种子细胞的生长时相和紫杉醇生产的关系研究

处在生长周期不同时相的红豆杉细胞作为种子细胞,接入含来自红豆杉树皮的真菌诱导子的生产培养基中,紫杉醇的生产和种子细胞的生长时相有明显的对应关系.来自对数生长后期和稳定前期的细胞,胞内紫杉醇含量分别为26.8μg·g-1和58.1μg·g-1;来自稳定后期的细胞对诱导子反应最敏感,紫杉醇含量比来自延迟期和对数生长初期的细胞中的紫杉醇含量提高了两个数量级,达421μg·g-1.     

前体物质和化学诱导子对云南红豆杉细胞生长和产生紫杉醇的影响

研究了几种前体物质和化学诱导子对云南红豆杉细胞生长产生紫杉醇的影响,结果表明,在培养第１２ｄ培养其中添加１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１或２ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１苯丙氨酸、５ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１丙酮酸钠和１ｇ．Ｌ＾－１牛儿醇可显提高细胞中紫杉醇的含量,同对照相比,紫杉醇产量分别增加了４０．０％、９５．７％和１２１．３％;使用高盐渗透胁迫剂（３００ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１）高糖渗透胁迫剂（２５ｇ．Ｌ＾－１蔗糖和２５ｇ．Ｌ＾－１甘露醇）、桂皮酸（３ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１）和硫酸钒酰（１０ｍｇ．Ｌ＾－１）可显促进细胞中紫杉醇的合成,同时对照相比,紫杉醇产量分别增加了２３．０％、８８．０％、４２．８％和１０３．０％。     

气升式反应器中红豆杉细胞培养动力学的研究

设计了８Ｌ规模的气升式生物反应器,应用该生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,经３０ｄ培养,细胞鲜重达２６ｇ／Ｌ,干重细胞紫杉醇含量达１．１７×１０＾３ｇ／ｇ。建立了细胞生长动力学模型,结果表明该生物反应器适合红豆杉细胞的生长、代谢和产物合成。     

气升式反应器中红豆杉细胞培养动力学的研究

设计了８Ｌ规模的气升式生物反应器,应用该生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,经３０ｄ培养,细胞鲜重达２６ｇ／Ｌ,干重细胞紫杉醇含量达１．１７×１０－３ｇ／ｇ,建立了细胞生长动力学模型．结果表明该生物反应器适合红豆杉细胞的生长、代谢和产物合成．     

红豆杉细胞培养生产紫杉醇的研究进展

综述了近年来红豆杉细胞培养生产紫杉醇的研究进展, 包括红豆杉细胞培养生产紫杉醇的代谢调节、无机盐、植物生长调节因子、糖分及其它因素对红豆杉细胞生长和紫杉醇生产的影响等.着重介绍了前体饲喂、添加抑制剂和添加诱导子对红豆杉细胞生长及紫杉醇生产的影响.     

中国红豆杉悬浮细胞固定化培养生产紫杉醇

对海藻酸钠包埋法固定中国红豆杉悬浮细胞的条件进行研究,建立了一套合适的固定化操作条件,即海藻酸钠浓度为３０ｇ／Ｌ,聚乙烯醇（ＰＶＡ）浓度为８０ｇ／Ｌ,ＣａＣｌ２浓度为２０ｇ／Ｌ,包埋密度为０．２ｋｇ／Ｌ,接种密度为０．１ｋｇ／Ｌ．在此基础上,对中国红豆杉细胞固定化培养的培养基进行了优化,结果表明,从红豆杉树皮中分离出的真菌培养物作为诱导物能限制细胞生长,且明显促进紫杉醇合成,并诱导紫杉醇分泌到培养液中．在培养基中适量地添加前体亦能提高紫杉醇的产量．对红豆杉细胞固定化培养中紫杉醇合成与分泌进行了动力学研究．     

Chitosan对红豆杉PAL及Taxol合成的影响

研究了Ｃｈｉｔｏｓａｎ（聚氨基葡糖）对红豆杉悬浮培养细胞ＰＡＬ（苯丙氨酸解氨酶）活性及Ｔａｘｏｌ（紫杉醇）生物合成的影响．种胚来源的红豆杉细胞培养在改良ＭＳ液体培养基中,于培养的第１８ｄ添加不同浓度的Ｃｈｉｔｏｓａｎ．Ｃｈｉｔｏｓａｎ浓度为１００～１０００ｍｇ·Ｌ－１时对红豆杉细胞ＰＡＬ活性有明显的诱导作用,且诱导作用随浓度的增加而增强,在诱导作用下ＰＡＬ活性在１６ｈ达到峰值;Ｃｈｉｔｏｓａｎ浓度在１００ｍｇ·Ｌ－１时对红豆杉细胞的生长基本无抑制作用,增产效果最显著（约为对照组的１０倍）,Ｃｈｉｔｏｓａｎ可作为Ｔａｘｏｌ合成的诱导子．     

