丝状真菌原生质体技术——(Ⅰ)黑曲霉原生质体灭活

在GM玻璃纸平板上接种10~6数量级的孢子悬液,31℃培养17～18hr,收集菌丝于1.5%Lywallzyme中酶解4hr,过滤离心收集原生质体,原生质体经50℃,5min处理,并20W紫外灯40cm照射,150s,0.1MHNO_2,pH4.6.再经31℃恒温处理7min,原生质体可达到全部灭活.     

Rhizoctonia solani Kuhn原生质体的制备和再生

应用市售商品酶,从立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)菌丝体中,成功地分离出高产的原生质体。日本产Cellulase “onozuka”R—101%与上海产蜗牛酶1～1.5%或者与上海产溶菌酶1～1.5%组合,在35℃,0.6M MgSO_4·7H_2O条件下,菌丝酶解效果很好。菌龄,酶及酶解条件以及培养基的成分等因素与原生质体的形成及再生密切相关。对原生质体的形成过程及再生过程的形态学变化进行了观察。二种原生质体再生转化形式,在再生培养基中能够观察得到。     

侧耳属食用菌原生质体制备与再生试验

原生质体分离与再生,是进行原生质体融合育种的先行工作。本文报告食用菌侧耳属四个种六个菌株原生质体分离与再生的试验结果。六菌株平板培养五天的幼龄菌丝体,在混合酶液中32℃摇瓶酶解5～7小时,即可全部离解。经过滤、离心、洗涤等净化的原生质体悬液,原生质体浓度多数可达2·10~5(个/毫升)以上。原生质体采用固液两种培养基进行再生培养时,菌株S_1、S_2仅在液培中获再生菌株,而S_3、S_4、S_5、S_6在固液两种培养基均获再生菌株。     

深黄被孢霉的化学诱变

以深黄被孢霉为出发菌,通过硫酸二乙酯（DES）诱变,获得优化的变异菌株XM－1,经初筛、复筛及传代实验,表明其是稳定的变异株,变异株XM－1在28℃下,发酵120h后,菌体生物量为15．1g/L,油脂量为7．5g/L,与原始菌相比,生物量、油脂量分别提高了43．8％和47％。     

菊粉酶产生菌的选育及发酵条件

野生型黑生霉ＡＪ１４０５经紫外线，硫酸二乙酯和亚硝基胍等多代诱变处理，获得一株产菊娄酶能力较高的变异菊株，连续传代１０次，ＡＪ１９５８突变株无衰退，是稳定的变异菌株。其产生的区粉酶只被菊粉，而不被蔗米糖，淀娄，纤维素，葡萄糖或果糖诱导。     

小白链霉菌(Streptomyces albulus)的原生质体制备研究

广谱天然防腐剂ε-多聚赖氨酸产生菌Streptomyces albulus的育种工作目前仅处于常规育种水平,为对其进行原生质体技术的育种改造,对影响S.albulus原生质体制备的几个重要因子进行了详细研究。测定了S.albulus的生长曲线,确定制备原生质体的最佳菌龄为稳定期初期即培养40h;S发酵液中添加2·0%甘氨酸可使原生质体形成率最高;以破坏链霉菌细胞壁效果最好的溶菌酶进行酶解,确定最佳酶解温度为为35℃、最佳酶解时间为180min、最佳溶菌酶浓度为2.0mg·mL-1;在以上最佳原生质体制备条件下可获得纯净且量多的S.albulus原生质体,形成量达1.74×108cfu·mL-1,为S.albulus原生质体的进一步遗传育种奠定了良好的基础。     

黑曲霉变异株St-9308的选育

以黑曲霉为出发菌株、经硫酸二乙酯、亚硝基胍、紫外线多次诱变，使糖化酶的活力比原菌株提高，并对其产酶条件作了研究。     

产纤溶酶菌株根霉12#的诱变育种

以产纤溶酶的华根霉12＃为出发菌株,对其进行紫外线-氯化锂复合诱变,筛选到74株制霉素抗性突变株。所有抗性突变株经进一步固体发酵筛选,获得了4株稳定高产纤溶酶的正突变株,其纤溶酶产量分别比出发菌株提高32.9%、21.5%、22.3%和18.0%。     

抗癌药物紫杉醇产生菌原生质体形成及释放规律

详细研究了抗癌药物紫杉醇产生菌树状多节孢原生质体形成和释放的规律 .从酶系组成、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂、pH值、培养基成分、培养方式、预处理等因素对树状多节孢原生质体形成和释放的影响进行了研究 ,得出了该菌的最佳原生质体制备条件及其规律 ,为以后通过原生质体技术构建紫杉醇产生菌的工程菌株奠定了基础 .     

