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采用荧光光谱、原子力显微镜、琼脂糖凝胶电泳等技术探究CdS-COOH-EcoRI复合物与DNA的相互作用.研究发现,小粒径的CdS-COOH-EcoRI复合物与DNA除了有特异性结合,还发生非特异性结合.DNA相对浓度比较大以及恒温孵育时间较短时,以特异性结合为主;而随着DNA相对浓度的减小以及恒温孵育时间的延长,会伴有非特异性结合.Ca2+存在时,可以通过延长孵育时间“激活”酶切反应,使得DNA被剪切.因此可以通过改变DNA相对浓度和孵育时间来调控EcoRI对DNA的剪切. 相似文献
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在pH 6.O的Tris-HC1介质中,以溴化乙锭为荧光探针,研究了阿米卡星与小牛胸腺DNA之间的相互作用.采用荧光光谱、吸收光谱、Scatchard方程、圆二色谱、黏度等手段,对作用机理进行了研究,结果表明阿米卡星与小牛胸腺DNA之间的作用方式为混合方式,嵌入与沟槽作用是两种主要作用方式.求得25℃时的结合常数为2.2×104L·mo1-1. 相似文献
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在pH 7.4的Tris-HCl介质中,以溴化乙锭为荧光探针,研究了头孢曲松钠与小牛胸腺DNA之间的相互作用.采用荧光光谱、吸收光谱、Scatcllard方程、圆二色谱、热变性等手段,对作用机理进行了研究,结果表明头孢曲松钠与小牛胸腺DNA之间的作用方式为混合方式,嵌入与沟槽作用是两种主要作用方式.求得25℃时的结合常数为6.3×104L·mol-1. 相似文献
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用荧光光谱、紫外吸收光谱及圆二色光谱技术研究Fe3O4磁性纳米粒子与透明质酸酶(Hyaluronidase)的相互作用,结果表明Fe3O4磁性纳米粒子对透明质酸酶的荧光猝灭机理为静态猝灭;二者结合常数K在104数量级,说明Fe3O4磁性纳米粒子与透明质酸酶有较强的结合;二者相互作用过程中各热力学常数的变化表明Fe3O4与透明质酸酶的作用过程是一个自发过程,而且他们之间的结合力为疏水作用力;紫外吸收光谱研究发现Fe3O4能改变透明质酸酶的空间结构;圆二色谱数据表明Fe3O4磁性纳米粒子能够引起透明质酸酶的二级结构发生变化。 相似文献
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小檗碱和溴化乙锭与DNA的光谱学作用研究 总被引:4,自引:0,他引:4
利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、琼脂糖凝胶电泳方法研究了小檗碱(berberine)和溴化乙锭(EB)与ct-DNA的光谱学作用.在ct-DNA存在时,berberine和EB的荧光强度都有较大的提高,pH的改变对二者荧光光谱的发射峰位与强度影响不大;紫外-可见吸收光谱随ct-DNA浓度的增加,表现出减色效应;二者都使ct-DNA的圆二色谱正负峰的吸收强度有所增加;琼脂糖凝胶电泳实验表明,EB-DNA体系的发光强度高于berberine-DNA体系.在DNA的定量测定中,可用无毒、副作用的小檗碱代替有致癌性的溴化乙锭,为安全、无环境污染、定量测定DNA提供了新试剂使用基础. 相似文献
6.
为探讨苹果多酚氧化酶(简称PPO)的结构与功能关系,应用紫外差示光谱、同步荧光光谱及圆二色性光谱(CD)等生物物理技术和酶活性测定研究了外加Zn^2+对苹果PPO的分子构象和酶活性的影响。结果表明,微景锌的加入能增加酶的活性和提高α-螺旋含量,当[Zn^2+]/[PPO]为2.0左右时,苹果PPO活性最高,继续增加[Zn^2+]/[PPO]比值,酶活性开始下降,比值为2.7以后,Zn^2+表现了对PPO活性的抑制,α-螺旋含量下降;Zn(Ⅱ)可能与PPO中的组氨酸残基进行了配位,(ImH)σN+σN→Zn^2+、(ImH)σ→Zn^2+、(ImH)π1→Zn^2+、(ImH)Ⅱπ→Zn^2+分别为227,241,265,335(nm);色氨酸和酪氨酸的荧光均受到Zn^2+的猝灭,但它们的微环境在Zn(Ⅱ)-PPO的相互作用中基本保持不变。 相似文献
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为研究阿维菌素残留被生物体吸收后,在生物体内的作用机理,在模拟生理条件下,应用荧光光谱、圆二色谱和同步荧光研究阿维菌素与溶菌酶相互作用的活性机理.研究表明,阿维菌素与溶菌酶的作用机理为荧光静态猝灭;两者通过氢键和范德华力形成1︰1结合,结合距离为4.55 nm;298、303和308 K时的结合常数分别为1.10×105、1.08×105和0.38×105 L·mol?1,结合强度紧密;同步荧光和圆二色谱证实阿维菌素影响溶菌酶的二级结构,使溶菌酶分子α-螺旋结构含量减小.本文为农药残留在生物体内中代谢过程、解毒和指导科学使用农药提供理论依据. 相似文献
8.