红豆杉细胞聚集体悬浮培养生产紫杉醇

建立了中国红豆杉(Taxuschinensis)细胞聚集体两步法悬浮培养生产紫杉醇的培养体系.红豆杉细胞于含LH1g/L,NAA0.1mg/L,2,4-D0.5mg/L及6-BA0.8mg/L的细胞聚集体形成的培养基中生长并形成聚集体,10d后转入生产培养,较大细胞聚集体的生物量比和紫杉醇产量分别较对照组提高了53.7%和82.1%;提高细胞聚集体的生物量比能显著增加紫杉醇产量.四种基本培养基中B5最适合诱导细胞聚集体的形成.生长培养12d后细胞悬浮培养物按1∶1(体积比)直接转入生产培养对细胞生长、细胞聚集体和紫杉醇形成最有利.在100μmol/L茉莉酸甲酯作为诱导子下本体系紫杉醇产量较对照组提高了一倍.     

固定化黄曲霉生产L—苹果酸的研究

报道采用海藻酸钠包埋法,以制备固定化黄曲霉生产Ｌ－苹果酸,确定最佳固定化条件和最适固定化细胞发酵条件,这些条件分别为海藻酸钠浓度２５ｇ．Ｌ＾－１,ＣａＣｌ２浓度２０ｇ．Ｌ＾－１,１０ｇ．Ｌ＾－１聚乙烯多胺和１０ｇ．Ｌ＾－１戊二醛交联,菌体浓度９０ｇ．Ｌ＾－１,葡萄糖浓度８０ｇ．Ｌ＾－１,起始ｐＨ值为６．０－７．０,培养温度３２℃,固定化细胞质量／培养基体积比例为１５／５０。     

硝酸镧对冬小麦种子萌发活力的影响

利用不同浓度的硝酸镧Ｌａ（ＮＯ３）３水溶液处理冬小麦种子结果表明；１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１和０．１μｍｏｌ．Ｌ＾－１的Ｌａ＾３＋对种子萌发有轻微的刺激作用，并促进根，芽的生长，高浓度的Ｌａ＾３＋则完全抑制了种子的发萌发；     

锇—钼酸盐—碱性染料显色反应的研究

在聚乙烯醇存在下，锇与钼酸铵和碱性染料罗丹明Ｂ，丁基罗丹明Ｂ，耐尔蓝形成离子缔合物，不同碱性染料所形成的缔合物服从比耳定律的浓度范围和摩尔吸光系分别是：０－１．２μｇ／２５ｍｌ和ε５７０ｎｍ＝２．６２×１０＾６Ｌ．ｍｏｌ＾－１ｃｍ＾－１；０－１．０μｇ／２５ｍｌ和ε５７０ｎｍ＝２．８６×１０＾６Ｌ．ｃｍ＾－１；０－１．８μｇ／２５ｍｌ和ε５８５ｎｍ＝２．８１×１０＾６Ｌ．ｃｍ＾－１；０－１．８μｇ     

双载体固定化中国红豆杉细胞的初步研究

对采用海藻酸钠和聚乙烯醇（ＰＶＡ）混合的双勒体包埋中国红豆杉悬浮细胞的条件进行了初步研究,建立了一套合适的国家化细胞条件,海藻酸钠浓度为３０ｇ／Ｌ,聚乙烯醇（ＰＶＡ）浓度为７０ｇ／Ｌ,ＣａＣｌ２浓度２０／Ｌ,包埋浓度为０．１８ｇ／Ｌ,接种密度为０．１２ｇ／Ｌ,在此基础上,对中国红豆杉细胞固定化２的培养基进行了优化,实验结果表明,从红豆杉树皮中分离出的真菌物作为诱导物能限制细胞生长,且明显促进紫杉醇     

化控Ⅱ号对玉米群体冠层结构的影响

通过层切法研究了在雌穗生长锥伸长期，雌穗小花分化期两个时期叶面喷２００μｇ．ｇ＾－１，４００μｇ．ｇ＾－１，６００μｇ．ｇ＾－１三种浓度的化控Ⅱ号对地膜玉米地上部群体结构的影响，认为雌穗生长锥伸长期叶面喷施４００μｇ．ｇ＾－１浓度的化控Ⅱ号可增加玉米光合面积，增加叶重，提高粒叶比，增加果穗产量。     

两种红豆杉离体细胞中紫杉醇含量的调节

以矮壮素、水杨酸和甘露醇为诱发子,研究了短叶红豆杉(Taxus brevifolia)和墨西哥红豆杉(Taxus globosa)离体细胞中紫杉醇含量的变化.实验结果表明:矮壮素、水杨酸和甘露醇不同程度地提高离体细胞中紫杉醇含量.短叶红豆杉的紫杉醇含量比墨西哥红豆杉的高,但诱发子诱导墨西哥红豆杉紫杉醇相对增加量大.0.5 mg*L-1水杨酸和0.5 mg·L-1矮壮素分别使短叶红豆杉和墨西哥红豆杉细胞中紫杉醇含量达到最高,分别是对照的1.8和15倍.还讨论了紫杉醇含量与愈伤组织生长的关系.     

