葡萄糖耐量因子生物活性测定中存在的问题

根据前人的工作,认为三价铬是萄葡糖耐量因子(GTF)的必须成分,啤酒酵母富含GTF。1967年Mertz发现啤酒酵母发酵时,加入酵母提取物能极大地促进其CO_2释放速度,1980年Mirsky和1982年Haylock进一步证实了这种作用,并以酵母发酵过程中二氧化碳释放速度增长率的大小来衡量GTF的生物活性,据此认为GTF是啤酒酵母发酵     

泡盛曲霉(Aspergillus awamori)葡萄糖淀粉酶基因克隆及在酒精酵母中的表达与分泌

泡盛曲霉(Aspergillus awamori)产生的葡萄糖淀粉酶是一种诱导的糖蛋白,它具α-1,4和α-1,6-D-glucan glucohydrolase活性,广泛用于需糖化淀粉的工艺.若将该酶基因导入啤酒酵母,构建能直接利用淀粉的酵母工程菌株,可省去淀粉液化和糖化的过程.国际上已有将泡盛曲霉的葡萄糖淀粉酶导入啤酒酵母的报道.该酶作用最适温度为60℃,对食用乙醇生产工艺较为有利.因此,我们用RT-PCR技术克隆了泡盛曲霉葡萄糖淀粉酶Ⅰ基因,将其置于酵母烯酸酶(Enolase)启动子(Promotor)和终止子(Terminator)之间,构建了表达载体,转化非营养缺陷型酒精酵母AS.2.1364,获得能将淀粉转化为葡萄糖并可发酵产生酒精的转基因酵母菌株.1 材料与方法(1)菌种及培养基 泡盛曲霉(Aspeergillus awamori)NMRL3112,葡萄糖淀粉酶Ⅰ基因供体,采用文献的培养基;酒精酵母(Sacchromyces cerevisiae)AS.2.1364为葡萄糖淀粉酶基因受体,采用YPD培养基;转化酵母采用YPDS培养基,含1%葡萄糖和1%可溶性淀粉.大肠杆菌TG1作为pAC1(由刘宏迪保存)及测序质粒pGEM-3zf( )的宿主菌,采用LB培养基,氨卞青霉素抗性.     

资讯

啤酒的新功能 日本一家啤酒公司的研究人员发现用于麦芽发酵的啤酒酵母对导致心肌梗塞、糖尿病的胆固醇有抑制作用,还可以增强血液中白血球的免疫力。 科研人员以37名年龄在24-69岁之间的男性志愿者为受试对象,将其分为两组,在8周时间里,让他们每天分别服用干燥的啤酒酵母和不含这种酵母的安慰剂,并逐一做了对比。检查他们的血脂变     

OH胁迫下稻苗体内脯氨酸积累及其抗氧化作用

脯氨酸(Pro)是植物蛋白质的组分之一,并可以游离状态广泛存在于植物体中.在干旱、盐渍等胁迫条件下,许多植物体内脯氨酸大量积累.积累的脯氨酸除了作为植物细胞质内渗透调节物质外,还在稳定生物大分子结构、降低细胞酸性、解除氨毒以及作为能量库调节细胞氧化还原势等方面起重要作用最近,Smirnoff等根据体外脯氨酸抑制OH作用下的水杨酸羟基化速率及外源脯氨酸降低强光下芥菜子叶类囊体膜脂过氧化作用而增强其光化学活性的实验,认为脯氨酸具有清除OH的作用 然而,植物内源脯氨酸是否具有清除OH的作用,尚缺乏证据.本文以Fenton 反应(Fe~(2 ) H_2O_2)作为OH源,研究了不同浓度OH源对杂交稻内源脯氨酸含量的影响,同时研究了外源脯氨酸对OH启动的稻苗膜脂过氧化作用的抑制效应,旨在为氧化胁迫下脯氨酸作为植物内源OH清除剂的论点提供实验证据     

用纸上层析法判定糖发酵鉴定酵母的试验

苏联库德里亞夫采夫提出用“简单糊精”的發酵作用来区分酵母种別的主張,是一項值得重視的意見,因为这种方法簡便地將兩种酵母——葡萄酒酵母(Saccharomyces ellipsoideus)和啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)——明显地分为兩个种,而过去权威的荷蘭酵母分类学家婁德(Lodder)等都是把葡萄酒酵母列为啤酒酵母的一个     

一个可能新的染色体脆点17q21

染色体脆点(fragile sites)是近年来新发现的一个细胞遗传学现象,它丰富了人类遗传变异库。自1965年首次发现脆点以来,迄今共发现17个罕见的遗传性脆点。根据它们表现所需的培养基条件,可以把脆点分为三类:第一类是叶酸敏感的脆点,有2q11、2q13、6p23、7p11、8q22、9p21、9q32、10q23、11q13、11q23、12q13、16p12、20p11和Xq27。所有这些脆点的表现要求培养基中缺乏叶酸和胸苷。第二类脆点对叶酸不敏感,可在培养基中自发地表现,伹最近证明可用远霉素A、BUdR等诱导,这一类脆点为16q22和17p12。第三类脆点10q25     

