耐高温巴氏杜氏藻突变株的诱变和鉴定

采用紫外线辐射的方法对巴氏杜氏藻(Dunaliella bardawil)进行诱变.经过夏日高温(42~52℃)筛选,得到一耐高温的突变株,命名为Dunaliella bardawilvar.H-42 Huang&Liu(简称H-42).研究结果表明,在每天42℃处理6 h的条件下,H-42达到生长平衡期时藻细胞密度为初始密度的4.5倍,而对照在第5天时细胞密度几乎降为零.通过显微镜观察并测量,证明突变株的细胞体积为(0.65~1.27)×10-15m3,是原出发株的3.0~3.4倍.蛋白质SDS-PAGE电泳表明,H-42在大约24 kD和30 kD处分别比对照多出一条新的蛋白带,同时在大约26 kD处缺失一条蛋白带.RAPD分析表明两者的遗传相似系数为0.726.由此我们认为H-42确为一耐高温的巴氏杜氏藻突变株.     

盐生杜氏藻同步化及细胞周期的研究

盐生杜氏藻是一种海洋生活的单细胞藻类，细胞中具有细胞核，叶绿体等细胞器，细胞呈椭圆形，直径在15～20μm，人工配制的海水中培养。由于具有叶绿体，能进行光合作用，因此可以用光暗交替处理，诱导细胞同步法。Lor等人[1]报导用光暗交替诱导小眼虫得到较好的同步化结果，他指出对衣滴虫、小球藻。异变形藻等都可以用光暗交替法诱导同步化。盐生杜氏藻使用此法诱导同步化，并测定同步化后细胞周期，这方面还未见详细报道。本文就此作初步探讨。1材料与方法1.1盐生杜氏藻：来自山东海洋大学赠送，定名为Dunaliellabolt。a，采用人工配制…     

杜氏盐藻无菌纯化研究

首先通过杜氏盐藻及藻液内优势菌对抗生素的敏感性实验确定了氨苄青霉素、庆大霉素、头孢霉素和链霉素为该盐藻的除菌工具.采用联合加入的方法,即上述4种抗生素终浓度均为800μg/mL,相同浓度连续混合处理3次,每次处理间隔2d,再结合平板稀释分离法,获得无菌盐藻.带菌盐藻的生长稍快于无菌盐藻,但会较早出现老化现象;分别回加分离到带菌盐藻中的5种优势菌会促进无菌盐藻的生长.本实验为进一步的盐藻转基因以及藻菌关系等研究奠定了基础.     

不同浓度氮、磷对杜氏盐藻生长的影响

在实验室条件下,研究了不同氮(0、0.1、0.4、0.8、1.0、1.2 g/L)、磷(0、0.015、0.025、0.030、0.045、0.060 g/L)浓度下杜氏盐藻生长增殖的关系和特征,以及氮磷比(c(N)/c(P))变化等对该藻生长的影响。实验结果表明:杜氏盐藻对氮、磷有着较强的适应能力,浓度增大藻增长率增大,浓度继续增大反而抑制藻的增长,属于营养依赖型藻类。不同氮质量浓度梯度对杜氏盐藻生长具有显著性影响(P<0.05),但对杜氏盐藻生长率K的影响不显著(P>0.05),最适宜的氮浓度为1.0 g/L;不同磷质量浓度梯度对杜氏盐藻的生长和生长率K具有显著性的影响(P<0.05),最适宜的磷浓度为0.025 g/L。当c(N)/c(P)为40时,最适合杜氏盐藻的生长。     

葫芦科作物属种间RAPD多态性分析

选用了１４ 个随机引物,对葫芦科３ 个属的１２ 种材料作 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 多态性分析,并对各材料的指纹图谱进行了聚类和相似性分析。结果表明,１２ 种材料基因组的分析结果与传统分类学的结果基本相符,同时３ 属内各种间都具有其特殊的扩增带,这些带可作为分子标记应用于植物的分类和鉴定。     

猕猴属种间及亚种间RAPD分析

应用ＲＡＰＤ技术分析了猕猴属（Ｍａｃａｃａ）种间和亚种间６个分类群之间的遗传多态性,共筛选出１６个随机引物每个分类群平均获得７７个遗传标记,根据遗传距离构建了系统发育进化树,结果显示从ＲＡＰＤ数据分析得到的６个分类群的相互关系与形态、同功酶、ｍｔＤＮＡ的研究结果基本一致．表明ＲＡＰＤ技术适用于猕猴属中近缘种间和亚种间的分类分析．     

