卡那霉菌的紫外光致死诱变和光复活效应的研究

Fleming 1929年发现第一个抗生素——青霉素以来,至今人们已发现微生物产生的抗生素有9000多种,其中大部分由链霉菌产生,且卡那霉菌产生的卡那霉素等医用和农用商品抗生素就有70多种。人们以uv等物理因素辐射诱变,化学诱变,杂交,转化,原生质体融合等诸种不同方法提高各种     

灰色链霉菌快中子诱变育种

快中子诱变抗生素菌种,应用于点青霉、红霉素链霉菌等已有报导。链霉素是个已生产了二十多年的老抗生素,生产水平已经很高,而且很不容易再提高。该菌种已经过常用的各种理化因子处理,但至今尚未见到快中子诱变灰色链霉菌的报导。我们用静电加速器产生的快中子辐照灰色链霉菌(Streptomyces griseus),作过十多批处理,经过两年多的菌种选育,证明适当剂量的快中子辐照能诱发灰色链霉菌的菌落形态、色素、生理特性、营养缺陷和产量等的突变,选育到年平均增产26.7％的高产菌株。     

抗生素AGPM高产菌株选育及其蛋白差异分析

从土壤中分离得到一株能产生新型抗生素AGPM的藤黄灰链霉菌菌株,利用紫外线和硫酸二乙酯对新型抗生素AGPM产生菌藤黄灰链霉菌099菌株进行了联合诱变处理,最终得到了一株高产菌株TD0551,其抗生素AGPM产量可达到16．45mg/L,为出发菌株的2．1倍,应用蛋白质二维凝胶电泳技术分析了藤黄灰链霉菌的蛋白质组,比较了高产菌株与低产菌株在分泌AGPM过程中的蛋白质组差异。结果表明,在高产菌株的蛋白样品中有11个特异点,而在低产菌株的蛋白样品中有3个特异点,这些蛋白特异点可能与新型抗生素AGPM的合成有关。     

玉米赤霉烯酮降解酶在马克斯克鲁维酵母中的表达及高产菌株的诱变筛选

玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是镰刀菌属霉菌产生的一种霉菌毒素,常见于霉变的玉米、小麦等谷物中.研究发现,来源于粉红黏帚霉(Gliocladium roseum)的α/β水解酶ZHD101能够断裂ZEN的内酯键,破坏ZEN的毒性.本文利用食品安全级的马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)重组分泌表达了ZHD101,发酵液上清中的表达产物具有水解ZEN的活性.利用UV和~(60)Co-γ联合诱变方法,提高了ZHD101在马克斯克鲁维酵母中的表达水平.高效液相色谱(HPLC)分析表明,重组菌株分泌表达的ZHD101酶蛋白既能水解标准品ZEN,又能在较温和的条件下水解发霉玉米样本中的ZEN,结果表明该重组菌株表达的玉米赤霉烯酮降解酶ZHD101,可应用于发霉玉米的脱毒处理.     

抗生素用于肉类保藏的开发动向

肉制品在生产和加工过程中,会受到各种微生物的污染,使肉的品质发生改变而不能食用,另外肉也可能传播病原微生物,危害消费者的健康.在30年前,人们普遍通过化学处理的方法来抑制在肉中生长的微生物,但是,现在知道几乎所有用来抑制或杀死微生物生长的化学物质也影响到人们的身体健康.抗生素的发现,使一个新的保藏肉食品的方法成为可能.1929年Fleming通过观察真菌中的点青霉来生产点青霉素的过程后发现,一些微生物产生的物质能够对另一些微生物的生长起抑制作用.现代普遍认为:抗生素是微生物(细菌、真菌、放线菌等)在代谢过程中产生的,在低浓度下就能抑制他种微生物的生长和活动,甚至杀死他种微生物的一类小分子的蛋白质.它的杀菌效率要比普通化学物质高出100倍～1000倍,而且对人体的毒性很小,这一点已经在1941年得到了严格的证实.尽管许多抗生素对人体的作用具有严格的选择性,但在食品工业中常用的抗生素是广谱抗生素,例如四环素对广范围内的革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌具有抑制作用.但是,迄今为止,没有一种抗生素对霉菌及酵母有抑制作用.如何选择合适的抗生素主要决定于所要控制的腐败的种类、在食品的pH范围内抗生素的稳定性和可溶性、抗生素对热的稳定性以及它们的毒性等.目前,抗生素在两个方面的     

他克莫司产生菌原生质体制备、再生与诱变

对筑波链霉菌的原生质体制备、再生条件进行了研究,建立了筑波链霉菌的原生质体诱变筛选体系.在此基础上,通过原生质体的紫外诱变处理,筛选得到1株高产菌株,与出发菌株相比,该菌株的平均发酶单位提高51.4%.通过原生质体的紫外诱变来筛选他克莫司高产菌株是一种行之有效的方法.     

