利用限制性内切酶技术获得木霉菌插入变异

利用限制性内切酶介导整合（REMI）技术,通过插入线性化质粒DNA获得了生物防治番茄灰霉病（Botrytis cinerea）效果优于初发菌Trichoderma viride T21菌株（初发菌）的3个变异株Ttrm31、Ttrm34和Ttrm55．变异株本身产生的和诱导番茄植株产生的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性均比初发菌高,因此,通过REMI技术可以获得新的有益变异株,在一定程度上提高了生物菌株防治番茄灰霉病的水平,尤其是提高诱导番茄抗病水平．对侵染花器和叶片的灰霉病防效分别比原生物防治木霉菌株提高了16．9％和89／6,说明REMI技术可以用于改良生防木霉菌株的功能,提高生物防治效果．     

仙客来组织培养快繁技术研究

将仙客来的块茎、叶片、根尖、花梗外植体,在含有不同质量浓度植物激素的几种培养基中培养,根据培养结果,筛选出最佳诱导和增殖培养基的配方;同时,在经过消毒处理的不同成份的无土栽培基质中,进行试管苗的炼苗和壮苗培养,研究其健身栽培技术.结果表明,仙客来的离体繁植以其块茎为最佳,丛芽的增殖以MS+NAA0.1 mg/L+6-BA2.0mg/L+蔗糖30g/L为最佳,生根培养基以1/2MS+NAA0.3mg/L+蔗糖30g/L为最佳.泥炭∶蛭石∶珍珠岩(5∶3∶2)混合是仙客来试管苗最佳健身栽培基质,移栽成活率达98%.     

麝香百合、仙客来、瓜叶菊花芽分化的调控

复合生长调节剂处理对麝香百合等花芽的分化有明显的作用。其中A1,A2可促进麝香百合花工芽的分化,A2效果较A1好,经A2处理后,百合开花率达100%,同时使植株的开花数增加了1倍,花径增长1倍;B1,B2明显促进仙客来花芽分化,B2效果较B1好,经B2处理后,处理仙客来较对照植株的花蕾数增加41%;C1,C2明显促进瓜叶菊花芽分化,其中C1处理的瓜 叶菊较对照植株的花蕾数增加52%。     

食用菌木霉种类鉴定

从不同食用菌上分离到57株木霉,按Rifai和Bissett的分类系统共鉴定出6种木霉：康氏木霉（Trichoderma koningii）、拟康木霉（Trichoderma pseudokoningii）、哈茨木霉（Trichodema harzianum）、桔绿木霉（Trichoderma citrinviride）、长枝木霉（Trichoderma longibrachiatum）和非钩木霉（Trichodema inhamatum）。首次从白灵菇的培养基质上分离到了非钩木霉、康氏木霉和拟康木霉,后两种是食用菌上木霉的优势种,分别占总菌株数的50．87％和26．32％。     

中国水生维管束植物检索表(二)

(四)挺水植物检索表1.有明显的叶片和叶柄之分,(包括:叶在茎上轮生或对生,而无叶柄、或叶柄极短.此种叶绝无叶鞘)2.叶为复叶3.3-4枚叶片掌状着生4.四个倒卵形叶片成十字排列,不开花,于基部生孢子囊果     

甘农四号紫花苜蓿愈伤组织诱导研究

以甘农四号紫花苜蓿的下胚轴、叶柄、子叶、叶片为外植体,研究了不同质量浓度的2,4-D对愈伤组织诱导的影响.结果表明:不同外植体的愈伤组织发生能力存在显著差异,外植体愈伤率下胚轴>叶柄>子叶>叶片.下胚轴在接种后16d的愈伤率高达100%,显著高于其他外植体.叶柄、子叶、叶片的愈伤率分别为:95.65%,88.06%,79.37%.其中叶柄的愈伤率显著高于子叶和叶片,子叶和叶片之间差异不显著.在附加3个不同质量浓度2,4-D的MS培养基上外植体的愈伤诱导率差异不显著,愈伤率均达到了90%以上.     

高乌头愈伤组织诱导及增殖研究

以高乌头(Aconitum Smomontanum Nakai.)植株为材料,研究了不同外植体(芽、叶片、叶柄)、基本培养基、植物生长调节剂和培养条件对高乌头愈伤组织诱导和增殖的影响.结果表明:以MS或B5为基本培养基,附加不同组合的2,4-D、NAA、KT、BA,均可诱导产生愈伤组织,但不同外植体、不同生长调节剂组合对愈伤组织发生均有一定影响;作为外植体,高乌头的芽、叶柄和叶片都可顺利诱导出愈伤组织,生长素2,4-D对高乌头外植体的脱分化起促进作用,但 NAA却抑制愈伤组织的形成,细胞分裂素KT和 BA均能与2,4-D组合促进愈伤组织的诱导.在B5 2,4-D 2.0 mg·L-1 BA 1.0 mg·L-1培养基上,光照14 h·d-1, 温度(22±1)℃,最有利于高乌头愈伤组织的诱导.在此条件下,30 d后,芽的诱导率达95%,叶片的诱导率达70%,叶柄的诱导率达87.5%.愈伤组织最佳增殖条件为B5 2,4-D 2.0 mg·L-1 KT 0.5 mg·L-1,光照14 h·d-1,温度(22±1)℃.继代培养 14 d后 ,平均增殖率达197.5%.     