盐生杜氏藻碱性蛋白的研究

以一种单细胞的盐生杜氏藻为实验材料，利用化学和机械的方法破碎细胞，然后梯度分离细胞核，用盐酸抽提细胞核蛋白质，并与小牛胸腺组蛋白相比较。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析测定所得的碱性蛋白发现盐生杜氏藻核中有三条碱性蛋白带，两条蛋白带与Ｈ３与Ｈ４相对应，另一条分子量很小。     

杜氏藻同步化生长及核型分析

经１２ｈ光照和１２ｈ黑暗的光周期诱导，杜氏藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌａ）出现同步化生长．以０．０５％秋水仙素处理、低渗及高位（６０ｃｍ）滴片，获得４种杜氏藻的核型．它们都是单倍体．染色体大多呈圆点状，极小．最长的染色体约为１．６μｍ，最短的染色体仅约０．５μｍ．染色体数分别是：Ｄ．ｐａｒｖａ１６条，Ｄ．ｂｉｏｃｕｌａｔａ２２条，Ｄ．ｐｅｉｒｃｅｉ２６条和Ｄ．ｍｉｎｕｔａ２８条．只有Ｄ．ｐｅｉｒｃｅｉ的第１至第４号和第７号染色体可见较明显的中间缢痕     

杜氏盐藻渗透压调节与三磷酸甘油脱氢酶同功酶的电泳分析

报道了盐藻在ＮａＣｌ浓度为０．１－３．５ｍｏｌ／Ｌ的培养液中均能够正常生长，其最适生长盐浓度为０．１－１．５ｍｏｌ／Ｌ，并能随大幅度的高渗震动。用超声波破壁后得到的细胞抽提液，经７．５％聚丙烯酰胺凝胶电泳，分离出３个三磷酸甘油脱氢酶的同功酶组分。其中“调渗型”同功酶被证明与渗透压调节紧密相关，同时还发现在“调渗型”同功酶附近，有４条着色较浅的同功酶带，其变化情况与“调渗型”同功酶相似。     

榛子种质资源遗传多样性的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术,对来自欧洲、美国和我国北方的共48份榛子品种或品系（包括4个种及种间杂种）的遗传多样性进行了分析．从150条随机引物中筛选出24条引物,共扩增出142条清晰可重复的带,其中多态性带130条,比例为91．5％．聚类分析将48份榛子种质分为5组：欧榛、平榛各自列为1组;杂交榛分成2个组;另外一组包括滇榛和藏榛2份种质．研究结果对榛子的种间亲缘关系进行了验证,且为同种不同品种的亲缘关系提供了更为详细的信息．     

盐藻尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(DsUGD)基因的功能预测

盐生杜氏藻（Dunaliella salina）具有极强的耐盐性,藻体含有大量的胡萝卜素、蛋白质以及多糖类化合物．目前,已有研究报道指出蓝藻多糖是其适应高盐、高碱等环境的重要因素;而盐藻多糖的作用尚未见相关研究．尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶（UDP-glucose dehydrogenase,UGD,EC1．1．1．22）是多糖合成中的一个关键酶,它催化产生的UDP-葡萄糖醛酸是多糖合成中的关键前体物质．在微生物中,该酶参与到荚膜多糖的合成,是其致病性原因所在;在高等植物中,UGD参与到半纤维素的合成,与植物细胞壁形成密切相关．盐生杜氏藻是一类低等光合植物,它没有细胞壁和荚膜,因此关于UGD在该物种中的作用有待进一步研究．     

杜氏藻Dunaliellapeircei超微结构研究

两类糖蛋白纤维构成了Dunaliella peirces的细胞外被,鞭毛和基本分别为“9+2”和“9+0”结构,首次发现的中心粒由9个三联体组成,高尔基体1～2个,眼点位于细胞质中,由二排椭圆形小球构成,内质网丰富,线粒体形状多样,在“杯形”叶绿体中发现了雏形的基粒及“杯”上的小孔,叶绿体前端凹凸不平,后端具大型淀粉核一个,细胞核位于“杯形”叶绿体的凹窝中。     