从链霉菌中发现新抗生素的趋势分析

到目前为止，链霉菌是微生物中产生抗生素最多的菌种，据报道，从20世纪40年代后期到70年代，每年由链霉菌产生的抗生素几乎呈现指数增长，并在20世纪70年代达到最高峰，20世纪80年代后期到90年代增加幅度下降。收集到的数据显示一条S形曲线，比对数方程预测的曲线要平缓得多，在不断优化参数后为这条曲线建立1个较好的数学模型，根据这一模型可以估计链霉菌中还有多少没有被发现的抗生素，同时也便于预测不远的将来新抗生素产生的趋势。此模型估计在这类菌种中能产生的抗菌化合物的总数量约100000多种，而这只是迄今为止未发现抗生素中很微小的一部分。曲线中斜率的减少是由于筛选方法的减少，而不是由于新抗生素的枯竭，如果这种趋势任其发展下去，在近10～20年内斜率将会趋近于零，但如果不断地探索新的筛选方法，在未来的几十年里发现新抗生素的速度是不会下降的。     

高能电子等辐射因子对果胶酶产生菌ASP.3.396的诱变选育

本试验应用高能电子及紫外线辐射,对果胶酶产生菌Asp.3.396进行诱变选育,经不同辐射剂量辐照后,初步筛选出8.7、uv5、12—1等产酶性能良好的产量变异株。该变异株所产果胶酶,对果汁澄清效果良好,为果胶酶生产菌的优良菌株。同时,经高能电子及紫外线辐射,诱变筛选出2.8—2等白色孢子形态变异株,经传代试验结果表明,变异株白色孢子突变性状稳定。该变异能改善酶液色泽,符合工艺要求:试验还证明,各菌株间所产生果胶酶,对不同果胶的酶解能力,存在着一定的差异。     

农用抗生素禾粟霉素的分离、纯化和理化特牲

禾粟霉素是由禾粟链霉菌的一个新菌株——禾粟链霉菌105N_1菌株(Streptomyces graminearus 105N_1)产生的防治麦类赤霉病的一种农用抗生素。经用阳离子交换树脂从发酵液中提取、纯化,并通过微晶纤维素柱层析分离、CM—Sephadex G—25进一步纯化,分别得到A、C两个组分及B、C混合物。理化分析表明,禾粟霉素为一群碱性水溶性抗生素,属于链丝菌素类,但C组分与链丝菌素类各成员有明显区别,而A组分与链丝菌素类相似,但亦有差异,其结构分析另报。1982年我们报导了在筛选农用抗生素的过程中发现了一新菌株——禾粟链霉菌105N_1菌株,它所产生的碱性水溶性抗生素——禾粟霉素(Graminmycin),对格兰氏阳性菌和格兰氏阴性菌有较强的抑制作用,对真菌的抑制作用也很强。大田实验结果表明,禾粟霉素对麦类赤霉病的防治效果显著。本文主要报导禾粟霉素的分离、纯化和理化特性。     

一株耐盐性链霉菌的鉴定及其抗菌活性

从厦门海岸潮间带红树林根系海泥分离到一株链霉菌S-111-9,能在含6～8％NaCl的高氏合成一号琼脂上生长;产生对革兰氏阳性、阴性细菌、酵母菌及霉菌有较强抑制作用的抗生素,其孢子丝直至波曲,偶而有螺旋,孢子圆柱形,表面有皱折;气生菌丝浅粉红色;基内菌丝褐色,无可溶性色素,该菌应归入链霉菌属(Streptomyces)粉红孢(Roseosporus)类群,而形态和生理特征与该类?的相近种华美链霉菌、玫瑰褐链霉菌和烟薰链霉菌有显著差别,可认为是一新种,?定名为厦海链霉菌(Streptomyces xia-baiensis n.sp.Zhou)。     

生米卡链霉菌突变株生理特性的研究

产生麦迪霉互的生米卡链霉菌经过诱变育种后，其生理代谢特征发生了变化，不仅产生 迪霉素单位有差异，而且孢子形成和发酵生理特征与菌体蛋白及胞外酶也发生了改变，并且对外辊加入的诱导物质也存在不同的反应。     

一种新的饲料添加剂—那西肽

那西肽是含硫多肽类抗生素中的一个新成员,其英文名称为Nosiheptide,60年代由法国人发现,最初由一种从阿根廷土壤中分离出的放射菌培养生成。那西肽是一种带有5个噻唑环的多肽类抗生素,分子式为C_(51)H_(43)N_(13)O_(12)S_6,分子量为1222。尽管这种抗生素早已发现,但由于生产效率低,难以工业化生产。直到80年代,生产方法取得突破,才进入了工业化生产。由于那西肽能明显促进动物生长,并且在动物体内不残留,是一种优良的非吸收型饲料添加剂,法国和日本已正式用作饲料添加剂,我国在80年代后期由上海医大生物合成教研室开始研究。取得了一定的成果,并正在将它转化为生产力。一、那西肽的生产方法那西肽是用微生物培养方法生产的,那西肽产生菌主要有活跃链霉菌(Streptomyces actuosus)、抗生素链霉菌(S.antibioticus)和青灰色链霉菌(S.glaucogriseus),其中以活跃链霉菌为最好。     