仙客来愈伤组织诱导和不定芽形成

以仙客来品种"国旗红"成株的叶片和叶柄为外植体,分别接种到MS培养基(Murashige & skoog)+6-苄基嘌呤(BA) 2.0(mg/L,下同)+萘乙酸(NAA) 0.5和1/2MS+BA 2.0+激动素(KT) 0.25+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D) 0.5两种培养基,研究外植体类型、培养基、切割方式和摆放方法对愈伤组织诱导和不定芽形成的影响.结果表明, 叶片是诱导愈伤组织和形成不定芽的理想外植体;将带主脉的叶片,以反面向上的方法接种到1/2MS+BA 2.0+KT 0.25+2,4-D 0.5中诱导效果最佳,愈伤组织诱导率达100%,不定芽形成率和平均个数分别为66.67%和4.0.此外,对不定芽的继代培养进行研究, 结果表明,不定芽可继代增殖.     

马铃薯叶片外植体再生系统的建立

选用马铃薯的叶片作为外植体,MS为基本培养基,采用不同浓度组合的BA和NAA对马铃薯再生系统的影响进行了研究.结果表明:最佳培养基为MS+1.5 mg/L BA+0.3 mg/L NAA,分化率为75%.采用该培养基研究了不同着生位置的叶片、同一着生位置叶片的不同切断以及叶片在培养基上的放置方式对马铃薯叶片再生的影响.结果表明:带有叶柄的下切断比其余叶片切断不定芽再生率高,幼嫩叶片比老化叶片再生率高.叶片再生系统的建立为马铃薯的遗传转化和工厂化育苗奠定了基础.     

湖南半蒴苣苔属一新变种：鬼溪半蒴苣苔

描述了新发现于湖南的苦苣苔科一新变种——鬼溪半蒴苣苔（Hemiboea gracilis Franch. var. guixiensis G. X. Chen, X. M. Xiang et L. T var. nov.）,新变种与原变种纤细半蒴苣苔（Hemiboea gracilis Franch.）在形态上相近,但通过野外调查以及室内鉴定发现,新变种全株茎疏生柔毛,叶两面和叶柄密生硬毛,苞片、花序梗、花梗、花萼和花冠密生柔毛,果尖端疏生柔毛,二者易于区别.     

木霉菌制剂对禾谷全蚀病的防治作用

木霉菌是对多种植物病原真菌有作用的拮抗体,包括Gaeumannomyces graminis var.tritici(Ggt),Pythium spp.,Rhizoctonia solani以及Fusarium spp．木霉菌能产生抑制植物病原真菌生长与活力的抗菌物质,是理想的植物病害生物防治菌。有效的生物防治方法可为农民提供低风险而又灵活的病害防治措施,特别是在需要减缓病原菌对化学杀菌剂产生抗药性的情况下。本文综合介绍了在南澳大利亚田间进行的利用康宁木霉菌(T.koningii)防治禾谷类根部病害的结果,并重点介绍澳大利亚在商品化开发方面的工作进展。在病害发生严重的情况下,康宁木霉菌可降低小麦全蚀病和丝核菌根腐病发病程度分别达2,4％和48％。小麦产量增加7％,也能降低大麦丝核菌根腐病发病程度达59％。康宁木霉菌也能够防治由Ceratocystis paradoxa引起的甘蔗凤梨病。     

芍药灰霉病病原鉴定及生物学的研究

<正>芍药灰霉病在南京、杭州、上海主要在花期后危害芍药及牡丹的叶片,形成叶斑。病原分生孢子无色至淡褐色、椭圆形或卵圆形,大小为8.0～15.0 × 7.0～10.0μm。人工接种可为害辣椒、葡萄、黄瓜、茄子、番茄。根据其孢子形态及寄主范围病原鉴定为Botrytis cinerea Pers.ex Fr.。病原菌丝的生长最适温度为20°～24℃,并在pH值4～8之间都生长良好。     

酶制剂在玉米秸秆双菌种固态发酵生产微生物油脂中的应用

以玉米秸秆为原料,利用纤维素酶和康宁木霉将玉米秸秆转化为可发酵糖,皮状丝孢酵母利用可发酵糖生产微生物油脂。采用正交试验,分别通过检测发酵物中还原糖含量和油脂产量,确定微生物油脂生产的最佳条件。研究结果表明：利用纤维素酶和康宁木霉处理玉米秸秆,在纤维素酶添加量为0.15％,康宁木霉接种量为10％,处理温度为26℃,处理时间为6 d的条件下,可获得还原糖含量为4.852 g/L的玉米秸秆降解物。利用皮状丝孢和酵母发酵玉米秸秆降解物生产微生物油脂,在皮状丝孢酵母接种量为9％,培养温度为26℃,培养时间为7 d的条件下,每100 g发酵产物中,可获得微生物油脂3.321 g。     

