的影响.     

增塑剂邻苯二甲酸二乙基己酯对小鼠学习和记忆能力的影响

目的研究邻苯二甲酸二乙基已酯（di-（2-ethylhexyl）phthalate,DEHP）对于小鼠学习与记忆能力影响.方法48只雄性昆明小鼠随机平均分成4组,分别暴露在0、5、50、500mg/kgDEHP进行经口灌胃染毒,期间进行Morris水迷宫测试检测器学习与记忆能力,染毒结束后取出脑组织,检测ROS水平及MDA含量.结果Morris水迷宫实验结果显示50、500mg/kg DEHP对小鼠学习能力产生影响,50mg/kg浓度DEHP染毒组小鼠记忆能力与对照组相比显著下降（P〈0.05）;随着DEHP染毒浓度的升高小鼠脑组织中的ROS水平和MDA含量逐渐上升,且在50mg/kg和500mg/kg浓度时与对照组相比具有显著性差异（P〈0.05）.结论DEHP能够影响小鼠学习与记忆能力,并对其脑组织产生氧化损伤.     

论游泳训练对不同性别大鼠Morris 水迷宫测试成绩的影响

利用定位航行实验和空间探索实验在Morris水迷宫中对雄性、雌性大鼠进行为期9周的游泳训练,实验结果显示:游泳训练能显著提高雄性、雌性大鼠的学习和记忆能力,但雄性大鼠学习和记忆的能力优于雌性大鼠.     

听觉线索引导大鼠空间定位

运用Morris水迷宫实验模式,研究听觉线索在大鼠进行空间定位时的作用.结果显示:听觉线索引导组和对照组动物在4 d内寻找平台的时间和错误率均显著下降.但与对照组动物相比,听觉线索引导组动物寻找隐藏平台的时间和错误率均较低,2组之间具有显著性差异(P<0.05).对动物的轨迹分析发现,听觉线索引导组和对照组动物在水池边缘区域分配的时间不同,提示2组动物寻找平台所用的策略不同.实验结果提示,大鼠能够利用单独的声音线索进行空间定位.     

急性高浓度PM2.5暴露对小鼠认知能力的影响

流行病学证据表明,老年人长期接触PM2.5可能导致记忆障碍.为了探究短期、严重雾霾天气对人们健康的影响,以C57BL/6J小鼠为研究对象,用不同浓度的PM2.5(0、193、1 930、19 300 μg·kg－1·day－1),通过鼻腔滴注的实验,染毒1 w,探究急性高浓度PM2.5污染所造成的神经毒性.首先通过Morris水迷宫实验对小鼠认知能力进行检测,暴露结束后对小鼠脑组织进行组织病理学检测(H&E)、氧化应激水平测定(ROS、MDA、SOD).实验结果表明,急性高浓度PM2.5暴露虽然不影响小鼠大脑的生长发育,但会导致小鼠认知能力下降,高剂量19 300 μg·kg－1·day－1PM2.5染毒组小鼠与空白对照组小鼠5 d逃避潜伏期的平均值有显著性差异(为P＜0.05);小鼠脑组织海马区出现病理学损伤;小鼠脑组织中的ROS水平、MDA含量上升,SOD活性下降.实验揭示了急性高浓度PM2.5暴露对小鼠脑组织能造成氧化损伤,破坏海马神经中枢细胞结构,影响小鼠的学习记忆能力.     

戒毒一号对甲基苯丙胺诱导的小鼠学习记忆损伤的改善作用

目的研究戒毒一号对甲基苯丙胺诱导小鼠学习记忆损伤的改善作用。方法将实验动物随机分成4组,对照组给予生理盐水,模型组给予甲基苯丙胺(10 mg/kg),给药组分别给予戒毒一号(14. 12、56. 48 g/kg)。通过Morris水迷宫检测小鼠的学习和记忆能力,观察戒毒一号对甲基苯丙胺诱导小鼠学习记忆损伤是否具有改善作用。结果与对照组相比,模型组小鼠训练阶段逃避潜伏期显著延长(P <0. 05),表明模型组小鼠的学习能力下降;模型组小鼠在测试阶段穿梭平台的次数显著减少(P <0. 05),表明模型组小鼠记忆能力损伤。与模型组相比,低剂量组小鼠训练阶段逃避潜伏期显著缩短(P <0. 05),小鼠在测试阶段穿梭平台的次数显著增多(P <0. 05);与模型组相比,高剂量小鼠的逃避潜伏期有缩短的趋势,测试阶段穿梭平台的次数和时间有增加的趋势,但差异无统计学意义。结论戒毒一号具有改善甲基苯丙胺诱导小鼠学习记忆损伤的作用。     

远志皂苷和茯苓多糖对记忆障碍模型小鼠空间学习记忆能力改善作用及其机制研究

目的探讨远志皂苷和茯苓多糖(Polygala saponins and pachymaran,PSP)对记忆障碍模型小鼠空间学习记忆能力改善作用及作用机制.方法 Morris水迷宫法研究PSP对戊巴比妥钠制造的空间方向辨别障碍模型小鼠空间学习记忆能力改善作用,并测定脑组织单胺氧化酶(MAO)活性.结果 PSP能增加模型小鼠在定位航行实验中1 min内穿越安全平台次数,并缩短模型小鼠在定位航行实验中找到安全平台的逃避潜伏期;PSP能缩短模型小鼠在空间探索实验中第一次到达安全平台的时间,并增加穿越原平台的次数;PSP可以降低小鼠脑组织MAO活性.结论 PSP对模型小鼠空间学习记忆有明显的改善作用,其机制可能与降低脑组织中MAO活性有关.     

