白皮松蛋白细胞中酸性磷酸酯酶定位的超微结构研究

在３５℃，ｐＨ５．０的条件下，白皮松次生韧皮部经Ｇｏｍｏｒｉ溶液温育后，显著的酸性磷酸酯酶活性定位于成熟蛋白细胞的质膜、胞间连丝、质体和淀粉粒表面。液泡膜上无反应活性。蛋白细胞解体初期，酸性磷酸酯酶活性仍然很高。随着解体过程的加速，酶活性降低，最终消失。未成熟蛋白细胞只在质膜表面呈现出极微弱的酸性酯酶活性，而其它部位缺乏酶反应产物。作者认为酸性磷酸酯酶可能在蛋白细胞内糖类物质代谢运转和物质跨膜主动     

文昌鱼酸性磷酸酯酶色氨酸残基的修饰

从厦门文昌鱼(Branchiostonia belcheri Gary)分离纯化获得聚丙烯酰胺胶电泳单一蛋白区带的酸性磷酸酯酶(EC3.1,3.2)应用化学修饰方法,荧光以及紫外-可见光谱的变化,探讨Trp残基与酶活力的关系,被NBS修饰的Trp基团仅有一个Trp残基被氧化时,酶活力丧失90％,该Trp残基为ACPase表现活力所必需,而且优先被氧化、从光谱扫描(230～600nm)结果表明,经NBS修饰以后的酶构象发生变化,文昌鱼ACPase的Trp残基和酶分子上的铁离子等基团均为酶活力的必需基团,推测两者可能以配位结合,共同维持酶活力中心的构象。     

背角无齿蚌酸性磷酸酶的分离、纯化及部分性质研究

从背角无齿蚌外套膜中,经盐析,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－５０离子交换柱层析及Ｓｅｐｈａｄｅｘ,Ｇ－１５０凝胶过滤等步骤,分离提纯到一种酸性磷酸酶,提纯倍数８８．２５酶液比活力为２４．７Ｕ／ｍｇ,通过动力学方法测得其最适ｐＨ值为４．８,最适温度为５０℃,同样以对硝基苯磷酸二钠作底物测得其Ｋｍ值为０．７３ｍｍｏｌ／Ｌ ,Ｚｎ＾２＋对酶有激活作用,而Ｆ＾－,Ｐｂ＾２＋和Ｂａ＾２＋则对酶有一定的抑制     

一种麦芽酸性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究

经硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose CL 4B和DEAE-Sepharose CL 4B离子交换柱层析等步骤,从麦芽中分离提纯到一种酸性磷酸酶(ACPase,E．C．3．1．3．2),纯化倍数为33．06,酶液比活为88．27 U/mg．通过动力学方法测得其最适pH为5．4,酸碱稳定性较差,仅在pH 6．0左右的缓冲液中较稳定;最适温度为50 ℃,40 ℃以下有较好的稳定性;在最适条件下,该酶催化pNPP的米氏常数(Km)为4．696×10-4 mol/L．同时研究了一些金属离子和有机化合物对该酶     

文昌鱼酸性磷酸酯酶金属辅基初探

从厦门文昌鱼Branchiostoma belcheri(Gray)分离提纯酸性磷酯酶(EC3.1,3.2),进一步经Sephadex G-75和羧甲基纤维素(CM-52)柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳单一纯酶制剂,比活力为351μm/min mg。酶液吸收峰在280nm,320nm,500nm,表现出含铁离子蛋白的特征吸收峰,用原子吸收法和化学法(邻啡绕啉比色法)分析,证明了文昌鱼酸性磷酸酯酶(ACPase)含有铁离子;还原剂Na_2S_2O_4处理浓度提高,酶活力及荧光强度下降,280nm和500nm峰下降,320nm峰消失,以Na_2S_2O_4测定ACPase失活和变性速度常激,结果表明,Na_2S_2O_4的失活常数大于变性带数。     

杜仲磷酸酯酶的分离、纯化及特性分析

从杜仲嫩芽中提取和纯化磷酸酯酶,并对其性质进行了初步研究.粗酶液经盐析、DEAE-Cellulose离子交换柱,Sephadex G-25和Sephadex G-200层析柱进行纯化.该酶的最适pH值为8.0,最适温度为30 ℃,以对硝基酚磷酸酯(NPP)为底物,测得Km为3.10 μmol/L.酶活的变化受金属离子的影响,当Mg2+浓度为10 mmol/L时,对酶的激活作用最强.     

