韭菜凝集素的纯化及部分性质的研究

用葡聚糖凝胶柱层析法从韭菜的叶片组织分离出一种对新鲜兔红细胞有强烈凝集作用的凝集素，ＰＡＧＥ鉴定和高碘酸－Ｓｃｈｉｆｆ试剂反应均显单一条带。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明该凝集素含有３个亚基，其相对分子质量分别约为３１０００、２４０００和２１０００。韭菜凝集素具有一定的热稳定性，在酸、碱处理中该凝集素对碱处理较酸处理稳定，氨基酸组成分析表明韭菜凝集素含有１４种氨基酸，其中半胱氨酸含量较高。     

花椰菜凝集素的纯化及部分性质的研究

花椰菜凝集素由花蕊组织经生理盐水抽提、硫酸铵沉淀和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ凝胶层析纯化获得．ＰＡＧＥ鉴定和高碘酸－Ｓｃｈｉｆｆ试剂反应均显单一条带，说明该凝集素为纯化的糖蛋白．经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱过滤分析，其相对分子质量约为９４０００．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明该凝集素含有４个亚基，其相对分子质量分别约为２８０００、２５０００、２２０００和２００００．花椰菜凝集素经５０℃处理５分钟仍保持高的凝集活性，该凝集素对酸处理较碱处理稳定．     

黄牛肝菌凝集素的分离纯化及部分性质

黄牛肝菌(Boletus fulvus)经生理盐水浸提、CM-Sepharose、DEAE-Sepharose及Sephacryl S-100分子筛层析后得到黄牛肝菌凝集素(BFL).经SDS-PAGE电泳及Sephacryl S-100分子筛层析检测表明,所得的BFL是由两个分子量约15.8kDa、非二硫键相连的亚基组成的表观分子量为32kDa的二聚体.BFL可快速凝集兔血红细胞,其最低凝集浓度为3.9μg/mL;糖抑制试验表明,胃粘蛋白、甲状腺球蛋白、卵粘蛋白和卵清蛋白均可抑制BFL活性.当温度在70℃以下和pH值在6.0~9.8之间时,BFL凝血活性基本不变.然而当温度至90℃以上和在极端pH值下,BFL凝血活性减弱甚至完全丧失.不同浓度的脲和盐酸胍对BFL凝血活性的影响表明:随着变性剂浓度的增加,BFL的结构逐渐被破坏.     

香葱凝集素的分离纯化及其部分性质的研究

香葱叶片经生理盐水抽提、硫酸铵沉淀、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５和Ｂｏ－ＧｅｌＰ－３０柱层析分离得到香葱凝集素。该凝集经聚丙烯酰胺凝胶电泳、糖蛋白色均显示单一条带。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得两条带相对分子质量分别为２９０００和２３０００，表明该凝集素是由两个不同的亚基组成。     

木菠萝凝集素的纯化与性质研究

木菠萝种子经抽提、４０－６０％饱和度度硫酸铵沉淀和Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和层析，得到纯化的木菠萝凝集素（Ｊａｃａｌｉｎ）。Ｊａｃａｌｉｎ分子量约为５８２００，由分子量分别是１４０００和１５８００的亚基组成，等电聚焦电泳显示多条区带，其ＰＩ为５．７－８．６５，Ｓｃｈｉｆｆ’ｓ试剂染色证明它是一种糖蛋白，Ｎ－末端为精氨酸和甘氨酸。Ｊａｃａｌｉｎ能凝集除山羊、鸡以外的多种动物和人Ａ、Ｂ、Ｏ和Ａ     

花椒(Zanthoxlyum bungeanum)凝集素的纯化及性质研究

凝集素是一类具有糖专一性、可促使细胞凝集的蛋白质或糖蛋白。对凝集素的研究早期注意力集中于豆科植物,以后逐渐发现其它科植物也含有凝集素,已经检测的三千多种植物抽提液中,近千种具有血凝作用,其中属于豆科的有六百余种。到目前为止,已纯化并鉴定了性质的凝集素有一百多种。     

象鼻南星(Arisaema elephas S.Buchet)凝集素的分离纯化及部分性质研究

本文用Sepharose 4B交联鸡卵类粘蛋白亲和层析柱,从天南星科植物象鼻南星(Arisaema elephas S.Buchet)中,纯化出一种具有凝集红细胞活性的糖蛋白.分子量约13,500道尔顿;等电点pH4.5;含糖量约10％.测得肽链N-末端为L-丙氨酸,并对其氨基酸组成进行了分析.象鼻南星凝集素(AEL)能选择性地凝集人的O型红细胞,及鸽、兔、小鼠、马和熊猫等动物的红细胞,但不凝集人的其它血型及鱼、蛙、龟等动物的红细胞.AEL具有光淋巴细胞转化的功能.能凝集人和某些动物的精子.通过FITC荧促标记,初步观察了AEL受体性精子表面的分布.     