黑麦和水稻脯氨酸合成酶基因片段的克隆及其对受体菌的影响

生物有很多机制以适应渗透胁迫(干旱或高盐)。通常,渗透调节剂是一类有机小分子。从细菌,藻类、甲壳动物乃至高等植物,对渗透胁迫的反应往往是在体内累积一定量的脯氨酸,使细胞质的渗透压强度与环境维持平衡。因此,脯氨酸合成酶基因的表达调控可能与调渗作用有一定关系.我们用营养缺陷互补的方法,以pAT153 DNA为载体,脯氨酸缺陷菌E.Coli HB101(recA pro leu     

塔里木河下游胡杨脯氨酸累积对地下水位变化的响应

分析了胡杨体内脯氨酸累积过程与地下水位变化的关系. 研究表明, 在干旱胁迫条件下, 胡杨体内脯氨酸累积与地下水位梯度变化存在密切的关系; 胡杨脯氨酸含量随地下水位降低和水分胁迫程度加大而增加; 在地下水位5.14 ~ 3.64和10.16 ~ 9.46 m之间的位置, 胡杨脯氨酸含量的累积有两个明显异常高点. 结合野外样地调查分析, 认为3.5 ~ 4.5 m之间为塔里木河下游胡杨生存的合理地下水位, 4.5 m以下为胡杨正常生长的胁迫水位, 而当地下水位在9 ~ 10 m之间时, 为塔里木河下游胡杨生存(死亡)的临界地下水位.     

从伊拉克细菌生长培养基谈起……

从伊拉克细菌生长培养基谈起……程天友编译今年３月，调查伊拉克大规模杀伤性武器的联合国特别委员会作了使人骚动不安的声明说，伊拉克政府不能对其约２６吨适于培养细菌的生长培养基作出解释。这批生长培养基是１９８９年从西方某国进口的，伪称作医学研究用。现在，伊...     

酵母的未来用途

酵母在发酵和烘烤中使用的非常普遍,但“酵母应用的潜在前景是可惊的。”美国农业部微生物学家克莱特思P.库兹曼这样强调,酵母是极微小的单细胞真菌,其可通过出芽生殖或子囊孢子分裂而繁殖。面包酵母和啤酒酵母使糖转变成能量的形式;酵母的未来     

氘化酵母的耐快中子辐射效应

快中子的相对生物效应远大于1,所以中子弹以其强烈的中子辐射能有效地杀死生物。如果一生物体内的氕原子被氘原子所取代,在理论上是可以耐中子辐射的。我们用啤酒酵母(Saccharomyces Carlsbergensis)作材料,在氘水培养液中进行培养;同时用普通培养液作对     

通过转δ-OAT基因获得抗盐抗旱水稻

δ-OAT基因编码的鸟氨酸-δ-氨基转移酶是以鸟氨酸为前体合成脯氨酸途径中的关键酶.采用基因枪法将拟南芥δ-OAT基因导入粳稻品种中作321,通过PCR及分子杂交分析确定目的基因已插入水稻染色体中并得到超量表达.抗盐抗旱检测结果表明,水稻在受到渗透胁迫时会大量积累脯氨酸,各种条件下转基因水稻积累的脯氨酸是对照的5～15倍;同等胁迫条件下转基因株系相对生长更快,苗与根的生物学产量都要高于对照,最后种子产量也显著高于对照,如在0.1 mol/LNaCl胁迫下转基因株系相对产量提高了16%～41%,说明δ-OAT基因超量表达并积累脯氨酸在抗渗透胁迫中有着重要作用,通过转化δ-OAT基因可以获得抗盐抗旱的基因工程水稻.     

诺贝尔奖不是梦

有规律可循 把发现的偶然现象变为发明和发现的契机,是诺贝尔科学奖获得者的共同个性。 典型的比如弗莱明博士发现青霉素的过程:一天,他正在观察繁殖浅黄色细菌的培养基,由于感冒,不小心将眼泪落入了培养基中。第二天,他发现培养基中落入眼泪的地方非常干净。从这个偶然的发现中,他得出一个结论,眼泪中有一种可以分解细菌但对人体无害的物质。8年后,为了研究流行性感冒,他每天都用显微镜观察细菌的变化。一天,他发现来自空气中的绿色霉菌潜入了培养基。该霉菌形成菌落后,其周围也变成了透明地带。如果没有上次的经验,弗莱明很可能就把这个培养基扔掉了。幸运的是,发现它的     

营养缺陷培养基对染色体畸变的影响

在培养基中缺失某种必需的营养成分,常常引起细胞的生长和分裂异常。Freed报道,缺乏某些基本氨基酸使染色体畸变显著地增加。Keck用三种不同的培养基培养淋巴细胞,发现在培养基TC199中染色体畸变频率较Eagle培养基及RPM 11629培养基中更高。Sutherland。发现缺失叶酸和胸苷的培养基会促进染色体脆性位点的表现。周宪庭等发现缺失叶酸     