意蜂工蜂酸性磷酸酶的分离纯化及动力学研究

酸性磷酸酶在自然界中分布很广 .从低等生物大肠杆菌、酵母到高等动植物组织、体液以及人类肝脏、前列腺内都发现有ＡＣＰａｓｅ的存在[1～ 3] .目前人们对生物组织ＡＣＰａｓｅ已有相当广泛的研究 .但对昆虫类特别是蜜蜂的ＡＣＰａｓｅ研究报道较少 .为此 ,我们比较了工蜂、蜂蜜、蜂王浆和蜂蛹的ＡＣＰａｓｅ活力大小 ,并对工蜂ＡＣＰａｓｅ在分离纯化的基础上 ,对其动力学特性进行了初步研究 .该结果对于深入探讨蜜蜂在各发育周期内的代谢活动以及该酶的诱导、调节机制具有重要意义 .1　材料和方法1.1　材料鲜雄蜂虫蛹 (8日龄 )、鲜蜂蜜、…     

长毛对虾酸性磷酸酶的纯化与性质

分别从健康和患病长毛对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｐｅｎｉｃｉｌａｔｕｓ）肌肉提取一种酸性磷酸酶（ＡＣ－Ｐａｅ，ＥＣ．３．１．３．２．），进一步用硫酸铵分级分离，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱纯化，经聚丙烯酰胺凝胶电泳，并于ＢｅｃｋｍａｎＤＵ－８Ｂ紫外分光光度计扫描为单一区带酶液。该酶紫外吸峰在２８０ｎｍ处，荧光激发峰在２８４ｎｍ处，发射峰在３４７ｎｍ处。酶的分子量为７３０００道尔顿，等电点为４．７酶水解对硝基苯磷酸二钠（ＰＵＰＰ）最适ｐＨ为４．５，最适温度４０℃。健康虾与病虾酶的活化能分别为４１．０３ｋＪ／ｍｏｌ·Ｌ和４５．７８ｋＪ／ｍｏｌ·Ｌ，米多常数ｋｍ值分别为０．８０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ和１．４３×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。重金属离子Ｃｕ２＋，Ｈｇ２＋，有机溶剂甲醇，乙醇，乙二醇等对ＡＣＰａｓｅ有明显的抑制作用。     

凡纳对虾体内ACP、AKP酶的细胞化学定位

运用电镜酶细胞化学技术对凡纳对虾体内肝脏(L)、肌肉(M)、心脏(H)和复眼(E)等四种组织的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)进行了细胞化学定位,并与感染病毒的凡纳对虾四种组织中ACP、AKP的细胞化学定位进行比较.结果显示,在健康的对虾体内,ACP依次出现在各组织中的溶酶体、细胞核、细胞内膜、线粒体、内质网以及肝脏组织中的部分脂滴周围及微绒毛中AKP依次出现在各组织中的细胞膜、细胞核、溶酶体、内质网以及肝脏组织中的脂滴周围及微绒毛中.感染病毒后,对虾体内组织细胞出现了明显的病理变化,各组织细胞内均出现大量的髓样小体;各组织中ACP,AKP的超微细胞化学定位也发生了明显的规律性变化,表现为相应细胞器内ACP,AKP酶活性均减弱或消失,并在多数组织的细胞质中检测到ACP,AKP酶活性的高电子密度颗粒,且大量出现的髓样小体均呈阳性反应.     

Partial Purification and Properties of an Acid Phosphatase from Pearl Oyster Pinctada Fucata

IntroductionAcid phosphatase ( ACP,EC 3.1 .3.2 ) andalkaline phosphatase ( ALP,EC 3.1 .3.1 ) havebeen found to exist widely in the biosphere frombacteria to plants,animals and humans[18] .Thetwo enzymes catalyze the hydrolysis of variousphosphate containing compounds and act astransphosphorylases at acid- and alkaline- p Hvalue.In our lab,an alkaline phosphatase fromthe pearl oyster Pinctada fucata has been purifiedand some of its kinetics has been studied[9] .　Acid phosphatases actas ma…     

长期饥饿和再投喂对泥鳅不同组织糖原、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的影响

研究长期饥饿和再投喂对泥鳅肝、消化道和肌肉3种组织细胞糖原、酸性和碱性磷酸酶的细胞化学变化.对泥鳅进行饥饿处理,0～28 d不喂养食物,29～35 d恢复正常喂食.分别于0,7,14,21,28和35 d取材,利用显微石蜡切片、组织化学染色的方法检测其肝、消化道和肌肉细胞糖原、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)细胞化学特征.结果表明,随着饥饿程度的加深,糖原的量减少,碱性磷酸酶活性下降,酸性磷酸酶活性则增强,投喂后,糖原量、酸性和碱性磷酸酶活性都有不同程度的恢复.整个过程中,它们的变化存在组织差异.泥鳅中酸性和碱性磷酸酶均与长期饥饿条件下机体的应激反应有关.     