山绿豆(Phaseolus minimus Roxb.)的染色体核型分析

对山绿豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｍｉｎｉｍｕｓＲｏｘｂ．）的染色体数目及核型进行了初步研究,结果２ｎ＝２２．核型分析表明,１１对染色体中,２对为正中着丝粒染色体,８对为中部着丝粒染色体,１对为近中部着丝粒染色体,其核型公式为Ｋ２ｎ＝２ｘ＝２２＝４Ｍ＋１６ｍ＋２ｓｍ,核型类型为２Ｂ型,与栽培绿豆（Ｐ．ａｕｒｅｕｓＲｏｘｂ．）核型Ｋ２ｎ＝２ｘ＝２２＝１８ｍ（２ＳＡＴ）＋４ｓｍ核型类型（２Ｂ）相比,二者在染色体数目及核型类型上是一致的,但染色体类型及每种类型的数量是不同的．     

小白芸豆凝集素的分离纯化及性质研究

从小白芸豆中分离纯化出一种新的凝集素,对其部分理化性质和生物活性进行研究.小白芸豆经过去皮粉碎、浸提、硫酸铵分段盐析、SP Sepharose阳离子交换、Q Sepharose阴离子交换和Superdex 200凝胶过滤层析后可得到小白芸豆凝集素(Phaseolus vulgaris var.albuslectin,PVAL)纯品.测定了PVAL的表观分子质量、亚基分子质量、糖含量、等电点、氨基酸组成、酸碱稳定性以及抗癌性.PVAL的表观分子质量为136 ku,是由2种分子质量分别为36.2 ku和32.2 ku的亚基组成的四聚体,糖含量为4.93%,等电点分布在pH5.3~6.0之间.PVAL分子无半胱氨酸,也无二硫键,疏水性氨基酸质量分数约为37%.PVAL对酸碱的耐受性比较好,并且对肿瘤细胞MDA-MB-435S有较好的抗性.     

白附子凝集素的亲和纯化及其理化性质的研究

用鸡卵类粘蛋白—Sepharose作亲和吸附剂,以线性离子梯度洗脱后,活性部分进一步于Sepharose 6B 凝胶过滤,所得凝集素制品经连续PAGE(pH8.9和pH 4.3)以及Disc—SDS—PAGE鉴定,均呈单一蛋白带,用SDS—PAGE和凝胶渗透色谱测其分子量分别为22,500和24,000.凝胶等电聚焦测其pI为4.6,氨基酸组成分析表明该凝集素富含Asp,而含硫氨基酸甚少,DNS—聚酰胺薄膜层析分析其N—未端氨基酸残基为Ala.紫外吸收光谱表明该凝集素在pH7.5、0.1M PBS下,其吸收波峯在275nm,低谷在250nm.酚-硫酸法测其总糖量为7.5％.凝集素浓度低至每毫升1微克时,对免红细胞仍有凝集作用.     

绿豆凝集素的分离纯化和若干性质的研究

以猪甲状腺球蛋白—ABSE—交联琼脂为亲和吸附剂,通过比较简便而经济的方法,对绿豆外源凝集素进行了纯化。所获得的外源凝集素在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示一条蛋白带,其亚基分子量约为40,000。此外源凝集素对半乳糖和木糖有相当强的专一性。对此外源凝集素的某些其它性质进行了研究。     

芦荟超氧化物歧化酶的纯化与部分性质

芦荟粗提取液经丙酮沉淀、热处理、DEAE-琼脂糖柱层析和Sephacryl S-200凝胶过滤纯化后得到3种电泳纯的SOD组分,即SOD-Ⅰ、SOD-Ⅱ、SOD-Ⅲ.分子量分别为46000D,35000D,40000D;亚基分子量分别为23000D,17000D,20 000D,说明芦荟SOD三种组分均为二具体,其等电点分别为8.90,7.60,7.35。抑制剂敏感性实验和元素分析结果表明3种芦荟SOD组分均为Fe-SOD.     