康氏木霉固体发酵生产纤维素酶条件的研究

为利用康氏木霉(Trichoderma.koningii)降解稻草提供工艺参数,以康氏木霉(T.koningii)N18为菌株,进行了固体发酵产纤维素酶条件的优化。确定了康氏木霉(T.koningii)的最佳固体发酵培养条件:稻草:麸皮的最佳比例为6:2,最佳氮源为(NH)SO,碳氮比为6:1,含水量为200%,最适产酶pH为6.0,最佳产酶温度为28℃,最佳产酶时间为7d,康氏木霉(T.koningii)所产纤维素酶各组分酶活力分别为:羧甲基纤维素酶活力为321.64U.mL,滤纸分解酶活力为59.58U.mL。4 2 4-1-1     

Induction of volatile organic compound in the leaves of Lycopersicon esculentum by chitosan oligomer

Induction of VOCs (volatile organic compounds) in the leaves of Lycopersicon esculentum by chitosan oligomer elictor was studied. The results demonstrated that VOCs in chitosan oligomer-treated leaves showed stronger inhibitory activity against Botrytis cinerea than that in water-treated leaves, and the spore germination was reduced by 22.1% in 144h after elicitor treatment at a concentration of 1.0%. A total of 16 constituents were detected in water-treated leaves, and chitosan oligomer treatment increased the amount of VOCs production. Chitosan oligomer at different concentration and different time courses of induction treatment could induce different amount of VOCs. Chitosan oligomer resulted in an optimal production of VOCs in 144h after elicitation at concentration of 0.6%. Chitosan oligomer also enhanced activtity of PAL and LOX. The results showed that the enhancement of VOCs production after chitosan oligomer treatment might be an important agent for L.esculentum acquiring resistance against pathogen.     

康宁木霉固态发酵生产纤维素酶与木聚糖酶的研究

以稻草和麸皮为主要原料,采用康宁木霉QF-02固态发酵生产纤维素酶及木聚糖酶。对影响产酶的多个因素进行了研究,获得了如下优化培养条件：稻草粉与麸皮比为3：2（w／w）,原料粒径为20目,料水比为1：1．5（w／v）,起始pH值5．5,28．5℃培养时间120h。菌种在此优化培养条件下的滤纸酶活、β-葡萄糖苷酶活、木聚糖...     

植病生防木霉菌的RAPD分析

对分离自不同植物根际的38株木霉菌菌株(包括哈茨木霉菌，绿色木霉菌，康宁木霉菌和绿木霉菌)进行了棉花立枯病盆栽防治试验以及用290条随机引物进行了RAPD分析。结果表明，38株木霉菌都能够降低病害严重度，按照防治效果的高低，38个菌株可以分为6个组。共有59条引物产生多态性扩增条带，根据UFGMA聚类分析，其中9条引物(S1，S42，S60，S122，S146，S147，S171，S180，S181)在防效最高的菌株中产生相近的与其他菌株不同的扩增条带，表明这RAPD技术可以用于本霉菌类生防菌株的筛选。     

紫外线诱变康宁木霉提高酶活力的研究

通过对康宁木霉菌种的诱变、筛选和固体发酵培养,研究了培养基、培养时间、诱变时间及pH值对诱变菌所产酶的活力的影响．结果表明,康宁木霉经诱变5min,在pH为6．0的玉米秸PDA培养基上培养72h,产生的C1酶和Cx酶的酶活力较高,C1酶的酶活力由73u／g提高到176u／g,增加了2．41倍,Cx酶的酶活力由798u／g提高到2069u／g,增加了2．59倍．     

白黄链霉菌TD-1菌株挥发性有机物对灰霉孢菌的抑制作用

为探讨白黄链霉菌TD-1菌株挥发性有机物(VOCs)对灰霉孢菌的抑制作用,采用双皿对扣法测定VOCs对灰霉孢菌的抑菌率,通过扫描电镜观察VOCs对灰霉孢菌菌丝体的影响,利用GC/MS技术对VOCs组分进行分析。结果表明,作用5d后,6.0g TD-1菌株麦麸培养物产生的VOCs对灰霉孢菌的抑菌率为66.67%,灰霉孢菌的产孢量(3.9×10⁶个/cm²)较空白组(5.9×10⁷个/cm²)显著降低(p<0.01),且菌丝形态异常、表面粗糙,菌体细胞膜通透性增强。TD-1菌株VOCs由63种组分组成,其中2-甲基异冰片(13.52%)和1,4-二甲基金刚烷(14.08%)的相对含量较高。白黄链霉菌TD-1菌株产生的VOCs对灰霉孢菌良好的抑制作用为将其开发成生物熏蒸剂提供了理论依据。