泡盛曲霉(Aspergillus awamori)葡萄糖淀粉酶基因克隆及在酒精酵母中的表达与分泌

<正>泡盛曲霉(Aspergillus awamori)产生的葡萄糖淀粉酶是一种诱导的糖蛋白,它具α-1,4和α-1,6-D-glucan glucohydrolase活性,广泛用于需糖化淀粉的工艺.若将该酶基因导入啤酒酵母,构建能直接利用淀粉的酵母工程菌株,可省去淀粉液化和糖化的过程.国际上已有将泡盛曲霉的葡萄糖淀粉酶导入啤酒酵母的报道.该酶作用最适温度为60℃,对食用乙醇生产工艺较为有利.因此,我们用RT-PCR技术克隆了泡盛曲霉葡萄糖淀粉酶Ⅰ基因,将其置于酵母烯酸酶(Enolase)启动子(Promotor)和终止子(Terminator)之间,构建了表达载体,转化非营养缺陷型酒精酵母AS.2.1364,获得能将淀粉转化为葡萄糖并可发酵产生酒精的转基因酵母菌株.     

接有亲水性间隔臂和L-脯氨酸功能基的交联聚苯乙烯树脂的合成

L-脯氨酸联接于交联聚苯乙烯载体上,合成出手性螯合树脂(Ⅰ),其铜(Ⅱ)络合物做配体交换色谱固定相,拆分了多种DL-氨基酸。但由于聚苯乙烯的强疏水性,致使氨基酸在色谱过程中传质困难,完成一次拆分操作往往需要数小时。我们认为,在L-脯氨酸与该载体之间插入亲水性间隔臂,可增强相应螯合树脂的亲水性,从而提高氨基酸的传质速度,使其保留     

科学饮用啤酒

现在有不少人经常饮用啤酒,有些人担心饮用啤酒有碍健康。其实,答案是否定的。啤酒是以麦牙、大米、酒花、啤酒酵母和酿造水为原料,在不锈钢设备中经过数周酿造而成的产品。啤酒中也不添加人工化学制剂、色素和防腐剂。因此,啤酒是上等的液体饮品,适量饮用有益健康。挑选适合你     

L-脯氨酰—甘氨酸—水合物的晶体结构

含脯氨酸的小肽的结构分析工作,有助于了解由亚氨基形成的肽键的性质、脯氨酸氮戊环的构型及其对肽链转折的影响等。目前,这方面的结构数据还不多,我们试图通过L-脯氨酰—甘氨酸,甘氨酰—L-脯氨酸等简单物质的结构分析,进一步积累这方面的资料。本文先报导L-脯氨酰—甘氨酸结构分析的初步结果。在水—乙醇溶液中培养出来的脯—甘二肽晶体属单斜晶系,空间群为P21,晶胞参数a=13.21A;b=5.38A;c=6.61A;β=101°12′。晶体密度的精密测定表明,每个晶胞除了含有两个脯甘二肽分子外,还应含有两个结晶水。用Weissenberg照相法收集了CuK_α波长范围内的全部三维衍射强度,并用目测法进行测量。原始     

人参花粉植株再生及无性系的建立

人参是一种用途广,药效好的贵重中草药。人参花药培养对于人参育种工作及生物技术研究具有重要意义。1981—1984年,作者在研究中每年都得到大量愈伤组织和再生植株,并在近二年建立了无性繁殖系。现将试验结果简报如下。 人参花药取自中国农科院特产研究所参场5年生人参。接种花药的小孢子发育时期为单核中期、用MS等基本培养基,蔗糖3—6％,琼脂0.8％,pH值5.8—6.0,培养基在1kg/cm~2压力     

水稻花优势表达基因RA68的克隆和特性分析

利用减法杂交和RACEs从水稻花中克隆了1个编码含丰富脯氨酸和苏氨酸结构域多肽的cDNA, 其相应的基因命名为RA68. RA68含3个外显子和2个内含子, 编码由219个氨基酸残基组成的蛋白质. 数据分析结果显示, 该蛋白由1个22个氨基酸残基组成的信号肽, 1个亲水性的N-端结构域和1个疏水性的C-端结构域组成. N-端结构域是一段嵌合PTPTSYG motif的富含脯氨酸和苏氨酸的序列. Southern blot和序列分析结果表明, RA68在水稻基因组以单拷贝存在, 定位于第2号染色体. Northern杂交结果表明, RA68在幼芽和花中表达量较高, 在根和叶中不表达. 花和幼芽进行原位杂交分析结果表明, 在花中, RA68在花粉母细胞、二分体细胞、单核花粉粒以及大孢子囊中表达. 基于该基因的表达特性及其编码蛋白质的结构特征, 探讨了其在花发育中的可能功能.