长毛对虾碱性磷酸酶性质

从长毛对虾内脏物分离提纯碱性磷酸酶，经快速蛋白液相色谱（ＦＰＩＣ）检验为单一蛋白纯．研究该酶的性质，酶的紫外吸收特征峰在２７８ｎｍ处，荧光激发峰在２８２ｎｍ处，发射光谱特征峰在３４０ｎｍ处．酶的分子量为８２０００道尔顿．酶水解ＰＮＰＰ的最适温度为４７℃、最适ｐＨ为８．２．在３７℃、ｐＨ８．３下，酶的Ｋｍ值为８．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ．Ｍｇ２＋对该酶有激活作用，Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋甲醇、乙醇，乙二醇则表现抑制作用．Ｈｇ２＋的抑制作用表现为反竞争性类型，其抑制常数为９．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ．     

鲍鱼碱性磷酸酶的分离纯化和性质研究

以杂色鲍(Haliotis diversicolor)内脏为原料,经Tris HCl缓冲液(pH 7.5,含0.1mol/L NaCl)抽提,正丁醇处理,硫酸铵分级沉淀分离,DE 32离子交换、Sephadex G 150分子筛、DE 32纯化,得到电泳单一纯的碱性磷酸酶制剂,比活力为1 226 U/mg.酶学性质和动力学性质研究表明:该酶催化对硝基苯磷酸水解反应的最适 pH值为 10.08,最适温度为48℃.米氏常数Km 值为0.80 mmol/L,Vm 值为20.1 mmol/L·min-1(pH 10.0,37℃).酶的热稳定性研究表明:该酶在pH 7~11区间和在温度低于55℃下稳定.金属离子对酶活力的影响结果表明:Li+、Na+和K+对酶活力没有影响,Mg2+、Ca2+、Ba2+、Mn2+和Co2+对酶有不同程度的激活作用,而Cu2+、Cd2+、Zn2+、Hg2+、Ag+、Bi2+和Pb2+等对酶起抑制作用.     

单柱离子色谱法测定葡萄不同成长期的苹果酸、酒石酸和柠檬酸

本文应用单柱离子色谱法，以邻苯二甲酸为淋洗液，测定了不同成长期的葡萄浆果中的苹果酸、酒石酸和柠檬酸，并对苹果酸和酒石酸沿葡萄浆果自顶部至柄部的分布情况进行了分析。     

萌发大豆种子中蛋白体的消化与酸性磷酸酶活性的分布

大豆种子播种后,其子叶细胞内蛋白体的消化呈三种方式：即内部均匀消化,内部非均匀消化和边缘消化,子叶蛋白体内酸性磷酸酶活性分布为：均匀分布于蛋白体的基质内、主要分布于蛋白体的一点或几点及“空腔”的边缘和优先分布于蛋白体的边缘。     

Comparison of Conformational Changes and Inactivation of Penaeus Penicillatus Acid Phosphatase during Unfolding by Urea

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＡｌｔｈｏｕｇｈｉｔｉｓｇｅｎｅｒａｌｙｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄｔｈａｔｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌｉｎｔｅｇｒｉｔｙｉｓｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｏｒｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｎｅｎｚｙｍｅ，ｒｅｌａｔｉｖｅｌ...     

磷酸盐及其结构类似物对文昌鱼酸性磷酸酶的影响

研究了磷酸盐（ＨＰＯ￣（２－）＿４）及其结构类似物钼酸盐（ＭｏＯ￣（２－）＿４），钒酸盐（ＨｖＯ￣（２－）＿４），钨酸盐（ＷＯ￣（２－）＿４）对文昌鱼酸性磷酸酶活力的影响及其抑制机理。实验结果表明：磷酸盐对文昌鱼酸性磷酸酶的抑制作用表现为竞争性抑制类型，而其结构类似物则是通过非竞争性抑制的方式抑制酶活力．抑制常数Ｋｉ分别为：磷酸盐：３．０×１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ，钼酸盐：５．５×１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ，钒酸盐：７．０×１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ，钨酸盐：３．８×１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ，用酸盐对酶活力呈时间抑制过程，表明该类似物可能通过氧化—还原这种新的抑制机理来抑制酶的活力。     

含铁副产盐酸精制

研究了新型大孔弱碱树脂ND-600、201×7强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂和D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂对副产盐酸中的铁离子有效去除,提高盐酸的精度。研究结果表明ND-600对副产盐酸中铁离子具有良好的离子交换性能;同时得到:随着盐酸的浓度提高,对铁离子交换能力逐渐提高;最佳动态实验的流速为10 BV/h,最大交换量为40BV;确定反洗液的流速为1 BV/h,同时测定脱附液了PH值,脱附液仍然具有使用价值。原副产盐酸中铁离子浓度约为76 mg/L,经ND-600树脂处理后,精制盐酸中的铁离子浓度为3 mg/L,去除率达到96.1%,达到了食用盐酸使用标准;该工艺实现了副产盐酸与资源化的有机结合,对副产盐酸的清洁生产具有十分积极的意义。