合成并研究了二氯邻菲咯啉合钴化合物与 DNA的相互作用 .通过元素分析 ,红外 ,紫外对其进行表征 ,应用荧光光谱、紫外光谱研究了配合物与小牛胸腺 DNA的主要结合方式 ,得出该配合物与 DNA的键合常数为2 .4× 10 4 ,凝胶电泳实验表明该配合物是一种简单高效的 DNA氧化切割试剂 相似文献
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利用原子力显微镜与磁镊技术研究不同浓度的壳聚糖与多种DNA分子的作用,对其凝聚形态及力谱曲线进行观察。在恒力情况下,壳聚糖与DNA的电荷比k分别为3和4时,从DNA的力谱曲线上可以看见0.2~0.5μm左右的跳跃阶梯及线性增长区域,原因可能是壳聚糖-DNA聚合物中出现了环状、棒状及球状结构;利用原子力显微镜观察壳聚糖与λ-DNA及bpr322-DNA作用后的凝聚形态,发现随着壳聚糖与DNA电荷比k的增加,球状与棒状聚合物的比例明显减小,而且凝聚物的尺寸也整体减小。最后根据实验结果,建立了壳聚糖导致DNA构象变化的直观模型。 相似文献
10.
以小牛胸腺DNA为研究对象,探讨了4’-苯基-3-溴-8-[N,N-二(2-羟基乙基)氨基甲基]黄酮(PB-BHAMF)与小牛胸腺DNA之间的相互作用模式.在以吖啶橙(AO)为荧光探针的实验中,DNA-AO复合物的荧光被PBBHAMF猝灭,其猝灭过程主要为静态猝灭;DNA的存在使PBBHAMF的紫外光谱发生了减色效应,DNA的粘度增大,CD光谱274 nm处信号发生变化,这些都能判断PBBHAMF与DNA发生了嵌插结合.此外,红外光谱结果表明PBBHAMF与DNA还存在静电结合. 相似文献
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琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法 总被引:4,自引:0,他引:4
对现有的DNA片段回收方法进行了改进.琼脂糖凝胶中目的DNA片段条带切割后,浸入适量的TE溶液(0.2~0.4 mL/g 琼脂糖胶),在37 ℃水浴保温15 min,以溶出凝胶中的DNA,利用相应的引物对浸出的微量DNA样品进行与原PCR反应相同条件下的PCR扩增,直接用75 %乙醇沉淀后,适量TE溶解得到回收的目的DNA样品.此法回收的DNA片段可用于分子克隆,特别是适用于TA载体的克隆与测序,适合大批量微量样品的准确回收,防止了因试剂盒回收造成的微量DNA片段的丢失. 相似文献
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用AFM对质粒DNA在云母表面的自组装研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过原子力显微镜(AFM)对在云母表面上自然挥干的不同质量浓度的质粒DNA分子进行扫描,原子力显微镜图像显示:当质量浓度为0.1μg/mL时,DNA分子呈现出线性结构,随着质量浓度加大至1μg/mL,DNA分子相互缠绕为网状结构,质量浓度为10μg/mL时,呈现出具有典型的聚合形态,当质量浓度进一步加大到100μg/mL,则呈现出明显的树状脉络结构.通过原子力显微镜对质粒DNA分子的形态表征,可以看出质粒DNA分子具有典型的自组装的特性. 相似文献
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LIU Tao CHEN Long HOU Sen XUE Yonglai FENG Xizeng 《科学通报(英文版)》2006,51(5):530-535
GENE THERAPY IS A COMMON PROCESS TO DELIVER EXTRIN- SIC GENES INTO TARGET CELLS FOR FURTHER GENE EXPRESSION, FOR THE PURPOSE OF TREATING DISEASES. A WELL DESIGNED GENE DELIVERY CARRIER CAN EFFICIENTLY PACKAGE AND PRO- TECT NUCLEIC ACID FROM BEING DIGESTED BY A VARIETY OF ENZYMES IN VIVO AND SHOULD BE ABLE TO SPECIFICALLY LO- CATE EXTRINSIC GENES INTO THE TARGET ORGANISMS. S… 相似文献
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在pH7.4的Tris—HCl介质中,以盐酸小檗碱为荧光探针,研究了利福平与鲑鱼精DNA之间的相互作用.采用荧光光谱、吸收光谱、热变性等手段对作用机理进行了研究,结果表明主要作用方式为嵌入方式.求得结合常数为1.08×10^4L·mol^-1,结合位点数为4.53. 相似文献