紫杉醇生物合成与营养物质消耗的相关性

为利用现代生物技术生产紫杉醇,研究细胞悬浮培养过程中紫杉醇的生物合成,研究了细胞生长与培养液中主要营养物质的消耗情况。在Gamborg'sB5培养液中加入诱导子,对本实验室诱导筛选出的东北红豆杉B10细胞进行悬浮培养。结果发现,在诱导子的作用下,细胞内紫杉醇的含量在4d内大幅度提高,其中主要是促进了紫杉醇的两种前体化合物向紫杉醇的转化;细胞内高含量紫杉醇影响细胞的生长,可以采用两段培养法来提高紫杉醇的产量;同时,培养液中蔗糖、氮、磷、钾、镁等主要营养物质的消耗与紫杉醇的生物合成也存在密切的联系。     

葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶的生物合成

研究了黑曲霉细胞的生长及其葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶的生物合成．ＣａＣＯ３是２种酶的产酶诱导因子,其产酶模式都是延续合成型,最大比生长速度μｍａｘ、菌体得率Ｙ（Ｘ／Ｓ）、葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶合成得率Ｙ（ＧＯＤ／Ｓ）、Ｙ（ＣＡＴ／Ｓ）分别为０．０９７ｈ－１、０．０７５ｇ．ｇ－１、２９．３４μｍｏｌ·ｍｉｎ－１·ｇ－１、３８９．１７μｍｏｌ·ｍｉｎ－１·ｇ－１．也研究了各种物质对葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶活力的影响,金属离子对葡萄糖氧化酶有抑制,阴离子对葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶有抑制,还原性小分子化合物是葡萄糖氧化酶的激活剂     

珍珠花丛生芽的诱导及生根条件的研究

诱导珍珠花（Ｓｔａｐｈｙｌｅａ ｂｕｍａｌｄａ ＤＣ）丛生芽的最佳培养基为ＭＳ基本培养基附加ＮＡＡ０．２ｍｇ．Ｌ＾－１和ＢＡ５ＭＧ．ｌ＾－１,无菌苗在１／２ＭＳ培养基中附加ＮＡＡ１ｍｇ．Ｌ＾－１、活性碳０．４５ｇ．Ｌ＾－１、硫胺素１ｍｇ．Ｌ＾－１、蔗糖２０ｇ．Ｌ＾－１能长根形成完整植株。     

DApBM—V（Ⅴ）—Mn（Ⅱ）—Twenn—80体系光度法测定钒（Ⅴ）

在磷酸介质中，在Ｍｎ和Ｔｗｅｅｎ－８０存在下，ＤＡｐＢＭ与钒生成橙黄色化合物，产物至少可稳定３．５ｈ，最大吸收波长为４８５ｎｍ。摩尔吸光系数ε＝４．０１×１０＾５Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１和ε＝１．５７×１０＾４Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１，钒量在０．５－３．０μｇ／２５ｍｌ及３．０－１０．０μ／２５ｍｌ间符合比尔定律。     

温度和光照等因素对荸荠试管球茎形成的影响

“桂林马蹄”和“余杭大红袍”的荸蔼茎尖接种在ＭＳ＋ＫＴ０．１ｍｇ．Ｌ＾－１地培养基上１５ｄ后,诱导出的试管苗在ＭＳ＋６－ＢＡ２．０ｍｇ．Ｌ＾－１＋ＮＡＡ１．０ｍｇ．Ｌａ＾－１培养基上增殖培养２５ｄ后,再经６０ｄ培养可诱导出试管球茎,供试两品种试管球茎形成的最适增减其分别为ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ．Ｌ＾－１＋蔗糖９０ｇ．Ｌ＾－１和ＭＳ＋６－ＢＡ０．８ｍｇ．Ｌ＾－１＋蔗糖９０ｇ．Ｌ＾－１,最适培养条件     

红豆杉细胞悬浮培养及动力学研究

对红豆杉细胞在５Ｌ通气机械搅拌式反应器中的培养过程及动力学进行了研究。经２４ｄ培养，细胞生物量增加３倍，紫杉醇含量可达细胞干重的１．０３５×１０＾－３，建立了描述细胞生长过程的模型，采用分段多项式函数逼近关联ｕ与ｕｍ的函数Ｆ（ｓ），建立了描述产物合成的动力学方程，采用多项式函数逼近关联产物合成速率与细胞生长速率的函数，确定了部分动力学参数。