球孢白僵菌菌株交配型分子鉴定

球孢白僵菌Beauveria bassiana是一种重要的虫生真菌,开发的真菌杀虫剂是一类优良的生物农药,其有性世代—球孢虫草Cordyceps bassiana也有潜在的经济价值.鉴定球孢白僵菌菌株的交配型,确立含有不同交配型标准菌株,进行菌株的快速配对,对于球孢虫草的人工栽培和球孢白僵菌的育种都具有重要的价值.通过多次重复试验,优化了扩增条件,保证了检测结果的稳定性和可靠性.该试验结果为检测球孢白僵菌菌株的交配型提供了一种简便、准确的方法,并为研究球孢白僵菌交配型基因的功能、人工栽培和育种奠定了基础.     

球孢白僵菌在玉米中的定殖研究

球孢白僵菌(B.bassiana)是国内外广泛用于害虫生物防治的杀虫真菌之一,被认为是最具开发潜力的一种昆虫病原真菌.该研究以玉米为材料开展球孢白僵菌在玉米叶片中的定殖研究,结果表明,其在叶片定殖率随设定的孢子浓度增大而增大,在设定孢子浓度为1×107时,第二次灌根两周后检测叶片中有最高定殖率为16%,最高生长速率0.403 cm/d,玉米抗虫的抗性级别也由感病提高到抗病或中抗,但这种提高只在孢子浓度为104到107范围内增长较大,超过107这个浓度后,球孢白僵菌在玉米中的定殖率及对玉米的促生和抗虫性的提高不明显.本研究结果表明,球孢白僵菌同其他生防菌相比,具有以抗虫为主,兼有促生,绿色环保的优势,这为多渠道开发利用球孢白僵菌提供了新的科学数据.     

球孢白僵菌生物学特性研究进展及其杀虫效果展望

球孢白僵菌的生物学特性和提高球孢白僵菌的杀虫性,已成为生物防治的一个研究重点．该文对球孢白僵菌的生物学特性的研究情况进行总结,并对其杀虫性前景进行了展望．     

球孢白僵菌孢子的耐逆性研究

测定了温度、pH、紫外线照射对D1-5球孢白僵菌在极性条件下对孢子萌发的影响,并找到萌发最适条件.实验结果表明:在其他条件相等时,温度在15~40℃都能萌发,19~28℃为最适应温度.球孢白僵菌孢子在pH 3~11之间都能萌发,萌发率在pH≤7时随着pH增大而升高,在等于7时达到峰值95.06%,而后逐渐下降.紫外线照射会严重影响球孢白僵菌的孢子萌发.     

不同处理条件下球孢白僵菌萌发率的研究

为了更好的利用球孢白僵菌进行生物防治,室内测定了白僵菌菌株D1-5分生孢子的萌发条件.主要探究白僵菌菌株在温度、pH、紫外强度三个不同处理条件下的极性检测;记录白僵菌在各项指标下的萌发率数据.结果表明分生孢子在26℃下萌发率最高,可达到90%;最适pH为6~7,白僵菌在pH 4~5时菌丝生长最旺盛,pH 6.0时最适于产孢.波长为280 nm的紫外线对白僵菌孢子杀伤力较大,并造成毒力下降.以上结果为田间防治玉米螟提供最适条件,以期达到最好的防治效果.     

白僵菌75—1 76—2对稻黑尾叶蝉传毒、产卵影响的试验

白僵菌Beauveria bassiana(Bals)Vuill是一种广谱性的杀虫真菌,能使多个目科的昆虫感染致死。对雌性昆虫生殖发育的影响表现不一致。EL—tahtaqui(1964),对马铃茹甲虫的研究中,发现白僵菌能刺激马铃茹甲虫,使产卵量为通常的1.3倍,Telenga(1958),用白僵菌处理棕尾毒蛾(Euproctis chrysorrhoea)发现处理区存活蛾所产的卵胚胎死亡率高达52.％,而对照区只有7.1％;Boycer,D.和Rizvanov,K.(1960)用白僵菌处理正在产卵     

高产碱性蛋白酶工程菌的构建及鉴定

利用原生质体融合技术，使碱性蛋白酶生产菌2709与枯草杆菌BD105(含有碱性蛋白酶基因克隆载体pDW2)杂交，得到1株高产碱性蛋白酶的工程菌A16．A16的表型与生长特征与2709相似，相同条件下发酵酶活性比2709菌株高50％，摇瓶发酵的产酶水平最高可达30000u／mL。用菌落的原位杂交鉴定出该菌株携有双亲的遗传物质．     

非受体酪氨酸激酶BMX对宫颈癌C-33 A细胞成球能力的影响

为探索非受体酪氨酸激酶BMX(也称Etk)对宫颈癌C-33 A细胞成球能力的影响,应用免疫细胞化学和Western blot检测BMX在宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、C-33 A、HT-3、CaSki中的表达及定位,构建BMX过表达质粒载体,转染至C-33 A细胞中,筛选稳定过表达的细胞株,利用细胞成球实验检测BMX对C-33 A细胞成球能力的影响。免疫细胞化学染色显示,BMX主要在细胞浆中表达,在细胞核中也有部分表达,在HeLa、SiHa、HT-3及CaSki细胞系中BMX高表达,而在C-33A细胞中低表达。Western blot检测也得出同样的结果。将BMX过表达质粒载体转染至C-33A细胞系中,鉴定稳定过表达的细胞株(C-33 A-AcGFP,C-33 A-BMX)。对照组和BMX过表达组细胞成球实验显示,对照组球体较为松散而过表达组较为密实,两组细胞成球率无明显差异(P0.05),但是过表达组球体直径明显大于对照组(P0.001)。上述结果表明:非受体酪氨酸激酶BMX促进宫颈癌C-33 A细胞的成球能力。     

草鱼(Ctenopharyngodon idella)组织蛋白酶L基因克隆及表达特性分析

为探究组织蛋白酶L(Cathepsin L,CtsL)是否在草鱼(Ctenopharyngodon idella)体内发挥免疫功能,根据已构建的草鱼肌肉转录组数据库中unigene序列,采用RACE技术首次克隆得到全长为1 496 bp的草鱼组织蛋白酶L基因(CiCtsL)cDNA序列。序列分析和同源建模显示该基因编码的蛋白具备组织蛋白酶前体抑制结构域I29和木瓜蛋白酶家族半胱氨酸蛋白酶Pept_C1结构域。系统进化分析表明,CiCtsL与斑马鱼CtsL聚为一支。CiCtsL mRNA在7个组织中均有表达,其中肝脏中的相对表达水平最高。感染GCRV后,CiCtsL在各组织中的表达量显著上调,呈现先上升后下降的趋势。研究表明CiCtsL参与了草鱼抵抗GCRV的免疫应答反应,可在草鱼先天免疫调控中发挥重要作用。     

PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响

为研究padR基因表达对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次级代谢产物生物合成及相关蛋白表达的影响,在对须糖多孢菌基因组测序结果的基础上,从基因组中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR将硫链丝菌素抗性基因插入上、下游同源臂之间,将融合片段与穿梭载体pOJ260连接,构建敲除载体pOJ260-UHA-tsr-DHA。通过接合转移将其导入野生型须糖多孢菌中,通过同源臂双交换获得须糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。经HPLC检测分析,敲除菌株次级代谢产物丁烯基多杀菌素产量与原始菌株相比提高了27.3%,且有7个转运相关蛋白出现表达上调。这一研究表明padR基因的敲除能够有效促进须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成。该研究对优化须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成途径具有一定的指导意义,为研究padR基因表达在链霉菌次级代谢产物合成中的作用打下了基础。