利用RAPD标记对中国石竹属植物亲缘关系的研究

利用RAPD标记研究了中国石竹属10个种和10个栽培品种亲缘关系。39个随机标记共获得242个多态位点，聚类分析结果表明可分为野生种和栽培品种2大类群，两类群的Nei(1978)遗传距离为0．4698。野生种可分为生长于湿润草甸和生长于干燥山地两类群，遗传距离为0．2428。     

长豇豆品种资源的RAPD分析

从30个随机引物中筛选出23个有效引物,共得到140条多态性带.实验平均每个引物扩增6.13条带,多态性条带数为6.09条.平均每个品种显示多态性扩增带64.35条(变幅为26~82),其变异系数为15.62%;平均每条带出现的品种次数为18.39个(变幅为1～39),频率为0.46(变幅为0.30~0.98),其变异系数为71.45%.品种间RAPD扩增带数目有别,其位点变异更大,说明供试品种间DNA序列存在不同程度差异,为根据DNA指纹有效判别品种间遗传差异提供了可能性.根据长豇豆品种DNA分子RAPD系统树图,可将长豇豆品种分为5个品种群,可弥补根据形态性状异同来判别品种的不足,揭示了由于自然和人工选择可遗传性状变异积累、地理隔离歧化和人工杂交强化基因重组等共同作用而形成的品种基因组差异的现实,也启示着品种亲缘关系确定和品种选择选配在成功改良品种中的重要性.     

RAPD技术及在遗传分析中的应用

近年来发展起来的随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）在遗传分析许多方面具有广泛的用途，它可在对物种没有任何分子生物学研究的情况下进行分子多态的检测。本文对ＲＡＰＤ技术在家系分析、居群研究、遗传图构建及基因定位方面的应用进行了综述，对在分析中可能出现的假带、ＲＡＰＤ标记显性等问题进行了讨论，并提出在进行ＲＡＰＤ分析中应该注意的问题。     

中国白粉菌属的聚类分析

为了从现有的白粉菌属分类特征体系出发,客观地研究和评价中国白粉菌属(Erysiphe)的种级分类,根据28个形态学编码性状对66个物种样本进行了类平均法系统聚类分析(UPGMA).结果表明:寄主是白粉菌属种级分类的重要指标之一;白粉菌属下暂不宜分组;不支持将鼬瓣花白粉菌(Erysiphe galeopsidis)分出本属并以之作为模式种建立新白粉菌属(Neoerysiphe)、以及将金丝桃白粉菌(E. hyperici)和车轴草白粉菌(E. trifolii)转入叉丝壳属(Microsphaera)的分类观点.     

利用RAPD标记分析甜瓜种质资源遗传多样性

应用17条随机引物分析了41份甜瓜种质的遗传多样性,结果表明甜瓜存在较大的遗传差异,其遗传距离的变异幅度在0．06-0．48之间,平均为0．31;厚皮甜瓜种质之间的遗传距离比薄皮甜瓜的大,而且厚皮甜瓜不同种质之间也可能存在较大的遗传距离,说明厚皮甜瓜与薄皮甜瓜之间或不同厚皮甜瓜种质之间配制的杂交组合可能有较强的杂种优势．41份甜瓜种质聚为两类：一类包括18份厚皮甜瓜、17份薄皮甜瓜和2份野生甜瓜种质,另一类包括4份厚皮甜瓜种质．     

盐藻粉中维生素E含量的测定

利用紫外分光光度法和高效液相色谱法对盐藻粉中的维生素E含量进行测定,比较这两种传统测定方法的优劣.结果表明,用高效液相色谱法测定盐藻粉中的维生素E含量准确可靠,据此可以建立一套完整的测定盐藻粉中维生素E含量的分析方法.     

番茄属(Lycopersicon)RAPD标记遗传分析

用26条随机引物（10bp)对番茄属9个种的43份材料进行了RAPD分析，共检测到199个位点（稳定的带），平均每条引物检测到7．65个位点；其中多态位点为146个，占总扩增位点数的73．37％；依此将番茄属43份材料划分为4个类群；供试材料间平均遗传距离介于0．041－0．452之间。