枯草杆菌(B.subtilis)原生质体融合的方法学研究

利用改良的HM制备液,在适宜的条件下酶解制备亲本株的原生质体,在DNase存在的条件下,用PEG(MW6000)做为聚合剂,经低温短时间处理,将枯草杆菌(B.subtilis)Ki—2—132衍生株与BR_(151)衍生株的原生质体融合。再在适宜的条件下使用改良的DM_3再生培养基,补加适量经处理的人血清白蛋白,同时加入适量适合于枯草杆菌细胞壁再生的引物进行再生,使再生率达到了55～58.15％左右。融合率高达1.82×10~(-2)。筛选出51种不同类型的融合子923株,经传代8代测得其融合子的稳定率达32.46％,从而在工业菌株的选育中使获得高产菌株成为可能。     

一类二次曲面族面值分布问题

本文由Laplace方程出发,采用直接积分的方法,推导出一类二次曲面族所定义的孤立导体电荷分布的分式,从而解决了这一类孤立导体的面电荷分布问题。     

日照强度对贝母总生物碱含量的影响

用分光光度法测定了不同光照强度下生长的Fritillaria pallidiflora和平贝F.ussuriensis鳞茎中总生物碱的含量和产量．在花期，伊贝和平贝的总生物碱含量和产量分别在光照强度80％和100％时最高；在枯萎期，伊贝和平贝总生物碱含量分别在光照强度40％和20％时最高，总生物碱产量在100％和80％时最高．花期和枯萎期和两种贝母的鳞茎药材产量均在光照强度100％时最高．     

湘西北边境喀斯特溶洞发育的地质因素

本文论述了湘西北边境溶洞的发育特征、地质因素及其形成的地质时代。     

自补图半度序列和的界

自补图是图论中对称性极好的一类图,并在网络理论和设计中有一定的应用。本文论述了自补图前,后半度序列和的上、下确界。     

四角蛤蜊稚贝的温度试验初探

本文对四角蛤蜊稚贝存活的各项温度指标进行了室内研究,结果表明,四角蛤蜊稚贝起始致死温度是随着驯化的变化而改变,最高起始致死温度为３５．１℃,生长的周平均最高温度为２７．７℃     

原子核存在性问题的讨论

本根据原子核质量的半经验公式，讨论了原子核的存在性问题，并得到了一些有价值的结论。     

光滑Cramér-von Mises统计量的分布函数的收敛速度

用光滑的经验分布函数估计总体分布函数从而得到光滑的Ｃｒａｍéｒ－ｖｏｎＭｉｓｅｓ统计量，本文考虑了这种统计量收敛于极限分布的速度。     

祖厉河流域泥沙变化规律初探

基于祖厉河流域近４０年的实测资料点绘出年径流量、年输沙量双累积曲线,分析了该流域的泥沙变化规律;得出祖厉河年输沙量的大小是由流域的有效降水及祖厉河流域生态环境所决定;根据祖厉河的地理位置和其降水特点,提出从治理下及祖厉河流域生态环境所决定;根据祖厉河的地理位置和其降水特点,提出从治理下垫面着手,加强林草建设、建立新型农业结构、改善生态环境、减少水土流失等措施。     

热管换热器翅片积灰的研究

热管换热器运行时翅片积灰是影响它推广使用的关键之一,本文在摸拟的烟道内进行了翅片积灰与翅片间隙,流体流速的研究。提出已在实际运行中被验证的参数,供设计者参考。     

微观粒子的线性和非线性效应的特征研究

从薛定谔方程和其他几个基本假设的量子力学,可以得出测不准关系.如何理解这个关系,成为近代物理学争论不休、至今尚未解决的一大难题.本文从线性薛定谔方程(LSE)向非线性薛定谔方程(NLSE)的演变说明微观粒子在线性作用和非线性作用