Pullinsin-4血管烧灼阻断法血管性痴呆大鼠模型的建立

采用永久双侧椎动脉热凝烧灼术,次日行双侧暂时夹闭阻断颈总动脉20 min再灌48 h法制备pullinsin-4vo大鼠模型.利用Morris水迷宫检测模型大鼠空间学习记忆能力,用组织化学技术显示模型大鼠脑组织病理改变.造模前模型组水迷宫定位航行试验的逃避潜伏期与正常组和假手术组差别无显著性;再灌48 h后模型大鼠的逃避潜伏期及游泳路径长度显著长于正常组和假手术组,P值均小于0.05;免疫组织化学观察显示模型大鼠海马组织存在明显的缺血坏死病灶,海马各区神经细胞结构排列紊乱、稀疏,细胞数明显较少.研究表明经改良后的血管性痴呆大鼠模型是进行血管性痴呆病理机制及其药物疗效评价的理想动物模型.     

Pulinsin-4血管烧灼阻断法血管性痴呆大鼠模型的建立

采用永久双侧椎动脉热凝烧灼术,次日行双侧暂时夹闭阻断颈总动脉20 min再灌48 h法制备pullinsin-4vo大鼠模型.利用Morris水迷宫检测模型大鼠空间学习记忆能力,用组织化学技术显示模型大鼠脑组织病理改变.造模前模型组水迷宫定位航行试验的逃避潜伏期与正常组和假手术组差别无显著性;再灌48 h后模型大鼠的逃避潜伏期及游泳路径长度显著长于正常组和假手术组,P值均小于0.05;免疫组织化学观察显示模型大鼠海马组织存在明显的缺血坏死病灶,海马各区神经细胞结构排列紊乱、稀疏,细胞数明显较少.研究表明经改良后的血管性痴呆大鼠模型是进行血管性痴呆病理机制及其药物疗效评价的理想动物模型.     

格列美脲对糖尿病小鼠学习记忆能力的影响

观察格列美脲对STZ诱导的糖尿病小鼠学习记忆能力的影响. 36只ICR小鼠随机分为糖尿病模型组,格列美脲组(0. 5 mg·kg~(-1))和空白对照组.通过腹腔注射150 mg/kg体积分数为1%的链脲佐菌素复制糖尿病模型.采用葡萄糖氧化酶法监测小鼠每周血糖水平.果糖胺法评价小鼠糖化血清蛋白水平.采用新物体识别实验和Morris水迷宫实验评价小鼠空间学习记忆能力. 150 mg/kg 1%的链脲佐菌素成功建立糖尿病小鼠模型.格列美脲(0. 5 mg·kg~(-1))可显著降低糖尿病小鼠空腹血糖水平(P 0. 05)和糖化血清蛋白水平(P 0. 01).新物体识别实验结果显示,与空白对照组相比,糖尿病组小鼠空间学习记忆能力有下降趋势;与糖尿病组相比,格列美脲组小鼠学习记忆能力得到改善.Morris水迷宫实验结果显示,与正常对照组相比,糖尿病小鼠空间学习能力显著降低(P 0. 05,P 0. 01),格列美脲组小鼠与模型组小鼠相比空间学习能力显著上升(P 0. 05,P 0. 01).格列美脲可改善糖尿病小鼠学习记忆能力,其机制可能通过降血糖作用而达成.     

丁草胺对小白鼠空间记忆能力的影响

以除草剂丁草胺溶液为染毒药物,以小鼠为实验对象,利用Morris水迷宫系统研究了丁草胺对小鼠的急性致死效应和空间记忆能力的影响．实验结果表明：丁草胺对小鼠的LD。为22．74mg／kg（95％的置信区间为15．17～34．52mg／kg）．除个别低剂量处理组外,大部分的丁草胺处理组的平均潜伏逃避时间、平均游泳距离都明显长于空白对照组,而且均达到了差异显著水平（P〈O．05）或差异极显著水平（P〈O．01或P〈O．001）．实验还发现不同的入水次序和入水象限对小鼠的空间记忆能力有较大的影响．在第1象限（目标象限）入水和第4入水次序时,小鼠的平均逃避潜伏时间和平均游泳距离均较短．     

当归多糖对慢性脑低灌注大鼠学习记忆能力的影响

目的:观察当归多糖对慢性脑低灌注大鼠学习记忆能力的影响.方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、药物对照组、模型组、当归多糖低、当归多糖高剂量组.采用改良的分期结扎双侧颈总动脉法(2-VO)制成慢性脑低灌注模型,当归多糖低剂量组和当归多糖高剂量组分别予以5％和10％,当归多糖液按1ml/100g灌胃,1次/d,连续灌胃28d.术后1个月、2个月、3个月时采用Morris水迷宫检测各组大鼠的定位航行潜伏期和空间探索次数.结果:定位航行潜伏期和空间探索次数在术后1个月时各组间差异无显著性意义(P＞0.05)；在术后2个月和3个月时模型组呈进行延长和减少,与假手术组比较差异有显著性意义(P＜0.05).当归多糖低、当归多糖高剂量组定位航行潜伏期和空间探索次数较模型组明显缩短和增多(P＜0.05),与假手术组比较差异无显著性意义(P＞0.05),当归多糖高剂量组和低剂量组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论:慢性脑低灌注大鼠空间学习记忆能力随观察时间的延长而明显降低,当归多糖能改善慢性脑低灌注大鼠学习记忆能力,这种作用在高剂量和低剂量间差异无显著性意义.