头蝇(Pipunculus sp.)的初步研究

一、前言黑尾叶蝉是水稻的重要害虫。防治病虫为害是夺取农业丰收的重要环节。用化学农药是防病治虫的重要措施。但长期使用化学农药,使黑尾叶蝉等许多害虫产生了抗性,同时也污染了环境。因此,寻求更为合理的防治方法已提到议事日程上来了。头蝇为黑尾叶蝉若虫的寄生天敌之一。为此,我们观察研究了头蝇。此虫一年发生4～5代,以幼虫在黑尾叶蝉若虫体内越冬,越冬幼虫4月中下旬离开寄主化蛹,5月上中旬羽化为成     

荆豆(Ulex europaeus L.)凝集素Ⅰ的研究

用硫酸铵分级沉淀,当饱和度达40％时,荆豆种子中的荆豆凝集素I就被沉淀出来,再经处理,获得冻干的无盐制剂.当凝集素浓度为7.8μg/mL时,就能凝集人O型血细胞,浓度分别为125μg/mL或500μg/mL时,对人B或A型血发生凝集反应.其凝集O型血的凝集作用可被Fuc所抑制.上述制剂可通过CM—纤维素柱和Sephadex G—200柱2次分子筛过滤而纯化,此纯化的凝集素在PAGE中显示一条蛋白带,浓度为1.25μg/mL时可使O型血和牛精细胞发生凝集反应;浓度为40μg/mL或500μg/mL时,可分别使B型和A型血发生凝集反应.     

岩豆凝集素寡糖链的研究

用肼解法释放了岩豆凝集素（ＭＤＬ）的寡糖链，经离子交换柱层析和滤纸层析除去肽钛和其它小分子物质，所获得的寡糖部分，以ＮａＢＨ４还原，得到还原末端为Ｎ－乙酰氨基葡萄糖醇的寡糖链。再经Ｂｉｏ－Ｇｅｌ Ｐ－４凝胶柱过滤，可以从ＭＤＬ分离出两个寡糖链。此纯化的两个寡糖链经甲醇－盐酸水解，最后制备三甲基硅醚衍生物，用气相色谱法分析其糖基组成。分析结果表明；ＭＤＬ分子中含有以Ｎ－型糖苷链连接的两条寡糖链，其糖     

锯缘青蟹(Scylla serrata)凝集素的分布及部分性质研究

采用生化方法对锯缘青蟹(Scylla serrata)凝集素进行了初步研究．结果表明．在锯缘青蟹体内具有血球凝集活性的凝集素．凝集素不仅分布于肌肉组织，同时分布于血清中．且两者在热稳定性、pH适应性、对金属离子的依赖性等方面都存在着差异．分别向肌肉提取液和血清加入50％的固体硫酸铵使凝集素沉淀．用不同饱和度的硫酸铵溶液依次对两沉淀物进行抽提．抽提物的比活力分别提高了约2．25倍和1．27倍．总活力回收分别为33．36％和16．70％．     

黄鳝超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究

黄鳝超氧化物歧化酶粗酶液，经过正丁醇脱脂，丙酮分级沉淀，DEAE-琼脂糖离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤，从黄鳝中分离纯化获得铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)，并对其性质进行研究，最终该酶的比活力为1500U／mg，提纯倍数为368．5．回收率为24．7％．该酶对KCN不敏感．而对H2O2敏感，对热较稳定，对酸碱有较强的耐受性，抗胃蛋白酶的破坏，聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电点聚焦电泳结果表明：纯化酶蛋白呈一条带，酶分子量约为85kD，亚基分子量约为16．5kD，等电点为7．15。     

川中南星(Arisaema wilsonii Engl)凝集素的纯化及其部份性质的研究

用猪甲状腺球蛋白一对氨基苯砜乙基一交联琼脂作亲和吸附剂,从川中南星的块茎中分离得到一种凝集素.其亲和层析样品,经碱性聚丙烯酰胺凝胶连续电泳显示为两条带,分子量分别为24,000和11000,前者为糖蛋白.氨基酸分析表明含硫氨基酸甚少。对兔红细胞的凝集下限为,2μg/ml,不凝集人A、B、O血型的红血球.其凝集活性受D-GalNAc的抑制.它能促使人外周血淋巴细胞有丝分裂。具较强的抗热性.体外实验对人肝癌细胞有抑制趋势.     

3种食用菌凝集素的纯化和部分生物学活性的比较

柱状田头菇、鲍鱼菇、红菇子实体浸出液经硫酸铵分级沉淀、活性炭柱吸附、DEAE-SepharoseFF离子交换层析及Sephadex G-100分子筛层析,得到纯化的柱状田头菇凝集素(Agrocybe cylindraceaLectin,简称ACL)、鲍鱼菇凝集素(Pleurotus abalonusLectin,简称PAL)、红菇凝集素(Russula depallensLcetin,简称RDL).从纯化结果来看,RDL的纯化倍数及蛋白回收率比ACL和PAL高.ACL和RDL对供试动物的红细胞都有凝集作用,PAL只凝集部分动物红细胞并表现出血型专一性.ACL、RDL和PAL除凝集红细胞外也能凝集动物的其它细胞,但PAL不凝集S180瘤细胞.此外,3种凝集素也能凝集某些微生物,如细菌、放线菌、植物病原菌.凝集结果表明ACL、RDL的凝集活性普遍高于PAL.