山鸡椒提取剂抗霉菌作用的实验研究

霉菌的种类多,分布广。土壤、空气、水及生物体中都有霉菌的存在。霉菌与人类的关系密切,它可引起粮食、食品、布匹、衣物、纸张、图书、中药材等的霉变．诱发动物、植物病害,危害人类。近年来又发现不少霉菌在豆类、谷物上生长,可产生毒素,尤以黄曲霉毒素的致癌作用己引起各国生理科学工作者的普遍的重视。由于大米、花生、黄豆等是人类的主要食品,食用霉变食品必将危害人们的身体健康。因此,开展大米、花生、黄豆等的防霉研究、不仅具有现实意义,也有重要的理论意义和经济意义。     

链霉菌种间原生质体融合的研究

金霉素链霉菌和龟裂链霉菌分别在含０．７５％，甘氨酸１．５０％的液体培养基中培养，对数生长中后期的菌丝体易于制备原生质体，当聚乙二醇（ＰＥＧ６０００）浓度为４０％，在５０℃下保温５ｍｉｎ，有效地诱导了两种原生质体的融合。用表型标记和间接选择的方法检出融合子，种间融合率为３．０５％。融合重组体与亲本在菌落形态，孢子形态，抗生素产量和抗噬菌体特性有显著的差异，不同重组体之间也表现了这些差异．     

放线菌F12产抑菌活性物质的初步研究

为从放线菌F12产生的抑菌活性物质的提取提供理论依据。在低温水底土壤中分离筛选出一株放线菌,命名为F12。对其活化后进行摇床发酵,用杯碟法测其发酵产物对产气杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、霉菌1、霉菌2、霉菌3、酵母菌Y1、酵母菌Y2的抑制效果。结果显示:F12菌株的发酵液对产气杆菌和金黄色葡萄球菌有很好的抑制效果,对酵母菌Y1也有一定的抑制效果。对变形杆菌、大肠杆菌、霉菌1、霉菌2、霉菌3、酵母菌Y2没有明显的抑制效果。此方法简单,效果可靠,为寻求和开发新的微生物资源,对新抗生素的发现提供实验根据。     

头孢菌素C的生物合成及其调控

基于头孢菌素C来源的头孢类抗生素是临床上广泛使用的抗感染药物.头孢菌素C由丝状真菌-顶头孢霉所产生.经过几十年的传统诱变育种,工业上头孢菌素C的产量已经有了大幅度的提高,然而人们对顶头孢霉形态分化、生理特性以及头孢菌素生物合成与调控的认识还相当有限.随着分子生物学以及组学技术的出现,人们对顶头孢霉的了解也逐渐深入,目前已基本阐明头孢菌素C的生物合成途径,并对其调控机制有了初步了解.就顶头孢霉中头孢菌素C的生物合成途径、分子调控机制以及生产菌株的理性改造等方面进行综述,希望能够帮助读者加深对本领域研究的了解,并对未来工作进行了展望.     

多醚类化合物的研究和开发

由于世界各国对多醚类的化合物不断进行研究和开发,它的应用领域正在不断地扩大,尤其是通过微生物发酵产生的多醚类化合物,至今已经发现有200多种.它们大部份是由链霉菌发酵所产生的,其中尤其是吸水链霉菌、白色链霉菌是产生多醚类化合物最常见的产生菌.     

博宁霉素产生菌-轮枝链霉菌高产株筛选与应用

采用微波辐射7 min与丁胺菌素30μg/mL抗性复合诱变技术,选育博宁霉素产生菌-轮枝链霉菌B03菌株,结果获得一株高产量诱变株HB42,通过生产罐放大应用后,发酵效价与发酵指数均较出发菌株提高95%;经提纯精制后,博霉宁霉素总收率提高5.3%,成品有效组分含量提高4.7%,生产水平与精品质量得到较大幅度提高.该方法操作简便,筛选效果佳,在微生物育种工程中,具有推广应用价值.     

阿维菌素的生物合成研究进展与展望

阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)由于可以产生杀虫抗生素---阿维菌素而备受研究者的青睐.多年来该菌得到了全面系统的研究,其基因组序列也已测定.文中综述了阿维链霉菌中阿维菌素生物合成代谢途径方面的研究,并对后续研究进行展望.     

林肯链霉菌原生质体形成、再生和融合的研究

林肯链霉菌生长在0.5%甘氨酸的S培养基中,能较好地被溶菌酶破壁形成原生质体。原生质体能在RB培养基上再生,但不能在R_2培养基上再生,这和已报道过的其他链霉菌不同。78-11菌株的再生频率约为25.7%,S-3菌株的再生频率约为20.5%。PEG(聚乙二醇)1000对诱导融合的效果较好,重组频率最高可达10~(-2)。重组子和亲本在培养特性、孢子形态方面无特殊差异,但经C_O~(60)诱变后重组子的正变率超过亲本。